[發明專利]用紅外光譜進行皮膚癌生物標志物檢測

在審

• 申請號: 201380024526.7
• 申請日: 2013-03-23
• 公開（公告）號: CN104394758A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 娜塔莉亞·埃克宜
• 申請（專利權）人: MC專業有限公司;IR臨床癌癥診療有限公司;娜塔莉亞·埃克宜
• 主分類號: A61B5/00
• 分類號: A61B5/00;G01N21/35;G01N33/483
• 代理公司: 深圳市博銳專利事務所 44275
• 代理人: 張明

技術背景

1.技術領域

本發明大體上涉及通過對1055cm-1附近多重譜線的紅外光譜歸屬來鑒定用于活組織檢查的人體皮膚表皮癌組織中的癌癥分子生物標志物的領域，更具體地說，涉及一種能鑒定人體表皮中是否存在DNA/RNA比值峰、有助于診斷鱗狀細胞癌(SCC)、基底細胞癌(BCC)和惡性黑色素瘤(MM)的檢測方法。皮膚癌生物標志物譜帶的特異性和敏感性與皮膚癌類型和演進相關，有助于確定患者治療的預后和預測。對人體皮膚表皮癌組織中癌癥分子生物標志物的定性和定量評估可幫助做出表皮皮膚癌和初癌的預后、診斷和預測。另外，對多重譜線以及1071、1084/1085和1095cm-1附近DNA/RNA三聯體峰模式化出現的檢測可說明與某些類型的腫瘤和惡性腫瘤有關，還能說明惡性腫瘤的演進和向惡性腫瘤演進。

雖然使用皮膚組織作為代表性組織，但是生物標志物的檢測方法并不限于測量皮膚表皮組織，該領域技術人員會明白它還可應用于其他組織。

2.背景技術

表皮皮膚癌臨床診斷的特異性和敏感性在約40％至80％之間變動。診斷的準確性在很大程度上取決于臨床醫生的訓練和經驗程度。據報道，受過訓練的皮膚科醫生為80％，高級主治醫師為62％，主治醫師為56％，非皮膚科醫生約為40％。同樣對于最常見的皮膚癌“基底細胞癌(BCC)”的臨床診斷準確性，執業皮膚科醫生僅為65％。另一種由表皮中部衍生的皮膚癌“鱗狀細胞癌(SCC)”在典型的臨床病例中很容易診斷，但當位于生殖器和唇上時有時候可能較難診斷，從而導致誤診和迅速轉移，造成約75％的患者死亡。鮑文病(表皮內原位癌)和很多其他癌癥前期皮膚病在皮膚科臨床中通常較難診斷，因為很多其他皮膚病變酷似這類疾病。惡性黑色素瘤(MM)的臨床診斷常常會與良性色素性病變弄混，而導致高達80％的不必要的活組織檢查。但重要的是，診斷為MM的患者在其余下的時間里應對其進行監控并檢查是否出現局部復發、轉移和新惡性病變。

據報道，憑借進行形態學圖像識別的許多特征，皮膚鏡檢查對表皮皮膚癌和初癌診斷的準確性已有所提高。但這些圖像的正確識別需要有皮膚病學方面的長期訓練，而且專家之間對許多病例的解釋也存在很大的不同。

共聚焦顯微鏡檢查以對表皮中角質形成細胞的細胞圖像進行解釋和結合與標準組織結構的關聯性對病理相關的圖像進行細胞形態學識別為基礎，在表皮皮膚癌和初癌的診斷中可能有用。雖然這一技術提高了表皮皮膚癌和初癌的診斷準確性，但對某些皮膚病變仍具有上述局限性。

盡管利用形態圖像識別對用于活組織檢查的癌組織進行常規組織病理學鑒定依舊是皮膚腫瘤臨床診斷的黃金標準，但組織病理學評估的主要缺點是延誤確診和病理醫生之間的解釋有差異。

為了減少假陰性結果，日益需要一種能需求的新型診斷技術，以提高“難確診病例”在較短期限內診斷的可能性。因此，現在臨床皮膚病學迫切需要一種新穎、快速、無創診斷技術，這種技術應能應用于實時初步和后續篩選以滿足皮膚腫瘤臨床診斷的需要，從而理想地代替人為解釋。

紅外(IR)顯微分光鏡是一種對取自任一解剖部位用于活組織檢查未經染色的組織進行光譜評價的工具。不需要外部對照物誘導劑，根據其固有特性，就能很容易呈現細胞成分和化學組成。這種技術能為核酸、蛋白質、脂類和水提供具體樣本的分子信息，即獨特的光譜指紋，從而為獲得疾病診斷標志物提供了可能的方法。

癌組織的光譜分析因其對多種人類癌癥樣本生物化學變異的敏感性而成為一種診斷技術受到了廣泛關注。

皮膚組織紅外吸收光譜符合用作臨床上有用的標志物的所有特征。蛋白質是細胞中含量最豐富的一種物質，由于其在細胞和組織中的濃度約為60％，因此在所觀測的細胞和組織，包括皮膚光譜中也占主要部分。紅外光譜中良性、惡化前和惡性皮膚癌的核酸一直都是在有蛋白質存在的情況下進行觀測。核酸DNA和RNA的結構中攜帶了決定蛋白質特性和結構的遺傳信息，因此它們是特別重要的物質。由于其對核酸構象及構象轉變、堿基組成的鑒定的高度敏感性以及對堿基配對相互作用和堿基堆積作用有敏感性，中紅外吸收光譜是一種描繪細胞中整個蛋白組的信息最豐富且最簡明的方法。這使紅外光譜技術比僅提供與個別核苷酸有關的信息的其他振動光譜技術、拉曼光譜有更大優勢。