[發明專利]用于檢測在樣品容器中的微生物生長的方法和系統

有效

• 申請號: 201380015724.7
• 申請日: 2013-03-15
• 公開（公告）號: CN104204219A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 邁克爾·厄勒里
• 申請（專利權）人: 生物梅里埃有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12M1/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 楊洲;鄭霞

相關申請的交叉引用

本申請根據35U.S.C.§119(e)要求于2012年3月22日提交的美國臨時申請序列號61/614,037的優先權權益，其全部內容通過引用并入本文。

背景

本公開內容大體上涉及用于檢測劑(例如，細菌)是否存在于諸如血液或尿液的生物或臨床樣品中的系統和方法的領域。

檢測在血液樣品中的微生物的生長并因此存在的儀器目前存在于美國的市場上。一個這樣的儀器是本受讓人bioMérieux,Inc的BacT/ALERT?3D儀器。該儀器接收包含例如來自人類患者的血液樣品的血液培養瓶。該儀器溫育該瓶。在溫育期間，在溫育器中的光學檢測單元定期地分析被包含在該瓶中的比色傳感器。由檢測單元獲得的反射測量被用來檢測微生物的生長在該瓶內是否發生。光學檢測單元、樣品容器和傳感器被描述在專利文獻中，見美國專利4,945,060、5,094,955、5,162,229、5,164,796、5,217,876、5,795,773以及5,856,175，其各自的全部內容通過引用并入本文。美國專利5,856,175和5,164,796描述了用于測試微生物生長在樣品容器內是否發生的方法。

BacT/ALERT儀器的陽性瓶檢測算法的性能被認為商業上可接受的。然而，它具有許多缺點。第一，當檢測時間(TTD)對比于反射率曲線的目視檢查時，檢測時間在某些情況下好像被延遲。換言之，檢測晚于比所期望的指數生長期發生(見圖2和以下的描述)。第二，由于諸如來自裝載相對冷的瓶、在溫育器的不同單元中重新裝載瓶以及在相同單元內瓶被移動的溫度影響的事件的結果，假陽性結果已知發生。第三，在瓶的延遲裝載的情況下，假陰性結果已知發生。當檢測到僅指數期的上部或者穩定期不在足以高至觸發初始反射率值正閾值的反射率水平時，觀察到假陰性結果。第四，該算法的邏輯被認為是復雜的、難以理解并且難以維護的。

與大體上涉及在生物樣品中的微生物檢測有關系的其他現有技術包括以下專利：U.S.5,770,394、U.S.5,518,923、U.S.5,498,543、U.S.5,432,061、U.S.5,371,016、U.S.5,397,709、U.S.5,344,417、U.S.5,374,264、U.S.6,709,857以及U.S.7,211,430。以下的專利文件也可能有關系的：US?7,991,558、US?7,668,663、US?2009/0119020、US?2011/0029252、US?2011/0208432、US?2009/0287754以及US?2010/0070190。

在諸如BacT/ALERT?3D的檢測儀器以及相似的儀器中，一旦血培養瓶被測試對于微生物存在呈陽性，那么由于血液成分和包含樣品的一次性系統的人工制品(例如，瓶)的干擾而難以獲得高水平的微生物劑的表征或微生物劑的種類鑒別。因此，目前的方法使用瓶或其他合適的一次性容器以及用于樣品中的自然生長和檢測的相關的儀器，如上文描述的。一旦該儀器表明該瓶微生物劑的存在呈陽性，根據目前方法“陽性”瓶從儀器中手動收回并且樣品的一部分從瓶中手動去除并且在瓊脂板上培養。該板手動地放置于溫育器中并且定期檢查微生物再次培養的生長。在再次培養充分生長后，培養的樣品從該板中取出并且放置在測試管中。然后該測試管被引入到用于通過具有多個單獨的孔的一次性測試樣品卡鑒別測試的另一個儀器中。一次性測試卡在專利文獻中是已知的，見美國專利4,118,280、3,963,355、4,018,652、4,116,775以及4,038,151、5,609,828、5,746,980、5,766,553、5,843,380、5,869,005、5,916,812、5,932,177、5,951,952以及6,045,758，其全部內容通過引用并入本文。

然后測試樣品卡在本領域內已知的分析儀器，如受讓人的VITEK?2儀器中處理。VITEK?2儀器溫育并且用讀數裝置定期讀取測試樣品卡的孔。樣品在該卡的一個或多個孔中的生長導致微生物劑的鑒別。VITEK?2儀器被描述在專利文獻中，見美國專利5,762,873和6,086,824，其內容通過引用并入本文。

從將樣品引入到血液收集瓶的時間到培養，檢測微生物的存在，然后通過VITEK?2儀器鑒別微生物的時間的整個過程通常花費2-5天。發生長陽性瓶檢測后的單獨的鑒別步驟通常占據這些的1-3天。

如果檢測和鑒別血液樣品中的微生物劑以及向臨床醫生報告結果所花費的時間從目前的2-5天縮短到少于1天，對于病人重要的并潛在的救生、臨床的利益是可能的。