[發(fā)明專(zhuān)利]陰離子交換-疏水性混合模式

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380012891.6
• 申請(qǐng)日: 2013-03-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104812491B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J·廖;R·弗羅斯特
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 生物輻射實(shí)驗(yàn)室股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): B01J41/20
• 分類(lèi)號(hào): B01J41/20;C07K1/16
• 代理公司: 上海專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 楊昀

提供陰離子交換?疏水混合模式配體及其使用方法。

相關(guān)專(zhuān)利申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求2012年3月8日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/608,418的優(yōu)先權(quán)權(quán)益，其通過(guò)引用納入本文用于所有目的。

發(fā)明背景

免疫球蛋白的液體源主要是哺乳動(dòng)物體液或細(xì)胞培養(yǎng)收獲物，來(lái)自液體源的免疫球蛋白提取物對(duì)于獲得充分濃縮或純化形式的免疫球蛋白來(lái)用于診斷和治療用途以及一般實(shí)驗(yàn)室研究而言是重要的。類(lèi)似地，純化其它種類(lèi)的蛋白質(zhì)和來(lái)自生物樣品的其它分子也是有價(jià)值的。

發(fā)明內(nèi)容

提供連接至配體的色譜固體支持物(支持物(Support))。在一些實(shí)施方式中，所述支持物和配體具有下式：

支持物-(X)-N(R¹,R²)-R³-L-Ar，其中，X是間隔子或不存在；R¹和R²各自選自氫和包含1～6個(gè)碳的烷基；R³是包含1～6個(gè)碳的烷基或包含1～6個(gè)碳的環(huán)烷基；L是NR⁴、O或S；其中R⁴是氫或包含1～6個(gè)碳的烷基；且Ar是芳基。

在一些實(shí)施方式中，R¹和R²是氫。

在一些實(shí)施方式中，R³是包含1～4個(gè)碳的烷基。

在一些實(shí)施方式中，R³是包含1、2、3、4、5或6個(gè)碳的烷基。

在一些實(shí)施方式中，所述芳基是苯基。在一些實(shí)施方式中，所述芳基是經(jīng)取代的苯基。在一些實(shí)施方式中，所述經(jīng)取代的苯基是烷基取代的苯基。

在一些實(shí)施方式中，R¹和/或R²是包含1～6個(gè)碳的烷基且Ar是烷基取代的苯基。

在一些實(shí)施方式中，所述配體是N-苯基乙二胺或其鹽。在一些實(shí)施方式中，所述配體是2-苯氧基乙胺或其鹽。

在一些實(shí)施方式中，X(接頭/間隔子)不存在。在一些實(shí)施方式中，X是間隔子。

還提供從樣品純化生物分子的方法。在一些實(shí)施方式中，所述方法包括：使該樣品接觸如上文或本文中他處所述的連接至配體的色譜固體支持物；和收集純化的生物分子。

在一些實(shí)施方式中，所述生物分子是蛋白質(zhì)。在一些實(shí)施方式中，所述蛋白質(zhì)是抗體。

在一些實(shí)施方式中，所述樣品包含單體抗體和聚集體，并且使單體抗體與所述聚集體分離，從而導(dǎo)致單體抗體的純化。

在一些實(shí)施方式中，所述純化的生物分子是單體抗體。在一些實(shí)施方式中，所述樣品的單體抗體被固定在所述色譜固體支持物上，隨后被洗脫。在一些實(shí)施方式中，所述樣品的單體抗體流經(jīng)所述色譜固體支持物并被收集。

定義

“抗體”是指免疫球蛋白、其復(fù)合(例如，融合)形式或其片段形式。該術(shù)語(yǔ)可包括但不限于：源自人或其它哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的IgA、IgD、IgE、IgG和IgM類(lèi)的多克隆或單克隆抗體，包括天然形式或遺傳修飾形式，如人源化、人、單鏈、嵌合、合成、重組、雜合、突變、移接和體外產(chǎn)生的抗體。“抗體”也可包括復(fù)合形式，其包括但不限于含有免疫球蛋白部分的融合蛋白。“抗體”還可包括抗體片段，如Fab、F(ab')2、Fv、scFv、Fd、dAb、Fc，無(wú)論它們是否保留抗原結(jié)合功能。