[發明專利]表征漿細胞相關疾病的方法

無效

• 申請號: 201380023667.7
• 申請日: 2013-03-06
• 公開（公告）號: CN104272113A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: S·哈丁;R·休斯;H·卡爾-史密斯
• 申請（專利權）人: 結合點集團有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 過曉東

技術領域

本發明涉及一種改良的表征患者的漿細胞疾病的方法以及進行所述方法的裝置和試劑盒。

背景技術

申請人已研究游離輕鏈作為測定患者廣泛的單克隆丙種球蛋白病的一種方式許多年。這類游離輕鏈在診斷中的用途在書“Serum?Free?Light?Chain?Analysis,Sixth?Edition(2008)A.R.Bradwell,ISBN?9780704427969”中詳細綜述。多克隆異常也是已知的，其中患者有減少或增加的多克隆抗體生成。

抗體包含重鏈和輕鏈。它們通常具有雙重對稱性，并且由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈組成，每條包含可變區和恒定區結構域。每個輕鏈/重鏈對的可變結構域組合形成抗原結合位點，從而兩條鏈均促成抗體分子的抗原結合特異性。輕鏈有兩種類型，κ和λ，并且任何給定抗體分子均具有任一種輕鏈，但不會具有兩種。在人中產生的κ分子是λ分子的大約兩倍，但是這在一些哺乳動物中不同。通常輕鏈附著至重鏈。但是，在個體的血清或尿中可檢測到一些未附著的“游離輕鏈”(FLC)。游離輕鏈可以通過產生針對游離輕鏈表面的抗體來特異性地鑒定，游離輕鏈表面通常通過輕鏈與重鏈的結合而隱藏。在游離輕鏈中，這種表面被暴露，從而允許其免疫檢測。可商購的用于檢測κ或λ游離輕鏈的試劑盒包括例如The?Binding?Site?Limited,Birmingham,United?Kingdom制造的“Freelite^TM”。申請人以前已鑒定測量游離κ、游離λ和/或游離κ/游離λ比例，允許檢測患者的單克隆丙種球蛋白病。例如，其已在完整免疫球蛋白多發性骨髓瘤(MM)、輕鏈MM、非分泌型MM、AL淀粉樣變、輕鏈沉積病、郁結性MM、漿細胞瘤和MGUS(意義未明的單克隆丙種球蛋白病)的診斷中用作輔助。例如，FLC的檢測還已用作其他B-細胞體液不調診斷的輔助，并且實際上一般用作單克隆丙種球蛋白病診斷的尿本周蛋白分析的替代。

通常，尋找λ或κ輕鏈之一的增加。例如，多發性骨髓瘤(MM)由惡性漿細胞的單克隆增殖所致，導致產生單一類型免疫球蛋白的單一類型細胞增加。這導致在個體內觀察到游離輕鏈λ或κ的量增加。可以確定這種濃度增加，并且通常確定游離κ比游離λ的比例并與正常范圍進行比較。這有助于單克隆疾病的診斷。此外，游離輕鏈測定還可以用于跟蹤患者疾病的治療。例如，可以進行AL淀粉樣變治療后患者的預后。

Katzmann?et?al(Clin.Chem.(2002)；48(9):1437-1944)討論了單克隆丙種球蛋白病的診斷中游離κ和游離λ免疫球蛋白的血清參考間隔和診斷范圍。通過免疫測定研究了21-90歲的個體，并且與通過免疫固定獲得的結果進行比較以優化檢測患有B-細胞體液不調的個體中單克隆游離輕鏈的免疫測定。

記錄κ和λFLC量以及κ/λ比例，允許確定參考間隔用于檢測B-細胞體液不調。

申請人以前還已鑒定FLC的測定可以用來預測個體的長期存活，甚至當個體是表面上健康的對象時也是如此(WO?2011/021041)。他們發現總FLC濃度與長期存活統計上顯著相關。此外，這種關聯看來與現有的長期存活預后標記如膽固醇、肌酸酐、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C和C-反應蛋白的關聯相似或更好。總FLC測量的測定在文件中公開。測量總FLC的測定可獲得自The?Binding?Site,Birmingham,United?Kingdom，商標為“Combylite”。

還已發現測量重鏈類別至輕鏈類型結合特異性(HLC)免疫球蛋白如IgAλ、IgAκ、IgGκ、IgGλ、IgMκ或IgMλ有助于表征單克隆丙種球蛋白病。重鏈類別-輕鏈類型特異性抗體以及它們的用途在WO?2006/079816中公開。這類抗體可商購自The?Binding?Site,Birmingham,United?Kingdom，商標為“Hevylite”。

與多克隆異常相關的疾病一般是已知的，其中一種以上特異性抗體的生成增加或減少。例如，這可以通過抗體生成的普遍增加或者通過存在來自兩種不同腫瘤來源的兩種或更多種單克隆抗體來表征。慢性感染、自身免疫性疾病和許多腫瘤引起多克隆免疫球蛋白的增加。皮膚、肺和腸疾病更可能引起IgA濃度的增加，而全身性感染會增加所有免疫球蛋白，但特別是IgG。