[發明專利]表達人λ免疫球蛋白輕鏈可變結構域的動物

有效

• 申請號: 201380027944.1
• 申請日: 2013-03-18
• 公開（公告）號: CN104334732B
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發明（設計）人: A·布拉德利;E-C·李;Q·梁;W·王;D·斯彭斯伯杰;H·劉;J·克拉貝
• 申請（專利權）人: 科馬布有限公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;A01K67/027;C07K16/00
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司72002
• 代理人: 王健

1.具有正常比例的成熟脾B細胞的小鼠用于在B細胞中生產免疫球蛋白(Ig)輕鏈的應用，其中至少50％由小鼠產生的總脾B細胞是成熟B細胞，其中所述小鼠表達攜帶人λ可變區的Ig輕鏈和攜帶人κ可變區的免疫球蛋白輕鏈，其中超過30％的由所述小鼠表達的輕鏈包含λ可變區，

其中所述小鼠的基因組包含通過將人Ig基因區段靶向插入一或多個內源性Ig基因座而產生的Ig基因區段庫集，

所述基因組包含通過插入所述小鼠的一個內源性κ輕鏈基因座中恒定區上游最3’內源性Jκ和小鼠Cκ之間而提供的人Vλ和Jλ基因區段，所述人Vλ和Jλ插入至少包含人V基因區段Vλ3-27、Vλ3-25、Vλ2-23、Vλ3-22、Vλ3-21、Vλ3-19、Vλ2-18、Vλ3-16、Vλ2-14、Vλ3-12、Vλ2-11、Vλ3-10、Vλ3-9、Vλ2-8、Vλ4-3和Vλ3-1以及包含人J和C基因區段Jλ1-Cλ1、Jλ2-Cλ2、Jλ3-Cλ3、Jλ6-Cλ6和Jλ7-Cλ7，和

所述基因組包含通過插入所述小鼠的另一個內源性κ輕鏈基因座中κ恒定區的上游最3’內源性Jκ和小鼠Cκ之間而提供的人Vκ和Jκ基因區段，其中所述人Vκ和Jκ插入至少包含人V基因區段Vκ2-40、Vκ1-39、Vκ1-33、Vκ2-30、Vκ2-29、Vκ2-28、Vκ1-27、Vκ2-24、Vκ3-20、Vκ1-17、Vκ1-16、Vκ3-15、Vκ1-13、Vκ1-12、Vκ3-11、Vκ1-9、Vκ1-8、Vκ1-6、Vκ1-5、Vκ5-2和Vκ4-1以及包含人J基因區段Jκ1、Jκ2、Jκ3、Jκ4和Jκ5，

其中內源性κ鏈表達是無活性的。

2.權利要求1的應用，用于生產Ig輕鏈，其中超過35％的由所述小鼠表達的輕鏈包含λ可變區。

3.權利要求1的應用，用于生產Ig輕鏈，其中超過40％的由所述小鼠表達的輕鏈包含λ可變區。

4.權利要求1的應用，用于生產Ig輕鏈，其中超過45％的由所述小鼠表達的輕鏈包含λ可變區。

5.權利要求1的應用，用于生產Ig輕鏈，其中超過50％的由所述小鼠表達的輕鏈包含λ可變區。

6.權利要求1或2的應用，其中所述人Vλ和Jλ插入包含人Eλ增強子的插入。

7.權利要求1或2的應用，其中所述人Vλ和Jλ基因區段插入在內源性小鼠輕鏈增強子的100kb內。

8.權利要求7的應用，其中所述增強子是小鼠iEκ或3’Eκ。