[發明專利]生理條件下的新動態光譜方法

有效

• 申請號: 201380026932.7
• 申請日: 2013-03-22
• 公開（公告）號: CN104583759B
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發明（設計）人: 皮埃爾·艾弗泰克哈瑞
• 申請（專利權）人: 銀諾維姆科學組織
• 主分類號: G01N21/359
• 分類號: G01N21/359;C07K16/24
• 代理公司: 北京市立方律師事務所11330
• 代理人: 劉莉婕

本發明涉及動態光譜學領域，更精確地說，涉及一種包括設計為確定生理以及病理條件下分子構象和組裝體(assembly)的過渡性變化(transitional change)的動態分子光譜技術。所述方法包括在嚴格控制的溫度下取得樣品體外指紋圖譜，以獲得一個或全部分子動態的精準圖像。由于其精確信息，本發明方法允許縮短藥物發現階段。

在過去的二十年間，確定分子間相互作用尤其是蛋白質-蛋白質相互作用一直是制藥公司面臨的重要挑戰之一。事實上，藥物研發正處在較少創新從而使生產力低下的階段。藥物發現項目的成功依靠從基礎研究、靶標驗證等獲得的知識的豐富度和準確度。基礎研究取決于用于解決生物問題的方法、工具和技術的針對性以及局限性。藥物發現和研發停滯不前的這一事實表明現有的方法和技術無法滿足治療需要。而且，現有藥物研發方案耗時太長，成本太高。

有幾個原因可以解釋制藥公司為何對蛋白質-蛋白質相互作用研究感興趣，并且，一些主要的公司允許對涉及生物體特定功能活性的蛋白質進行鑒定，確定對應靶標并由此確定對應受體，然后鑒定并驗證所述治療靶標和藥效結構(pharmacophore)，以及最后設計并研發能夠結合鑒定的受體、優化先導化合物并最終構建候選藥物的分子。這是傳統的藥物發現和研發方案。事實上，建立藥物研發策略需要的所有信息均來自間接探索方法，其中天然靶標用復制本或部分相同的結構代替。所有這些方法均基于基因修飾或化學修飾的修飾靶標，即純蛋白、蛋白嵌合體、突變蛋白、綴合物、敲除蛋白(knock out)等。這些方法和尖端技術均未全面考慮到生物體。相反，它們的重點在于特異性信號級聯中的特定靶標，這對于體外和體內研究都是有效的。

不幸的是，付出如此巨大精力進行研發獲得的成果仍然非常小，并且，在某些情況下由于諸如靶標驗證、先導優化等多種問題失敗了。許多失敗都是由于使用了不適合該情況的技術或使用了太簡單的生理的但驗證的研究模型。而且，許多級聯對齊的步驟，無論是否適合，僅以前一個步驟的效率為基礎。結果，不確定性或近似性導致了失敗。

此外，制藥行業正面臨新的需求，因為傳統的藥物研發仍然效率低下并且對于新療法的開發不利。醫生似乎更注重預防和治療醫學，而不是對癥治療。需要研究并理解給定疾病的病理生理學的方法和技術。也需要給出關于分子間相互作用的性質的準確信息，允許對不同的分子作用子(actor)進行鑒定，允許對靶標受體進行鑒定并且允許選擇具有有益治療效果的特異性配體的方法。理想地，所述方法是互補的，并且彼此依賴以克服現有技術的缺陷。

作為現有技術的一個實例，我們可以提及如Wubiao D.等人(Organic&Biomolecular Chemistry,2005,vol.3,n°13)或Tung CH.等人(Chembiochem,2003,4(9):897-9)中所描述的使用近紅外發光標簽如熒光素的光譜學方法。這類技術包括至少一個對感興趣的分子進行標記的步驟，并且該步驟導致廢除(abolition)含有感興趣的分子的樣品的生理條件。作為現有技術的另一實例，我們可以提及描述使用近紅外光譜檢測生理上可接受的聚合物分子的方法的專利申請EP23566467。所述方法以使用近紅外光譜對結合在感興趣的蛋白質上的聚合物的量進行的檢測為基礎，并且，對每個蛋白質分子的聚合物部分的量的測量允許生產具有相同量的聚合物部分的分子，這有助于藥物組合物的生產。當與先前計算的具有與感興趣的蛋白質綴合的已知量的聚合物分子的標準比較時，得到結果。所述方法包括純化和濃縮感興趣的蛋白質，所以廢除了生理條件，并且另一缺陷在于需要參考或標準來對研究做出結論。此外，該方法是以熒光素的NIR光譜為基礎，而不是感興趣的蛋白質的周圍環境。

專利申請WO2008/115120描述了一種檢測含水樣品中物質的結合和反應的方法，其中，所述結合或反應改變了水的光譜性質，并且所述結合或反應是通過觀察或測量水光譜性質的任何變化而測得。該文獻僅涉及一種概念，因為未對方法進行完整地描述也沒有通過數據進行說明。而且，WO2008/115120的方法不依賴于用于測量光譜性質變化的任何特定檢測裝置，并且同樣使用紅外、拉曼、太赫茲、和頻(sum frequency generation)或光聲光譜、或振動圓二色譜。