[發明專利]CAR酶及脂肪醇的改良生產

有效

• 申請號: 201380026546.8
• 申請日: 2013-04-02
• 公開（公告）號: CN104704113B
• 公開（公告）日: 2018-01-23
• 發明（設計）人: 德里克·L·格林菲爾德;伊利莎白·J·克拉克;伊萊·S·格羅班;維克朗斯·阿拉蓋達;S·李;X·李;Z·胡;B·朱
• 申請（專利權）人: REG生命科學有限責任公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12P7/04;C12P7/64
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所11038
• 代理人: 袁泉

1.一種包括如下氨基酸序列的變體羧酸還原酶(CAR)多肽，其中所述的氨基酸序列與SEQ ID NO:7的野生型CAR多肽具有至少99％的序列一致性，其中所述的變體CAR多肽經基因改造，從而在氨基酸位置處具有至少一個突變，其中所述的突變選自D18R、D18L、D18T、D18P、E20V、E20S、E20R、S22R、S22N、S22G、L80R、R87G、R87E、V191S、F288R、F288S、F288G、Q473L、Q473W、Q473Y、Q473I、Q473H、A535S、D750A、R827C、R827A、I870L、V926A、V926E、S927K、S927G、M930K、M930R、L1128W，以及如下組合：

(a)突變A535S；

(b)突變E20R、F288G、Q473I和A535S；

(c)突變E20R、F288G、Q473H、A535S、R827A和S927G；

(d)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827A和S927G；

(e)突變S3R、E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R873S、S927G、M930R和L1128W；(f)突變D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、S927G、M930K和L1128W；

(g)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、V926E、S927K和M930R；

(h)突變D18R、E20R、288G、Q473I、A535S、R827C、V926E、M930K和L1128W；

(i)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、V926A、S927K和M930R；

(j)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S和R827C；

(k)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C和M930R；

(l)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、I870L、S927G和M930R；

(m)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、I870L和S927G；

(n)突變D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、V926A和S927G；

(o)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、I870L和L1128W；

(p)突變D18R、E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、I870L、S927G和L1128W；

(q)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、S927G和L1128W；

(r)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、S927G、M930K和L1128W；

(s)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、I870L、S927G和M930K；

(t)突變E20R、F288G、Q473I、A535S、I870L、M930K；

(u)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、S927G、M930K和L1128W；

(v)突變D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、S927G和L1128W；

(w)突變E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L和S927G；

(x)突變D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、R827C、I870L、S927G和L1128W；

(y)突變D18R、E20R、S22R、F288G、Q473I、A535S、S927G、M930R和L1128W；

(z)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、V926E、S927G和M930R；或

(zz)突變E20R、S22R、F288G、Q473H、A535S、R827C、I870L、V926A和L1128W；

其中與表達SEQ ID NO:7的野生型CAR多肽的重組宿主細胞相比，所述的變體CAR多肽在重組宿主細胞中的表達得到更高的脂肪醇組合物的效價。