[發明專利]由人多能干細胞衍生內皮細胞

無效

• 申請號: 201380024629.3
• 申請日: 2013-05-01
• 公開（公告）號: CN104302764A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: R·岡薩雷斯;I·加里陶南迪亞;R·斯莫切肯
• 申請（專利權）人: 國際干細胞公司
• 主分類號: C12N5/0789
• 分類號: C12N5/0789
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;陸惠中

1.一種產生內中胚層前體細胞的方法，其包括：

(a)用糖原合成酶激酶3(GSK-3)抑制劑處理人多能干細胞(hPSC)；以及

(b)針對內中胚層細胞標記物對所述細胞進行測定。

2.根據權利要求1所述的方法，其中將所述hPSC用所述GSK-3抑制劑處理24小時。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述GSK-3抑制劑為Chir99021或其鹽或類似物。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述內中胚層前體細胞標記物選自由以下各項組成的組：MIXL1、NODAL和Brachyury或其任意組合。

5.根據權利要求4所述的方法，其中所述內中胚層前體細胞標記物為Brachyury。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述hPSC選自由以下各項組成的組：人胚胎干細胞(hESC)、人孤雌生殖干細胞(hpSC)或誘導的多能干細胞(iPSC)或自其衍生的細胞系。

7.一種內中胚層前體細胞，其通過根據權利要求1所述的方法衍生。

8.根據權利要求7所述的內中胚層前體細胞，其中所述GSK-3抑制劑為Chir99021或其鹽或類似物。

9.根據權利要求7所述的內中胚層前體細胞，其中所述內中胚層前體細胞標記物為Brachyury。

10.一種產生內皮細胞的方法，其包括：

(a)用糖原合成酶激酶3(GSK-3)抑制劑處理人多能干細胞(hPSC)；

(b)通過鑒別內中胚層細胞標記物來鑒別內中胚層前體細胞(EMPC)；

(c)用至少一種生長因子處理所述EMPC；以及

(d)針對內皮細胞標記物對所述細胞進行分析。

11.根據權利要求10所述的方法，其中將所述hPSC用所述GSK-3抑制劑處理24小時。

12.根據權利要求11所述的方法，其中所述GSK-3抑制劑為Chir99021或其鹽或類似物。

13.根據權利要求10所述的方法，其中所述內中胚層前體細胞標記物選自由以下各項組成的組：MIXL1、NODAL和Brachyury或其任意組合。

14.根據權利要求13所述的方法，其中所述內中胚層前體細胞標記物為Brachyury。

15.根據權利要求10所述的方法，其中將所述EMPC用所述生長因子處理72小時。

16.根據權利要求10所述的方法，其中所述生長因子選自由以下各項組成的組：bFGF、VEGF和BMP4或其任意組合。

17.根據權利要求16所述的方法，其中所述生長因子為bFGF和VEGF。