[發(fā)明專利]細菌菌株的組合物、生物除污混合物和該組合物用于從土壤中去除污染物的用途以及用于凈化土壤污染物的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380028059.5
• 申請日: 2013-05-28
• 公開（公告）號: CN104583389A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: M.波波維斯卡;H.波斯扎克-馬勒斯扎克;I.科莫羅維斯卡
• 申請（專利權(quán)）人: 華沙大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/025;C12R1/06;C12R1/38;C12R1/01
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李慧惠;梁謀

說明書。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及以編號KKP?2041p保藏的由11種菌株組成的組合物：寡養(yǎng)單胞菌屬種(Stenotrophomonas?sp.)菌株2L、寡養(yǎng)單胞菌屬種菌株5L、寡養(yǎng)單胞菌屬種菌株6L、寡養(yǎng)單胞菌屬種菌株3N、無色桿菌屬種(Achromobacter?sp.)菌株4P、節(jié)桿菌屬種(Arthrobacter?sp.)菌株1N、短波單胞菌屬種(Brevundimonas?sp.)菌株2N、短波單胞菌屬種菌株5N、短波單胞菌屬種菌株6N、假單胞菌屬種(Pseudomonas?sp.)菌株3G、和假單胞菌屬種菌株4G，包含這些菌株的組合物的生物除污菌苗(生物除污混合物)，其從土壤中去除污染物的用途，以及土壤處理的方法。

背景技術(shù)

工業(yè)的不斷發(fā)展涉及在正常條件下在那里不會存在的化合物在環(huán)境中的出現(xiàn)。目前，硝基化合物屬于主要類型的人為污染，其中硝基苯、2-和4-硝基甲苯、3-硝基甲苯、4-硝基苯酚、3-硝基苯酚和對硝基苯胺值得特別注意。它們用于制造炸藥，用于殺蟲劑和除草劑生產(chǎn)，作為染料、塑料、涂料的合成以及制藥工業(yè)中的底物。據(jù)估計，世界上每年生產(chǎn)約10⁸噸有機硝基化合物，并且多于8.5噸的硝基苯單獨地被釋放到環(huán)境中。近80年來，這些化合物在許多工業(yè)分支以及在上世紀(jì)前半世紀(jì)連同兩次世界大戰(zhàn)中大量軍事材料和彈藥的生產(chǎn)中的廣泛使用已經(jīng)導(dǎo)致硝基化合物對環(huán)境的嚴(yán)重污染。前述類型的化合物和它們的代謝物對人具有高度毒性和危險性。它們中的一些是烈性毒藥，經(jīng)常伴有強烈致突變和致癌特性。大多數(shù)芳香族硝基化合物的特征在于它們在生物系統(tǒng)中的穩(wěn)定性和持久性和它們對降解的相當(dāng)抗性(Kulkarni和Chaudhari,?2007)。

額外關(guān)注是，硝基化合物對土壤的污染還直接威脅地下水，并且因此可導(dǎo)致這些污染物滲入流水中這一事實。來自各個工業(yè)分支的有機化合物污染土壤和地下水的問題，不僅涉及波蘭和其它歐盟國家，而且實際上涉及世界上所有工業(yè)化國家。在波蘭和世界各地，這些化合物污染環(huán)境的問題主要涉及化工廠(在那里它們被用作有機合成中的底物)周圍的區(qū)域，以及軍事基地(在那里它們被保持和儲存)的區(qū)域。

存在幾種物理-化學(xué)中和硝基化合物的常規(guī)方法，諸如氧化和光氧化，水解，蒸發(fā)，燃燒，吸附等(Kanekar等人，2003)。然而，此類方法具有許多缺點和限制。燃燒不是成本節(jié)約的，且不是環(huán)境友好的。此外，其伴隨相當(dāng)量的毒性氣體釋放到環(huán)境中。在此類程序諸如過濾、萃取或吸附在樹脂上的過程中，僅分離不需要的化合物，并且這不會導(dǎo)致其降解。同時，氧化過程使得形成毒性衍生物，且與高成本相關(guān)(Kulkarni和Chaudhari,?2007)。

開發(fā)了基于物理、化學(xué)和生物方法的幾種土地除污策略。然而，據(jù)信，最便宜且最有效的并因此是安全的生物除污技術(shù)是利用微生物的代謝潛能的技術(shù)。

生物除污是修復(fù)的過程，其中，微生物諸如細菌、酵母和絲狀真菌用于將有害物質(zhì)分解為低毒性或無毒性化合物。

為了生物除污過程的目的，微生物分離自污染環(huán)境中存在的天然微生物區(qū)系(再接種)，或通過基因工程的方法獲得。在實踐中，在生物降解過程中，涉及顯示降解某些烴基的特定能力的專門試劑盒(微生物的共生體(consortia))。此類共生體，除了高解毒活性，必須迅速適應(yīng)被污染的環(huán)境，與土著微生物區(qū)系合作，且不積累毒性分解中間體。

可以區(qū)分兩種類型的微生物制劑：含有外部來源菌株的制劑，和含有使用各種方法從處理的土壤分離的有效土著菌株的自身菌苗(autovaccine)。

專利PL?180?141公開了微生物除污石油污染的土壤的方法，其中利用從意欲經(jīng)歷處理的土壤分離的土著微生物。使分離的細菌菌株在補充石油烴的液體礦物培養(yǎng)基中在有氧條件下生長，并且鑒定之后，選擇在降解這些污染物中具有最高活性的細菌。使選擇的5至10種不同種類的細菌在26℃生長48至72小時。通過以大于10⁵個細胞/1?g干燥土壤用細菌的含水懸浮液噴灑而將繁殖的培養(yǎng)物引入污染的土壤。

專利PL?189?586公開了制備加速被石油污染的土壤和廢水的處理的自身菌苗的方法，其依賴于通過稀釋和在富含作為唯一碳源的無菌原油或萘的培養(yǎng)基中選擇性培養(yǎng)而從土壤和廢水中分離細菌。