[發明專利]用于真核細胞的培養基

無效

• 申請號: 201380024340.1
• 申請日: 2013-03-08
• 公開（公告）號: CN104302759A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 阿希謝卡·古普塔;米雷列·瑪麗亞·加德利亞;多米尼克·伊夫·威利·馬埃斯
• 申請（專利權）人: 菲仕蘭產品有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 余剛;張英

1.一種生產用于培養真核細胞的培養基的方法，包括向另外的常規培養基成分加入作為生長促進和/或生產改進的成分的以下各項的步驟：

(i)一種或多種C₂-C₆α-羥基酸、這些酸的鹽、這些酸的酯和它們的組合；以及

(ii)一種或多種選自以下化合物的組的化合物：

a)由γ-谷氨酰基氨基酸、焦谷氨酰基氨基酸、包含谷氨酸或包含脯氨酸的二肽、氧代氨基酸、高氨基酸、N-乙酰基氨基酸和甘氨酰基-甘氨酸組成的氨基酸衍生物的組；

b)酚酸衍生物；

c)直鏈C₂-C₆或環狀C₆糖醇；

d)吡啶酸衍生物；和

e)選自尿嘧啶、腺嘌呤、3’-單磷酸腺苷(3’-AMP)和5’-單磷酸腺苷(AMP)的核堿基和/或核苷酸，

或選自化合物組a)、b)、c)、d)和e)的化合物的組合，

使得列于(i)和(ii)下的每種單獨的化合物在所述培養基中的最終濃度是至少0.001mg/l，其中，所述化合物作為純物質或作為濃縮物添加。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，每種單獨的化合物在所述培養基中的最終濃度是至少0.01mg/l，優選至少0.1mg/l，最優選至少1mg/l。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述C₂-C₆α-羥基酸選自乳酸、L-3-苯基乳酸、檸檬酸、粘(半乳糖二)酸、葡糖酸、葡糖二酸、甘油酸、2-羥基丁酸、α-羥基異戊酸、α-羥基異己酸和三羥基丁酸，優先選自乳酸、L-3-苯基乳酸和粘酸。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其中，所述氨基酸衍生物選自γ-谷氨酰基-酪氨酸、γ-谷氨酰基-苯丙氨酸、環甘氨酰基-谷氨酸、纈氨酰基谷氨酸、5-氧代脯氨酸和β-丙氨酸。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中，所述酚酸選自阿魏酸((E)-3-(4-羥基-3-甲氧基-苯基)丙-2-烯酸)、丁香酸(4-羥基-3,5-二甲氧基苯甲酸)、香草酸(4-羥基-3-甲氧基苯甲酸)、芥子酸(3-(4-羥基-3,5-二甲氧基苯基)丙-2-烯酸)，這些酸的酯或這些酸的鹽，優選阿魏酸、丁香酸，這些酸的酯或這些酸的鹽，這些酸的鹽和這些酸的酯。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中，進一步將植物蛋白質水解產物加入至所述培養基。

7.根據權利要求4所述的方法，其中，所述植物蛋白質水解產物是小麥、大豆、棉花或豌豆蛋白質水解產物，或者兩種或更多種這些水解產物的混合物。

8.一種通過根據權利要求1-7中任一項所述的方法可獲得的細胞培養基。

9.一種用于培養真核細胞的培養基，包含至少0.001mg且至多50g/l，或者至少0.02mg/kg的干物質的以下每種單獨的組分：

(i)一種或多種C₂-C₆α-羥基酸、這些酸的鹽、這些酸的酯和它們的組合；以及

(ii)一種或多種選自以下化合物的組的化合物：

f)由γ-谷氨酰基氨基酸、焦谷氨酰基氨基酸、包含谷氨酸或包含脯氨酸的二肽、氧代氨基酸、高氨基酸、N-乙酰基氨基酸以及甘氨酰基-甘氨酸組成的氨基酸衍生物的組；

g)酚酸衍生物；

h)直鏈C₂-C₆或環狀C₆糖醇；

i)吡啶酸衍生物；和

j)選自尿嘧啶、腺嘌呤、3’-單磷酸腺苷(3’-AMP)和5’-單磷酸腺苷(AMP)的核堿基和/或核苷酸，

或選自化合物組a)、b)、c)、d)和e)的化合物的組合。

10.根據權利要求8或9所述的細胞培養基，包含的所列出的組分為0.01mg/l，優選至少0.1mg/l，更優選至少1mg/l，最優選至少5mg/l，或至少0.02mg/kg，優選至少0.2mg/kg，更優選至少2mg/kg，甚至更優選至少20mg/kg，最優選至少250mg/kg的干物質的濃度的列于i)和ii)下的每種單獨的組分。