[發(fā)明專利]靶向和/或結(jié)合EGFL7的多肽以及抑制血管生成的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380028126.3
• 申請日: 2013-03-15
• 公開（公告）號: CN105358566A
• 公開（公告）日: 2016-02-24
• 發(fā)明（設計）人: 約翰·路易斯;曹賽鳳;倫納德·盧伊特
• 申請（專利權(quán)）人: 倫敦健康科學中心研究公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K38/17;A61K39/395;A61K47/48;A61K49/00;A61K51/08;A61P35/00;C07K7/06;C12N15/11;C07K14/485
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 王惠

發(fā)明領域

本發(fā)明涉及血管生成。更具體地，本發(fā)明涉及EGF樣結(jié)構(gòu)域7(EGFL-7)相互作用多肽，以及采用此類多肽抑制血管生成的方法與涉及病理性血管生成的治療、診斷和成像的方法。

發(fā)明背景

血供形成為許多生理過程和病理過程的基本要求，尤其是在生長旺盛的組織中，例如胚胎和腫瘤。通過生成促血管生成因子，此類組織可滿足充分血供的需求，促血管生成因子可通過復雜但有序事件(稱為血管生成)促進新血管形成。如果腫瘤生長，則認為血管生成對從增生向瘤形成轉(zhuǎn)變至關重要，并且對向腫瘤生長和轉(zhuǎn)移提供營養(yǎng)至關重要。因而，血管生成可使腫瘤生長直徑約達1mm以上，另外，還可成為轉(zhuǎn)移性腫瘤細胞播散和隨后再植的途徑。

因此，血管生正在成為癌癥的一種重要生物標志物和治療性靶標。雖然大多數(shù)現(xiàn)行無創(chuàng)性血管成像方法可以估計血管密度，但是，近期對前列腺癌腫瘤血管系統(tǒng)實施的一項綜合分析得出的結(jié)論是調(diào)整臨床因素以后微血管密度與癌癥別死亡率不相關。然而，血管的形狀和尺寸，具有高度預測性，血管形狀最不規(guī)則的患者出現(xiàn)致命性疾病的可能性升至17.1倍(Mucci等，2009，JClinOncol，27：5627-33)。

血管形成過程受到嚴格調(diào)控。迄今為止，已證實有顯著數(shù)量的分子(主要是周圍細胞產(chǎn)生的分泌因子)可調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞分化、增殖、遷移并接合成索狀結(jié)構(gòu)。舉例說明，已確定血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)為參與刺激血管生成和參與誘導血管通透性的一種關鍵因子。抗VEGF單抗或VEGF作用的其他抑制劑都是治療腫瘤和各種眼內(nèi)新生血管疾患的有前景候選物質(zhì)。舉例說明，此類抗體在EP817,648、WO1998/45331和WO1998/45332中已做介紹。

另外，已證明一種細胞外基質(zhì)(ECM)相關表皮生長因子樣結(jié)構(gòu)域蛋白7(EGFL7)可通過內(nèi)皮細胞進行表達，并且在血管生成中有一定作用(Parker等，2004，Nature，428：754-758；Nichol和Stuhlmann，2012，119：1345-1352)。

雖然有人建議用抑制性抗EGFL7單抗治療腫瘤(美國2007/0031437、美國2009/0297512、美國2010/0203041和美國2010/0285009)，但還有人建議用EGFL7激動劑加強EGFL7治療腫瘤的活性(美國專利號：7,947,278)。

仍需能有助于估計血管形狀和尺寸并且能為將EGFL7作為靶標確定不同途徑的可供選擇的成像方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明涉及靶向和/或結(jié)合EGFL7或其受體從而降低EGFL7促血管生成活性的多肽等等。這樣，此多肽在一個方面可用于治療涉及病理性血管生成的疾病、紊亂或病癥，例如，舉例說明，癌癥。

EGFL7在血管生成旺盛的內(nèi)皮中特異性表達。因此，發(fā)現(xiàn)與EGFL7結(jié)合或相互作用的多肽在一個方面也可作為病理性血管生成受試者的成像方法使用。在另一方面，此類多肽也可用做靶向抗血管生成療法的靶向部分。文中所述多肽直接或間接地與藥劑結(jié)合，此多肽能有助于將藥劑遞送到血管生成旺盛的區(qū)域，從而可使藥劑將期望區(qū)域作為靶標。

腫瘤內(nèi)存在EGFL7也可預測預后，相應地，文中所述多肽在另一方面也可作為預測癌癥受試者預后的方法。另外，發(fā)現(xiàn)文中所述多肽還可作為篩查和/或診斷癌癥或涉及病理性血管生成的其他疾病、紊亂或病癥的方法。

根據(jù)本發(fā)明的在一個方面，提供一種與EGFL7結(jié)構(gòu)域相互作用的多肽。

在一個方面，此多肽與EGFL7的C端結(jié)構(gòu)域相互作用，或多肽在EGFL7的Notch結(jié)合域外與EGFL7相互作用。

在一個方面，所述多肽與序列HMYFLLGH(SEQIDNO:5)、GSLLVHSFQQLG(SEQIDNO:6)、DPYDHEFR(SEQIDNO:7)、AYYEEAYE(SEQIDNO:8)、RYVDHEDW(SEQIDNO:9)、EWELHAEE(SEQIDNO:10)、SQSSMYPS(SEQIDNO:11)、RYQLHHPR(SEQIDNO:12)、WYKLHPTM(SEQIDNO:13)或其中的生物活性變體的一致性至少約為50％、75％、85％、90％、95％、99％或100％。

在一個方面，此多肽包含一種保守氨基酸置換。