[發(fā)明專利]具有內(nèi)切葡聚糖酶活性的多肽和編碼該多肽的多核苷酸

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380015793.8
• 申請(qǐng)日: 2013-02-19
• 公開（公告）號(hào): CN104204199B
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賴偉堅(jiān);N.斯博德斯伯格;L.安德森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 諾維信公司
• 主分類號(hào): C12N9/46
• 分類號(hào): C12N9/46;C12N15/56;C12N15/63
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所11105
• 代理人: 張文輝

涉及序列表

本申請(qǐng)包含計(jì)算機(jī)可讀形式的序列表，其通過提及并入本文。

涉及生物材料的保藏物

本申請(qǐng)含有生物材料保藏物的提及，該保藏物通過提及并入本文。

發(fā)明背景

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及具有內(nèi)切葡聚糖酶活性的多肽，催化域，和內(nèi)切葡聚糖酶結(jié)合域，和編碼所述多肽，催化域，和內(nèi)切葡聚糖酶結(jié)合域的多核苷酸。本發(fā)明亦涉及包含所述多核苷酸的核酸構(gòu)建體、載體和宿主細(xì)胞，以及產(chǎn)生和使用所述多肽，催化域，和內(nèi)切葡聚糖酶結(jié)合域的方法。

背景技術(shù)

纖維素是簡(jiǎn)單糖葡萄糖通過β-1,4-鍵共價(jià)連接的聚合物。許多微生物產(chǎn)生水解β-連接的葡聚糖的酶，諸如纖維素酶。纖維素酶包括內(nèi)切葡聚糖酶、纖維二糖水解酶和β-葡糖苷酶。內(nèi)切葡聚糖酶在隨機(jī)位置消化纖維素聚合物，使其暴露于纖維二糖水解酶攻擊(attack)。纖維二糖水解酶從纖維素聚合物的末端順序地釋放纖維二糖的分子。纖維二糖是水溶性的β-1,4-連接的葡萄糖二聚體。β-葡糖苷酶將纖維二糖水解成葡萄糖。

纖維素酶有一大批工業(yè)應(yīng)用。在紡織品產(chǎn)業(yè)中，纖維素酶在勞動(dòng)布修整中用于在生物打磨(biostoning)工藝中在勞動(dòng)布衣服中產(chǎn)生流行的砂洗外觀。纖維素酶還用于例如清潔細(xì)毛，并且防止棉衣表面上形成小球。

WO9629397公開了具有內(nèi)切葡聚糖酶活性的來自擬刺盤抱周刺座霉(Volutella colletotrichoides)的多肽。

本發(fā)明提供了具有內(nèi)切葡聚糖酶活性的多肽及編碼該多肽的多核苷酸。

發(fā)明概述

本發(fā)明涉及具有內(nèi)切葡聚糖酶活性的分離的多肽，其選自下組：

(a)多肽，其與SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80％序列同一性；

(b)多肽，其由多核苷酸編碼，該多核苷酸在中等，中等-高，高、或非常高嚴(yán)格條件下與以下雜交：(i)SEQ ID NO:1的成熟多肽編碼序列，(ii)其cDNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全長互補(bǔ)物；

(c)多肽，其由多核苷酸編碼，所述多核苷酸與SEQ ID NO:1或其cDNA序列的成熟多肽編碼序列具有至少80％序列同一性；

(d)SEQ ID NO:2的成熟多肽的變體，其在一個(gè)或多個(gè)(例如幾個(gè))位置包含取代、缺失和/或插入；和

(e)(a)，(b)，(c)，或(d)的多肽的片段，其具有內(nèi)切葡聚糖酶活性。

本發(fā)明還涉及包含催化域的分離的多肽，所述催化域選自下組：

(a)催化域，其與SEQ ID NO:2的氨基酸17至232具有至少80％序列同一性；

(b)催化域，其由多核苷酸編碼，該多核苷酸在中等，中等-高、高、或非常高嚴(yán)格條件下與以下雜交：(i)SEQ ID NO:1的核苷酸49至953，(ii)其cDNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全長互補(bǔ)物；

(c)催化域，其由多核苷酸編碼，所述多核苷酸與SEQ ID NO:1或其cDNA序列的核苷酸49至953具有至少80％序列同一性；

(d)SEQ ID NO:2的氨基酸17至232的變體，其在一個(gè)或多個(gè)(例如幾個(gè))位置包含取代、缺失和/或插入；和

(e)(a)，(b)，(c)，或(d)的催化域的片段，其具有內(nèi)切葡聚糖酶活性。

本發(fā)明還涉及包含纖維素結(jié)合域的分離的多肽，所述結(jié)合域選自下組：

(a)纖維素結(jié)合域，其與SEQ ID NO:2的氨基酸267至305具有至少80％序列同一性；

(b)纖維素結(jié)合域，其由多核苷酸編碼，該多核苷酸在中等，中等-高、高、或非常高嚴(yán)格條件下與以下雜交：(i)SEQ ID NO:1的核苷酸1056至1172，(ii)其cDNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全長互補(bǔ)物；

(c)纖維素結(jié)合域，其由多核苷酸編碼，所述多核苷酸與SEQ ID NO:1或其cDNA序列的核苷酸1056至1172具有至少80％序列同一性；

(d)SEQ ID NO:2的氨基酸267至305的變體，其在一個(gè)或多個(gè)(例如幾個(gè))位置包含取代、缺失和/或插入；和

(e)(a)，(b)，(c)，或(d)的纖維素結(jié)合域的片段，其具有結(jié)合活性。

本發(fā)明還涉及編碼本發(fā)明多肽的分離的多核苷酸；包含該多核苷酸的核酸構(gòu)建體；重組表達(dá)載體；重組宿主細(xì)胞；和生成多肽的方法。