[發(fā)明專利]裝置和方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380022184.5
• 申請日: 2013-02-27
• 公開（公告）號: CN104487003B
• 公開（公告）日: 2017-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: M·伊斯特;F·馬亞爾
• 申請（專利權(quán)）人: 埃克斯穆爾創(chuàng)新有限公司
• 主分類號: A61B10/00
• 分類號: A61B10/00;A61B10/02
• 代理公司: 北京北翔知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11285
• 代理人: 楊勇,鄭建暉

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及裝置、細胞塊試樣、獲得細胞塊試樣的方法、以及同時獲得細針抽吸(FNA)和多個細胞塊試樣的方法。

背景技術(shù)

在醫(yī)學(xué)診斷期間，經(jīng)常有必要分析從病人取得的細胞試樣，例如為了診斷腫瘤。這樣的診斷方法通常使用細胞學(xué)檢查或組織學(xué)檢查來執(zhí)行。細胞學(xué)檢查涉及：涂片或以其他方式將細胞的液體試樣沉積到載玻片上，且然后在顯微鏡下檢查細胞。組織學(xué)檢查涉及：取得固體組織試樣，固定該試樣，加工該試樣，切取一個非常薄的部分到載玻片上，且然后在顯微鏡下檢查該部分。

一種從病人取得細胞試樣用于細胞學(xué)檢查的方法是細針抽吸(FNA)。FNA是一種診斷流程，通常用于勘測腫塊或團塊，諸如在對乳腺癌和甲狀腺癌的診斷中。在這項技術(shù)中，借助于具有空心的細針諸如皮下針頭，從病變處抽吸單個細胞和小細胞復(fù)形。針頭被導(dǎo)入病變處并攪動以分離病變處的細胞。在皮下組織和外部大氣壓之間有相應(yīng)地從高到低的壓力差，通過注射器吸取可使該壓力差變大。由于癌細胞之間比健康細胞之間更低的粘附力水平，可增大試樣中癌細胞濃度。取得細胞試樣之后，通過例如將細胞噴射到載玻片上來檢查細胞材料，在載玻片上將細胞涂片、固定、染色并用顯微鏡對細胞進行細胞學(xué)檢查。

用于分析細胞的某些診斷技術(shù)最好是對細胞塊實行。細胞塊是被制成固體的液體細胞學(xué)試樣。細胞塊通常從FNA標本制備，或者從漿液狀流體標本如胸膜流體(來自肺周圍的胸膜腔)或腹水流體(來自腹部器官周圍的腔)制備。

由液體細胞試樣制備細胞塊的已知方法包括，將濃縮細胞的顆粒(pellet)包裹到薄紙里，或向細胞的液體濃縮物中加入不同的固化材料如瓊脂和凝血酶。HistoGel(Thermo?Scientific,拉夫堡，英國)是一種市場上可買到的細胞塊固化劑，其中主要成分是羥乙基瓊脂糖。將這些固化劑作為液體加入到試樣中，然后任由固化。上述已知方法描述在Koss的“diagnostic?cytology?and?its?histopathologic?bases”,第2卷,Leopold?G.Koss,Lippincott?Williams&Wilkins，2006年，第1590-1592頁，且在US?5,137,710中描述。

固化后細胞塊可被固定并經(jīng)過石蠟加工。石蠟加工是一種廣泛用于制備用于顯微鏡檢查的有機組織試樣的技術(shù)。有機組織試樣通常含有水，且此技術(shù)涉及用石蠟代替水。實現(xiàn)用石蠟代替水通常通過首先用一種親水性有機溶劑如乙醇代替水。這種有機溶劑之后通過多個步驟被代替，這些步驟通常涉及伴隨著熱的液態(tài)石蠟(熔點在從47℃到64℃的范圍內(nèi))使用二甲苯。一旦材料經(jīng)石蠟加工后冷卻，可以把材料切片成很薄的切片，通常約3微米厚，不會造成材料破碎，因為石蠟幫助支撐組織的結(jié)構(gòu)。這項技術(shù)的概覽在“The?science?of?laboratory?diagnosis”給出，David?Burnett，John?Crocker，John?Wiley&Sons，2005年，第7-11頁。

Mayall?F.G.等人于2011年在J.Clin.Pathol第64卷第818-819頁描述了一種使用明膠海綿由漿液流體標本制造細胞學(xué)細胞塊，這涉及在通用的容器中將漿液流體離心旋轉(zhuǎn)，使用移液器去除上清液，以在容器底部處留置細胞沉積物，且將這些細胞吸收到一塊明膠海綿上，然后用乙醇或甲醛固化。漿液流體試樣通常不是通過FNA技術(shù)獲得，而是通過插入導(dǎo)液管到胸膜腔或腹腔中。

細胞塊切片允許研究試樣的更多的形態(tài)學(xué)細節(jié)，例如，異常組織的架構(gòu)或細胞的細胞質(zhì)和細胞核的微細節(jié)。另外，細胞塊切片允許對輔助的診斷測試諸如免疫組織化學(xué)和原位雜交進行評估。例如，經(jīng)常需要細胞塊免疫組織化學(xué)和其他分子研究，以將最初通過FNA細胞學(xué)診斷的腫瘤的特征完全表征。這些分子探查變得越來越重要，因為它們確定對腫瘤的治療。例如，藥物曲妥珠單抗(赫賽汀，)對于治療乳腺癌有效，但只在癌細胞表現(xiàn)出人類表皮生長因子受體2(HER2)的擴增時有效。在計劃治療之前，必須使用免疫組織化學(xué)和原位雜交對癌細胞進行關(guān)于HER2擴增的測試，且此測試最好是使用細胞塊材料而不是細胞涂片材料完成。