[發明專利]生物防治

有效

• 申請號: 201380023783.9
• 申請日: 2013-03-05
• 公開（公告）號: CN104271747B
• 公開（公告）日: 2017-11-14
• 發明（設計）人: L·阿爾菲
• 申請（專利權）人: 奧西泰克有限公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;A01K67/033
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司11021
• 代理人: 張國梁

1.一種適于在節肢動物雄性生殖系中條件表達效應物基因的節肢動物雄性生殖系基因表達系統,所述系統包括：

-第一表達單元，所述第一表達單元包含效應物基因和與其可操作連接的用于其的啟動子；和

-第二表達單元，所述第二表達單元包含轉錄因子的編碼序列和可操作連接于其的上游調控元件,所述轉錄因子能夠作用于第一表達單元的啟動子上以驅動效應物基因的表達,所述上游調控元件包括：

-轉錄因子的啟動子，其中所述啟動子來自matotopetli(topi),always early(aly)或β-2微管蛋白基因；和

-在轉錄因子編碼序列起始位點上游的5’UTR，其中所述5’UTR來自topi,aly或熱休克蛋白(hsp)基因，

所述上游調控元件驅動轉錄因子的足量表達，從而轉錄因子蛋白轉而在減數分裂前驅動效應物基因的轉錄。

2.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中第二表達單元的上游調控元件中的5’UTR是來自hsp83。

3.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中第二表達單元的上游調控元件中的5’UTR是來自地中海果蠅hsp83。

4.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中第二表達單元的上游調控元件中的5’UTR是來自在目標節肢動物中發現的hsp83。

5.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中所述轉錄因子是轉錄激活劑。

6.根據權利要求5所述的基因表達系統,其中所述轉錄因子包括tTA、tTAV、tTAV2、tTAV3、GAL4或GAL4-VP16。

7.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中所述效應物包含核酸酶。

8.根據權利要求7所述的基因表達系統,其中所述效應物包括核酸內切酶。

9.根據權利要求7所述的基因表達系統,其中所述效應物包括3-鋅指核酸酶。

10.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中第一表達單元的啟動子是最小啟動子。

11.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中所述表達系統包括Gal4-UAS系統,并且轉錄因子是GAL4。

12.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中所述系統是誘導型系統,其中誘導通過提供或缺乏化學實體發生。

13.根據權利要求12所述的基因表達系統,其中所述化學實體包括四環素、多西環素或氯四環素。

14.根據權利要求12所述的基因表達系統,其中所述化學實體包括多西環素。

15.根據權利要求12所述的基因表達系統,其中第二表達單元中的轉錄因子是tTA或其變體,所述變體選自由以下各項組成的組：tTAV,tTAV2和tTAV3。

16.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中第二表達單元的轉錄因子是tTA、tTAV、tTAV2或tTAV3,并且所述第一表達單元包括tet操縱子(tetO)。

17.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中所述節肢動物是昆蟲。

18.根據權利要求17所述的基因表達系統,其中所述昆蟲是雙翅目(Dipteran)。

19.根據權利要求17所述的基因表達系統,其中所述昆蟲是蚊子。

20.根據權利要求17所述的基因表達系統,其中所述昆蟲是實蠅科(Tephritid)。

21.根據權利要求17所述的基因表達系統,其中所述昆蟲是地中海果蠅或橄欖果蠅。

22.根據權利要求1所述的基因表達系統,其中所述效應物是核酸酶并賦予或給予父本致死效應。

23.一種在性腺或精子中表達效應物蛋白的方法,所述方法包括用根據任一項在前權利要求的表達系統轉化所述性腺。

24.一種群體控制的方法，所述方法包括在雄性節肢動物的性腺中表達根據權利要求1-22任一項所述的表達系統的效應物蛋白。

25.一種抗性管理方法，所述方法包括使用根據權利要求1-22任一項所述的表達系統。