[發明專利]用于核酸擴增的核酸

有效

• 申請號: 201380026175.3
• 申請日: 2013-03-13
• 公開（公告）號: CN104540958B
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發明（設計）人: P·麥德波谷;D·考芬博格;K·肖恩頓
• 申請（專利權）人: 貝克頓·迪金森公司
• 主分類號: C12P19/34
• 分類號: C12P19/34
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;陸惠中

1.試劑盒，包括：

用于核酸擴增的分離的核酸模板，包括與SEQ ID NO：1或其反向互補序列具有至少約99％同一性的序列；

第一引物，包括SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：5；和

第二引物，包括SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：6。

2.權利要求1所述的試劑盒，其中所述的分離的核酸模板包括SEQ ID NO：1的序列或其反向互補序列。

3.權利要求1所述的試劑盒，其中所述的分離的核酸模板包括SEQ ID NO：8的序列或其反向互補序列。

4.權利要求1所述的試劑盒，其中所述第一引物包括SEQ ID NO：3，并且其中所述第二引物包括SEQ ID NO：4。

5.權利要求1所述的試劑盒，其中所述第一引物包括SEQ ID NO：5，并且其中所述第二引物包括SEQ ID NO：6。

6.權利要求1-5任一項所述的試劑盒，進一步包括寡核苷酸探針，所述寡核苷酸探針包括SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：16。

7.權利要求1、2、4或5任一項所述的試劑盒，

其中所述的分離的核酸模板包括SEQ ID NO：1或其反向互補序列，

所述試劑盒進一步包括至少一種寡核苷酸探針，其中所述至少一種寡核苷酸探針包括SEQ ID NO：2。

8.定量樣品中的核酸量的方法，所述方法包括：

提供一定量的多核苷酸，所述多核苷酸包括與SEQ ID NO：1的序列具有至少約99％同一性的序列；

使所述多核苷酸接觸正向引物和反向引物，其中所述正向引物包括SEQ ID NO：3和5中的至少一個，并且其中所述反向引物包括SEQ ID NO；4和6中的至少一個，

其中所述接觸在標準PCR條件下發生，

延伸所述正向引物和反向引物，從而生成至少一種目標擴增子；和

檢測與所述至少一種目標擴增子的數量成比例的信號。

9.權利要求8所述的方法，其中所述正向引物包括SEQ ID NO：3，并且所述反向引物包括SEQ ID NO：4。

10.權利要求8所述的方法，其中所述正向引物包括SEQ ID NO：5，并且所述反向引物包括SEQ ID NO：6。

11.權利要求8-10任一項所述的方法，其中檢測與提供的擴增子的量成比例的信號包括使所述擴增子與單鏈寡核苷酸探針接觸，所述單鏈寡核苷酸探針在標準PCR條件下、在至少50℃的溫度下與所述擴增子退火。

12.權利要求11所述的方法，其中所述單鏈寡核苷酸探針包括SEQ ID NO：2或SEQ IDNO：16。

13.權利要求11所述的方法，其中所述單鏈寡核苷酸探針進一步包括至少一種熒光團和至少一種猝滅劑。

14.權利要求12所述的方法，其中所述單鏈寡核苷酸探針進一步包括至少一種熒光團和至少一種猝滅劑。

15.權利要求8所述的方法，進一步包括，在從樣品提取核酸前，使所述量的多核苷酸接觸樣品。

16.權利要求8所述的方法，其中延伸所述正向引物和反向引物包括下列中的至少一種：聚合酶鏈式反應(PCR)、鏈置換擴增(SDA)、環介導的等溫擴增(LAMP)、連接酶鏈式反應(LCR)、免疫擴增、轉錄介導的擴增(TMA)、基于核酸序列的擴增(NASBA)、自持序列復制(3SR)和滾環擴增。