[發明專利]玉米事件DP-004114-3及其檢測方法

在審

• 申請號: 201380028463.2
• 申請日: 2013-03-28
• 公開（公告）號: CN104411828A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: C.M.阿拉孔;M.C.哈蒙;M.A.帕斯夸爾;J.C.雷吉斯特三世;C.J.塞隆格;J.K.楊;C.X.鐘
• 申請（專利權）人: 先鋒國際良種公司;納幕爾杜邦公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12Q1/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 鄒雪梅;李炳愛

1.一種擴增子，其包含選自SEQ?ID?NO：32、SEQ?ID?NO：35及其全長互補序列的核酸序列。

2.一種源自玉米事件DP-004114-3植物、組織或種子的生物學樣品，其中所述樣品包含核苷酸序列，所述核苷酸序列為選自SEQ?ID?NO：32和SEQ?ID?NO：35的序列或與選自SEQ?ID?NO：32和SEQ?ID?NO：35的序列互補，其中所述核苷酸序列是使用核酸擴增或核酸雜交方法在所述樣品中可檢測的，其中所述玉米事件DP-004114-3種子的代表性樣品已經以登錄號PTA-11506存放于美國典型培養物保藏中心(ATCC)。

3.根據權利要求2所述的生物學樣品，其中所述生物學樣品包含轉基因玉米事件DP-004114-3的植物、組織或種子。

4.根據權利要求3所述的生物學樣品，其中所述生物學樣品是從所述轉基因玉米植物事件DP-004114-3提取的DNA樣品，并且其中所述DNA樣品包含選自SEQ?ID?NO：32、SEQ?ID?NO：35及其互補序列的核苷酸序列中的一個或多個。

5.根據權利要求4所述的生物學樣品，其中所述生物學樣品選自玉米粉、玉米粕、玉米漿、玉米油、玉米淀粉及經完全或部分地加工以含有玉米副產物的谷類物。

6.一種提取物，其源自玉米事件DP-004114-3植物、組織或種子并且包含核苷酸序列，所述核苷酸序列為選自SEQ?ID?NO：32和SEQ?ID?NO：35的序列或與選自SEQ?ID?NO：32和SEQ?ID?NO：35的序列互補，其中所述玉米事件DP-004114-3種子的代表性樣品已經以登錄號PTA-11506存放于美國典型培養物保藏中心(ATCC)。

7.根據權利要求6所述的提取物，其中所述核苷酸序列是使用核酸擴增或核酸雜交方法在所述提取物中可檢測的。

8.根據權利要求7所述的提取物，其中所述提取物包含轉基因玉米植物事件DP-004114-3的植物、組織或種子。

9.根據權利要求8所述的提取物，還包含選自玉米粉、玉米粕、玉米漿、玉米油、玉米淀粉和經完全或部分地加工以含有玉米副產物的谷類物的組合物，其中所述組合物包含可檢測量的所述核苷酸序列。

10.一種確定生物學樣品中包含玉米事件DP-004114-3的玉米植物的DNA接合性的方法，所述方法包括：

(a)使所述樣品與選自SEQ?ID?NO：29和30的引物對、或選自SEQ?ID?NO：33和34的引物對接觸，使得

(1)當在包含玉米事件DP-004114-3?DNA的核酸擴增反應中使用時，產生判定玉米事件DP-004114-3的第一擴增子，并且

(2)當在包含除DP-004114-3?DNA之外的玉米基因組DNA的核酸擴增反應中使用時，產生判定除DP-004114-3?DNA之外的玉米基因組DNA的第二擴增子；

(b)進行核酸擴增反應；以及

(c)檢測如此產生的所述擴增子，其中檢測到兩種擴增子的存在指示所述樣品是對玉米事件DP-004114-3?DNA雜合的，其中僅檢測到所述第一擴增子指示所述樣品是對玉米事件DP-004114-3DNA純合的。

11.一對多核苷酸引物，其包含第一多核苷酸引物和第二多核苷酸引物，其中所述第一多核苷酸引物包含SEQ?ID?NO：29的所述核苷酸序列及其互補序列；并且所述第二多核苷酸引物包含SEQ?ID?NO：30的所述核苷酸序列及其互補序列，所述多核苷酸引物在樣品中存在DP-004114-3?DNA模板的情況下一起發揮作用以產生判定事件DP-004114-3的擴增子。

12.一種試劑盒，其用于檢測對于事件DP-004114-3為獨特的核酸，所述試劑盒包含由SEQ?ID?NO：29和30、或SEQ?ID?NO：33和34、及其互補序列組成的引物對，所述序列在核酸檢測方法中充當引物對，并且在擴增或雜交于樣品中的靶核酸序列接著檢測所述靶序列的擴增子或與所述靶序列的雜交時，判定所述樣品中對于事件DP-004114-3為獨特的核酸序列的存在。