[發(fā)明專利]具改變末端的重組腺病毒群

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380013551.5
• 申請日: 2013-03-11
• 公開（公告）號: CN104379733A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: J·H·H·V·屈斯泰;J·維林加
• 申請（專利權(quán)）人: 克魯塞爾荷蘭公司
• 主分類號: C12N7/02
• 分類號: C12N7/02;C12N15/861;C12N7/00;C12N15/86
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路

1.一種包含重組腺病毒顆粒的組合物，其中該重組腺病毒是血清型5、11a、26、34、35、48、49或50的重組人類腺病毒、或重組猿腺病毒，其特征在所述組合物中的基本上所有腺病毒顆粒的基因組皆具有核苷酸序列CTATCTAT作為5’末端核苷酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中該重組腺病毒是血清型5、26、35、49或50的重組人類腺病毒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的組合物，其中該重組腺病毒是血清型26或35的重組人類腺病毒。

4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其是醫(yī)藥組合物。

5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其中該重組腺病毒缺少E1區(qū)的至少一部分。

6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其中該重組腺病毒包含轉(zhuǎn)基因。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項所述的組合物，其包含至少1×10⁷個、優(yōu)選至少1×10⁸個、優(yōu)選至少1×10⁹個、優(yōu)選至少1×10¹⁰個重組腺病毒顆粒。

8.一種制備重組腺病毒顆粒群的方法，基本上所有這些重組腺病毒顆粒在其基因組的5’末端中皆具有相同核苷酸序列，該方法包含：

a)進行分子克隆步驟，以將腺病毒基因組的天然發(fā)生5’末端更換為包含核苷酸序列CTATCTAT作為末端核苷酸的改變5’末端，

b)使具有該改變5’末端的該重組腺病毒在宿主細胞中繁殖，及

c)收獲該重組腺病毒，以獲得重組腺病毒顆粒群，基本上所有這些重組腺病毒顆粒皆具有該核苷酸序列CTATCTAT作為其基因組的這些5’末端核苷酸。

9.一種制備重組腺病毒顆粒群的方法，基本上所有這些重組腺病毒顆粒在其基因組的5’末端中皆具有相同核苷酸序列，該方法包含：

a)純化腺病毒的噬菌斑，其中該重組腺病毒是血清型5、11a、26、34、35、48、49或50的重組人類腺病毒、或重組猿腺病毒，以從單噬菌斑分離腺病毒或重組腺病毒，其中所述腺病毒或重組腺病毒具有核苷酸序列CTATCTAT作為其基因組的5’末端核苷酸，

b)使從步驟a)的該單噬菌斑獲得的重組腺病毒在宿主細胞中繁殖，及

c)收獲該重組腺病毒，獲得重組腺病毒顆粒群，基本上所有這些重組腺病毒顆粒皆具有該核苷酸序列CTATCTAT作為其基因組的這些5’末端核苷酸。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的方法，其中該群包含至少1×10⁷個重組腺病毒顆粒。

11.根據(jù)權(quán)利要求8至10中任一項所述的方法，其中該重組腺病毒是血清型5、26、35、49或50的重組人類腺病毒。

12.根據(jù)權(quán)利要求8至11中任一項所述的方法，其中該重組腺病毒是血清型26或35的重組人類腺病毒。

13.根據(jù)權(quán)利要求8至12中任一項所述的方法，其中該重組腺病毒缺少E1區(qū)的至少一部分。

14.根據(jù)權(quán)利要求8至13中任一項所述的方法，其中該重組腺病毒包含轉(zhuǎn)基因。

15.根據(jù)權(quán)利要求8至14中任一項所述的方法，其進一步包括純化該重組腺病毒。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其進一步包括將該重組腺病毒配制成醫(yī)藥組合物。

17.根據(jù)權(quán)利要求8至16中任一項所述的方法，其中步驟b)是在生物反應(yīng)器中進行。