[發(fā)明專利]糖基化改性的四官能的非離子兩親性嵌段共聚物作為免疫佐劑的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380021126.0
• 申請(qǐng)日: 2013-03-01
• 公開（公告）號(hào): CN104519889B
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 布律諾·皮塔爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家健康與醫(yī)學(xué)研究院;國(guó)家科學(xué)研究中心;南特大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/77
• 分類號(hào): A61K31/77;A61P43/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所11256
• 代理人: 孟凡宏,謝燕軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及疫苗接種的領(lǐng)域，更特別涉及新型免疫佐劑。特別是，本發(fā)明涉及糖基化四官能的非離子兩親性嵌段共聚物作為免疫佐劑的用途。

背景技術(shù)

如Le Moignic在1916年所述，研發(fā)的第一個(gè)佐劑是基于油包水乳液。后來(lái)，已研發(fā)了眾多有效的佐劑，但由毒性副作用引起的不良反應(yīng)已限制它們用于人類的疫苗。在1937年，F(xiàn)reund已研發(fā)出包含與滅活細(xì)菌結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)混合的礦物油的弗氏佐劑。雖然該佐劑由于嚴(yán)重的副作用禁止用于人類，但其仍然用于獸禽疫苗(Broderson，Lab Anim Sci，1989，39，400-5)。以另一種方式，Glenny等最先使用由食品與藥物管理局批準(zhǔn)的唯一佐劑鋁鹽(明礬)(Gupta，R.K.，Adv Drug Deliv Rev，1998，32，155-172)。明礬誘導(dǎo)與微弱的細(xì)胞免疫有關(guān)的體液免疫反應(yīng)，但不是粘膜免疫，并且可能是變態(tài)反應(yīng)的原因。近年來(lái)，研發(fā)出角鯊烯水包油乳液(MF59)，并在歐洲批準(zhǔn)用于流感疫苗(Ott，G.，G.L.Barchfeld，和G.Van Nest，Vaccine，1995，13，1557-62；Cataldo，D.M.和G.Van Nest，Vaccine，1997，15，1710-5)。雖然這些佐劑能夠誘導(dǎo)強(qiáng)烈的體液免疫反應(yīng)，但僅觀察到微弱的細(xì)胞反應(yīng)，并且通常觀察到高毒性。

基于它們的作用機(jī)理，已研發(fā)出不同類型的佐劑，如脂質(zhì)體基佐劑或免疫刺激復(fù)合物(ISCOM)。然而，它們與溶血活性和局部炎癥反應(yīng)有關(guān)，并且僅用于獸禽疫苗。或者，已提出通常衍生自病原體如脂多糖、單磷酰A或CpG DNA的免疫刺激成分作為與其它佐劑如明礬結(jié)合的佐劑(特別是用于亞單位疫苗)以引起強(qiáng)烈的體液反應(yīng)。然而，它們同樣趨于誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生，這阻礙它們用于人類(Gustafson，G.L.和M.J.Rhodes，Res Immunol，1992，143，483-8)。此外，雖然這些佐劑提供強(qiáng)烈的體液免疫反應(yīng)，但通常觀察到微弱的細(xì)胞反應(yīng)并且缺乏安全性。

設(shè)計(jì)亞單位疫苗以僅包括刺激免疫系統(tǒng)所必需的抗原。亞單位疫苗定義明確、純凈且可以以良好的安全性大量生產(chǎn)。然而，與傳統(tǒng)疫苗相比，它們通常具有降低的免疫原性，因此要求使用刺激免疫系統(tǒng)的佐劑分子。

因此，需要能引起強(qiáng)烈的免疫細(xì)胞反應(yīng)的新型免疫佐劑。

還需要能提高亞單位疫苗效力的新型免疫佐劑。

還需要能引起強(qiáng)烈的免疫細(xì)胞反應(yīng)和體液反應(yīng)的組合的新型免疫佐劑。

還需要具有適用于人類的良好安全性的新型免疫佐劑。

還需要能夠容易地制備的新型免疫佐劑。

還需要能夠以低成本制備的新型免疫佐劑。

本發(fā)明的目的是滿足那些需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明涉及至少一種糖基化四官能的非離子兩親性嵌段共聚物作為免疫佐劑的用途。

出乎意料地，如以下實(shí)施例中詳述的，本發(fā)明人已觀察到，四官能的非離子兩親性嵌段共聚物704和904的甘露糖基化不僅能夠顯著改進(jìn)抗體滴度(Th-2反應(yīng))，而且能夠顯著改進(jìn)針對(duì)不同重組抗原的I類限制的細(xì)胞反應(yīng)(Th-1反應(yīng))。704和904具有獨(dú)特的高效特性和包括優(yōu)異安全性的產(chǎn)業(yè)特性。

在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)″免疫佐劑″旨在表示適合于刺激免疫系統(tǒng)并增加對(duì)本身沒有任何特異性抗原效應(yīng)的疫苗的反應(yīng)的試劑。本發(fā)明的免疫佐劑能夠誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫細(xì)胞反應(yīng)。

根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式，根據(jù)本發(fā)明的免疫佐劑能夠誘導(dǎo)I類限制的細(xì)胞免疫反應(yīng)(或Th-1反應(yīng))。

在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)″I類限制的細(xì)胞免疫反應(yīng)″旨在表示主要由CD8⁺細(xì)胞毒性T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。細(xì)胞毒性T細(xì)胞(也稱為T_C、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞、CTL、T-殺傷細(xì)胞、細(xì)胞溶解T細(xì)胞、CD8⁺T細(xì)胞或殺傷T細(xì)胞)是能夠誘導(dǎo)感染的體細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞死亡的T淋巴細(xì)胞的亞群。細(xì)胞毒性T細(xì)胞表示能夠識(shí)別結(jié)合I級(jí)MHC分子的特異性抗原肽和稱為CD8的被吸引至所述I類MHC分子的不可變部分的糖蛋白的T細(xì)胞受體(TCR)。除非另有說(shuō)明，本發(fā)明的免疫佐劑能夠誘導(dǎo)主要組織相容性復(fù)合體(MHC)I類限制的免疫或Th-1反應(yīng)。

″保護(hù)性″I類限制的細(xì)胞免疫反應(yīng)是由CD8⁺細(xì)胞毒性T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，其強(qiáng)度或水平能夠預(yù)防或降低由病原體如病原細(xì)菌、病毒、真菌或由癌細(xì)胞觸發(fā)的疾病發(fā)生的可能性，或治療、緩減或減少所述疾病的癥狀。