[發明專利]DICKKOPF 3b的抗腫瘤性

有效

• 申請號: 201380027740.8
• 申請日: 2013-03-14
• 公開（公告）號: CN104662037B
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 杰克·L·倫納德;黛博拉·M·倫納德;卡爾·J·西敏
• 申請（專利權）人: 麻省大學醫學院
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C07K14/82;C12N5/10;C12N15/12;C12N15/63;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 北京安杰律師事務所 11627
• 代理人: 楊劍

本發明涉及利用DKK3b的腫瘤抑制功能，通過DKK3b的定位給藥來治療癌癥的新療法。公開了利用DKK3b的腫瘤抑制功能來治療腫瘤和癌癥的新的治療劑和方法。

關于聯邦資助的研究或開發的聲明

美國政府對依照NIH對馬薩諸塞醫學院(University of Massachusetts MedicalSchool)的資助Nos.DK038772和DK060051的本發明擁有一定權利。

優先權主張和相關專利申請

本申請要求2012年3月26日提交的美國臨時申請系列號61/615,514的優先權利益，所述臨時申請的全部內容通過引用為所有目的整體并入本文。

技術領域

總的來說，本發明涉及DKK3b的腫瘤抑制性和功能及其抗腫瘤應用和用途。更具體來說，本發明涉及利用DKK3b的腫瘤抑制功能，例如通過DKK3b或相關藥劑的定位給藥(site-specific delivery)來治療腫瘤和癌癥的新療法和方法。

發明背景

受抑制的Dickkopf-3(DKK3)表達是許多人類癌癥的標志，并且表達水平與腫瘤的毒性反相關(例如，在前列腺癌和卵巢癌中)。以前列腺癌為例，DKK3的過表達使前列腺癌細胞的增殖中止，但是在前列腺癌的體內和離體模型兩者中DKK3過表達的有益結果，可能是在細胞中無意地啟動ER應激反應以嘗試對過表達的外源分泌性基因產物進行加工所造成的人為現象(Abarzua等，2005 Cancer Res 65(21):9617-22；Abarzua等，2008 BiochemBiophys Res Commun 375(4):614-8；Abarzua等，2007 Int J Mol Med 20(1):37-43)。

也已報道，DKK3的腫瘤抑制活性是由它通過形成由～30kDa的細胞質DKK3基因產物和βTrCP構成的失活復合物而阻斷β-連環蛋白向細胞核移位的能力造成的(Lee等，2009Int J Cancer 124(2):287-97)。由于長期ER應激不可能是內源DKK3基因產物影響正常細胞增殖的機制，因此DKK3的非分泌性細胞內形式的確定和有利于生長停滯的兩個細胞內事件(JNK激活和β-連環蛋白失活)的發現，為明確在前列腺中介導DKK3腫瘤抑制功能的分子事件提供了機會。

由Dr.Leonard和同事進行的早期研究發現，DKK3基因座編碼第二轉錄本，其產生細胞內膜結合的29kDa蛋白(intracellular membrane associated 29 kDa protein，以前稱為D2p29，現在重命名為DKK3b)(Leonard等，2000J Biol Chem 275(33):25194-201；Farwell等，1996J Biol Chem 271(27):16369-74；Safran等，1996 J Biol Chem 271(27):16363-8；Farwell等，1993 J Biol Chem 268(7):5055-62)。

隨后的研究揭示，該DKK3b基因產物源自于位于內含子2中的第二轉錄起始位點。Dkk3b最初在星形細胞中被確定為以高親和力結合甲狀腺激素的高運載膜蛋白。DKK3基因座的分析揭示，DKK3b由外顯子3-8編碼，并且帶有TATA盒的功能轉錄起始位點位于內含子2中(圖1A)。啟動子定位(promoter mapping)研究將啟動子活性縮窄到外顯子3上游～250堿基。TATA盒的缺失阻斷啟動子功能。ChIP分析揭示出該啟動子在體內是功能的(圖1B)。