[發明專利]表現出外位點介導的超級活性的FVIIa-sTF復合物

無效

• 申請號: 201380016758.8
• 申請日: 2013-03-15
• 公開（公告）號: CN104395465A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: H.奧斯特加爾德;A.L.尼伊森;O.H.奧爾森
• 申請（專利權）人: 諾和諾德保健AG（股份有限公司）
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;A61K38/48;C07K14/705;C07K14/745
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 杜艷玲;黃希貴

1.二硫鍵連接的復合物，所述復合物為(i)包含用Cys取代氨基酸殘基Gln64和用另一個天然存在的氨基酸殘基取代氨基酸殘基Met306的SEQ?ID?NO:1的FVIIa變體和(ii)包含用Cys取代氨基酸殘基Gly109的SEQ?ID?NO:3的可溶性組織因子(sTF)變體的復合物。

2.根據權利要求1的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被天然存在的極性氨基酸殘基取代。

3.根據權利要求2的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被Asp取代。

4.根據權利要求1的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被天然存在的非極性氨基酸殘基取代。

5.根據權利要求4的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被Ala取代。

6.根據權利要求1的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被天然存在的中性氨基酸殘基取代。

7.根據權利要求6的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被Asn、Ser或Thr取代。

8.根據權利要求1的二硫鍵連接的復合物，其中所述Met306被在中性pH為酸性的天然存在的氨基酸殘基取代。

9.FVIIa多肽可以包含用在中性pH為堿性的天然存在的氨基酸殘基取代氨基酸殘基Met306。

10.根據權利要求1-9中任一項的二硫鍵連接的復合物，其進一步包含用另一個天然存在的氨基酸殘基取代氨基酸殘基Asp309。

11.根據權利要求10的二硫鍵連接的復合物，其中所述Asp309被Ala或Ser取代。

12.細胞，其表達根據權利要求1-11中任一項的二硫鍵連接的復合物。

13.制備根據權利要求1-11中任一項的復合物的方法，

其包括：

(i)?在哺乳動物細胞中產生包含用Cys取代氨基酸殘基Gln64和用另一個天然存在的氨基酸殘基取代氨基酸殘基Met306的SEQ?ID?NO:1的因子VIIa變體；

(ii)?在原核或真核細胞中產生包含用Cys取代氨基酸殘基Gly109的SEQ?ID?NO:3的可溶性組織因子變體；

(iii)?用其中官能團之一是半胱氨酸反應性的異雙官能試劑標記Cys；

(iv)?借助所述異雙官能試劑的第二個官能團將所述可溶性組織因子變體交聯至因子VIIa變體。

14.根據權利要求1-11中任一項的二硫鍵連接的復合物，其用作藥物。

15.根據權利要求1-11中任一項的二硫鍵連接的復合物，其用于治療凝血病。