[發明專利]用于癌治療的肽劑

有效

• 申請號: 201380016372.7
• 申請日: 2013-01-24
• 公開（公告）號: CN104271590B
• 公開（公告）日: 2018-06-05
• 發明（設計）人: M.V.阿格雷茲
• 申請（專利權）人: Inter-K私人有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;A61K38/08;A61K38/10;A61P35/00
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 劉海

在此提供了用于抑制癌細胞生長的肽，這些肽包括氨基酸序列RxKxKxxxxR，其中K和R分別是賴氨酸和精氨酸氨基酸殘基，每個x獨立地是一種氨基酸，并且其中該肽與氨基酸序列RSKAKNPLYR(SEQ ID No.2)具有50％或更小的氨基酸序列一致性。每個x氨基酸可以獨立地是選自下組的氨基酸殘基，該組由以下各項組成：丙氨酸(A)、纈氨酸(V)、亮氨酸(L)、異亮氨酸(I)、蘇氨酸(T)、和絲氨酸(S)氨基酸殘基。在此還提供了包含氨基酸序列10RxKxKxxxxR的肽的嵌合蛋白，編碼該肽的核酸、用于表達該肽的包括編碼該肽的核酸的表達載體、以及用于使用該肽以便抑制癌細胞生長的方法。

發明領域

本發明涉及用于抑制癌細胞生長和/或增殖的試劑。

發明背景

整合素包括由提供細胞外基質和細胞內信號傳遞分子之間的功能性和結構性橋接的α/β異源二聚體亞基構成的細胞粘著受體的一個家族(Hynes(海因斯)RO，1992)。卵巢癌中αvβ6整合素的表達可以有助于卵巢癌的侵襲潛力(Ahmed(艾哈邁德)N.等人，2001；Ahmed(艾哈邁德)N.等人，2002)，并且結腸癌中αvβ6整合素的表達已經被鑒別為患有這一疾病的患者中的更壞結果的獨立預兆指示物(Bates(貝茨)RC.等人，2005)。位于β6整合素亞基的胞質尾區內的15mer氨基酸序列RSKAKWQTGTNPLYR(SEQ ID No.1)結合至胞外信號調節的激酶2(ERK2)，并且它已經被提出有助于腫瘤生長(Ahmed(艾哈邁德)N.等人，2002)。

衍生自β6結合序列的非天然發生肽RSKAKNPLYR(SEQ ID No.2)已經被報道抑制癌細胞生長，這可能至少是部分由于c-Src活性被該肽抑制(Agrez(阿格萊茲)MV.等人，2011)。

值得注意地，在此序列內存在形成磷酸酪氨酸結合(PTB)結構域的規范識別序列的一部分的β整合素胞質結構域共有的NPxY/F(SEQ ID No.3)基序。的確，NPxY/F(SEQ IDNo.3)基序存在于衍生自對應于RSKAKNPLYR(SEQ ID No.2)肽的β2、β3和β5整合素亞基的氨基酸序列中，還已經示出所有這些都是抗癌肽并且結合ERK2(參見國際專利申請WO 2005/037308)，反映了該基序的明顯的重要性。PTB結構域是多種信號的和細胞骨架的蛋白中存在的蛋白模塊。例如，已經提出，NPxY(SEQ ID No.4)基序中的酪氨酸(Y)殘基的磷酸化表示在質膜的細胞質面處調節整合素與其他蛋白的相互作用的模式(Takada(高田)Y.等人，2007)。已經由Filardo(費加羅)和同事強調了高度保守的NPxY(SEQ ID No.4)基序在調節整合素介導的功能中的基本作用，他們示出在β3胞質尾區內的NPxY(SEQ ID No.4)基序對于黑色素瘤細胞的細胞遷移和轉移表型中涉及的αvβ3依賴的配體結合后事件而言是必需的(Filardo(費加羅)EJ,1995)。

發明概述

本發明涉及意外的發現，雖然衍生自β6整合素亞基的肽RSKAKNPLYR(SEQ IDNo.2)內的NPxY(SEQ ID No.4)基序對于癌細胞生長抑制性活性是必需的，但其中NPxY(SEQID No.4)基序和除了帶電氨基酸精氨酸(R)和賴氨酸(K)之外的其他氨基酸殘基已經被取代為不同氨基酸的肽的改性形式在抑制癌細胞增殖時，與RSKAKNPLYR(SEQ ID No.2)肽基序基本上一樣有效。這一令人驚訝的觀察結果允許提供待合成的一系列肽，在本發明的至少一些實施例中，這些肽可以抑制細胞激活途徑中涉及的多種激酶的活性，為預防或治療癌提供了新的替代方案。

具體地，在本發明的一個方面中，提供了用于抑制癌細胞生長的分離的或純化的肽，該肽包括氨基酸序列RxKxKxxxxR(SEQ ID No.5)，其中K和R分別是賴氨酸和精氨酸氨基酸殘基，每個x獨立地是氨基酸，并且該肽與氨基酸序列RSKAKNPLYR(SEQ ID No.2)具有50％或更少的氨基酸序列一致性。