[發(fā)明專利]利用光分析的單個(gè)粒子檢測(cè)裝置、單個(gè)粒子檢測(cè)方法以及單個(gè)粒子檢測(cè)用計(jì)算機(jī)程序

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380020726.5
• 申請(qǐng)日: 2013-03-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104246479B
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葉梨拓哉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 奧林巴斯株式會(huì)社
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64;G02B21/00
• 代理公司: 北京林達(dá)劉知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇

1.一種單個(gè)粒子檢測(cè)裝置，使用共焦顯微鏡或多光子顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)在樣本溶液中分散且隨機(jī)運(yùn)動(dòng)的單個(gè)粒子，該單個(gè)粒子檢測(cè)裝置的特征在于，包括：

光檢測(cè)區(qū)域移動(dòng)部，其使上述光學(xué)系統(tǒng)的光檢測(cè)區(qū)域的位置在上述樣本溶液內(nèi)移動(dòng)；

光檢測(cè)部，其檢測(cè)來(lái)自上述光檢測(cè)區(qū)域的光；以及

信號(hào)處理部，其生成一邊使上述光檢測(cè)區(qū)域的位置在上述樣本溶液內(nèi)移動(dòng)一邊由上述光檢測(cè)部檢測(cè)出的來(lái)自上述光檢測(cè)區(qū)域的光的按時(shí)間序列的光強(qiáng)度數(shù)據(jù)，在上述按時(shí)間序列的光強(qiáng)度數(shù)據(jù)中逐個(gè)檢測(cè)表示各個(gè)上述單個(gè)粒子的存在的信號(hào)，

其中，由上述光檢測(cè)部檢測(cè)出的來(lái)自上述光檢測(cè)區(qū)域的光包含實(shí)質(zhì)固定的背景光，上述單個(gè)粒子包含具有比上述背景光的發(fā)光強(qiáng)度高的發(fā)光強(qiáng)度的第一單個(gè)粒子和具有比上述背景光的發(fā)光強(qiáng)度低的發(fā)光強(qiáng)度的第二單個(gè)粒子，上述第一單個(gè)粒子的上述信號(hào)為在上述第一單個(gè)粒子進(jìn)入到上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)時(shí)產(chǎn)生的、由上述光檢測(cè)部檢測(cè)出的光強(qiáng)度的增大，上述第二單個(gè)粒子的上述信號(hào)為在上述第二單個(gè)粒子進(jìn)入到上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)時(shí)產(chǎn)生的、由上述光檢測(cè)部檢測(cè)出的光強(qiáng)度的下降。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單個(gè)粒子檢測(cè)裝置，其特征在于，

上述信號(hào)處理部對(duì)逐個(gè)檢測(cè)出的表示上述第一單個(gè)粒子和上述第二單個(gè)粒子的存在的信號(hào)的個(gè)數(shù)分別進(jìn)行計(jì)數(shù)，來(lái)對(duì)在上述光檢測(cè)區(qū)域的位置移動(dòng)的過(guò)程中檢測(cè)出的上述第一單個(gè)粒子和上述第二單個(gè)粒子的個(gè)數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的單個(gè)粒子檢測(cè)裝置，其特征在于，

從每單位體積的上述第一單個(gè)粒子釋放的發(fā)光強(qiáng)度超過(guò)從上述每單位體積的上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)發(fā)出的背景光強(qiáng)度，從每單位體積的上述第二單個(gè)粒子釋放的發(fā)光強(qiáng)度低于從上述每單位體積的上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)發(fā)出的背景光強(qiáng)度。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3中的任一項(xiàng)所述的單個(gè)粒子檢測(cè)裝置，其特征在于，

上述背景光是由在上述樣本溶液內(nèi)分散的物質(zhì)產(chǎn)生的熒光、磷光、化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光或散射光，或是照明光。

5.一種單個(gè)粒子檢測(cè)方法，使用共焦顯微鏡或多光子顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)在樣本溶液中分散且隨機(jī)運(yùn)動(dòng)的單個(gè)粒子，該單個(gè)粒子檢測(cè)方法的特征在于，包括以下過(guò)程：

使上述光學(xué)系統(tǒng)的光檢測(cè)區(qū)域的位置在上述樣本溶液內(nèi)移動(dòng)；

一邊使上述光檢測(cè)區(qū)域的位置在上述樣本溶液內(nèi)移動(dòng)一邊檢測(cè)來(lái)自上述光檢測(cè)區(qū)域的光并生成按時(shí)間序列的光強(qiáng)度數(shù)據(jù)；以及

在上述按時(shí)間序列的光強(qiáng)度數(shù)據(jù)中逐個(gè)檢測(cè)表示各個(gè)上述單個(gè)粒子的存在的信號(hào)，

其中，檢測(cè)出的來(lái)自上述光檢測(cè)區(qū)域的上述光包含實(shí)質(zhì)固定的背景光，上述單個(gè)粒子包含具有比上述背景光的發(fā)光強(qiáng)度高的發(fā)光強(qiáng)度的第一單個(gè)粒子和具有比上述背景光的發(fā)光強(qiáng)度低的發(fā)光強(qiáng)度的第二單個(gè)粒子，上述第一單個(gè)粒子的上述信號(hào)為在上述第一單個(gè)粒子進(jìn)入到上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)時(shí)產(chǎn)生的、被檢測(cè)出的光強(qiáng)度的增大，上述第二單個(gè)粒子的上述信號(hào)為在上述第二單個(gè)粒子進(jìn)入到上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)時(shí)產(chǎn)生的、被檢測(cè)出的光強(qiáng)度的下降。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的單個(gè)粒子檢測(cè)方法，其特征在于，

還包括以下過(guò)程：對(duì)逐個(gè)檢測(cè)出的表示上述第一單個(gè)粒子和上述第二單個(gè)粒子的存在的信號(hào)的個(gè)數(shù)分別進(jìn)行計(jì)數(shù)，來(lái)對(duì)在上述光檢測(cè)區(qū)域的位置移動(dòng)的過(guò)程中檢測(cè)出的上述第一單個(gè)粒子和上述第二單個(gè)粒子的個(gè)數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的單個(gè)粒子檢測(cè)方法，其特征在于，

從每單位體積的上述第一單個(gè)粒子釋放的發(fā)光強(qiáng)度超過(guò)從上述每單位體積的上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)發(fā)出的背景光強(qiáng)度，從每單位體積的上述第二單個(gè)粒子釋放的發(fā)光強(qiáng)度低于從上述每單位體積的上述光檢測(cè)區(qū)域內(nèi)發(fā)出的背景光強(qiáng)度。

8.根據(jù)權(quán)利要求5～7中的任一項(xiàng)所述的單個(gè)粒子檢測(cè)方法，其特征在于，

上述背景光是由在上述樣本溶液內(nèi)分散的物質(zhì)產(chǎn)生的熒光、磷光、化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光或散射光，或是照明光。