[發明專利]變體蔗糖轉運蛋白多肽無效
| 申請號: | 201380012343.3 | 申請日: | 2013-03-05 |
| 公開(公告)號: | CN104245723A | 公開(公告)日: | 2014-12-24 |
| 發明(設計)人: | D.M.W.波拉克;T.K.范德克 | 申請(專利權)人: | 納幕爾杜邦公司 |
| 主分類號: | C07K14/195 | 分類號: | C07K14/195 |
| 代理公司: | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李波;李炳愛 |
| 地址: | 美國特拉華*** | 國省代碼: | 美國;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 變體 蔗糖 轉運 蛋白 多肽 | ||
1.變體蔗糖轉運蛋白多肽,基于Clustal?W比對方法,所述變體蔗糖轉運蛋白多肽具有的氨基酸序列與如SEQ?ID?NO:26所示的氨基酸序列具有至少95%的同一性,并且所述變體蔗糖轉運蛋白多肽具有在位置300處的精氨酸至丙氨酸或精氨酸至亮氨酸的氨基酸改變并包含:
(a)至少一種另外的氨基酸改變,所述另外的氨基酸改變選自:
(i)在位置353處的谷氨酰胺至組氨酸;
(ii)在位置61處的亮氨酸至脯氨酸;
(iii)在位置159處的苯丙氨酸至亮氨酸;
(iv)在位置162處的甘氨酸至半胱氨酸;
(v)在位置169處的脯氨酸至組氨酸;
(vi)在位置61處的亮氨酸至色氨酸;
(vii)在位置61處的亮氨酸至組氨酸;
(viii)在位置61處的亮氨酸至苯丙氨酸;和
(ix)在位置61處的亮氨酸至酪氨酸;或
(b)從N-末端起402至407個氨基酸的長度;或
(c)從N-末端起402至407個氨基酸的長度,并且具有(a)的氨基酸改變中的至少一種。
2.變體蔗糖轉運蛋白多肽,基于Clustal?W比對方法,所述變體蔗糖轉運蛋白多肽具有的氨基酸序列與選自SEQ?ID?NO:68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96和98的氨基酸序列具有至少95%的同一性,并且在與SEQ?ID?NO:26的參照氨基酸序列進行比較時,所述變體蔗糖轉運蛋白多肽包含在等同位置處的氨基酸,所述在等同位置處的氨基酸選自:
(a)在等同于位置300的位置處的丙氨酸;和
(b)在等同于位置300的位置處的亮氨酸。
3.根據權利要求2所述的變體蔗糖轉運蛋白多肽,其中所述變體蔗糖轉運蛋白多肽還包含:
(a)在與SEQ?ID?NO:26的參照氨基酸序列進行比較時,下列在等同位置處的氨基酸中的至少一種:
(i)在等同于位置353的位置處的組氨酸;
(ii)在等同于位置61的位置處的脯氨酸;
(iii)在等同于位置159的位置處的亮氨酸;
(iv)在等同于位置162的位置處的半胱氨酸;
(v)在等同于位置169的位置處的組氨酸;
(vi)在等同于位置61的位置處的色氨酸;
(vii)在等同于位置61的位置處的組氨酸;
(viii)在等同于位置61的位置處的苯丙氨酸;
(ix)在等同于位置61的位置處的酪氨酸;和/或
(b)在與SEQ?ID?NO:26的參照氨基酸序列進行比較時,在等同于位置407、406、405、404、403或402的位置處的截短。
4.重組細菌,所述重組細菌在其基因組中或在至少一種重組構建體上包含:
(a)編碼變體蔗糖轉運蛋白多肽的核苷酸序列,基于Clustal?W比對方法,所述變體蔗糖轉運蛋白多肽具有的氨基酸序列與選自SEQ?ID?NO:26、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96和98的氨基酸序列具有至少95%的同一性,并且在與SEQ?ID?NO:26的參照氨基酸序列進行比較時,所述變體蔗糖轉運蛋白多肽具有在等同位置處的氨基酸,所述在等同位置處的氨基酸選自:
(i)在等同于位置300的位置處的丙氨酸;和
(ii)在等同于位置300的位置處的亮氨酸;和
(b)編碼具有蔗糖水解酶活性的多肽的核苷酸序列;
其中(a)和(b)各自可操作地連接至相同的或不同的啟動子,進一步地,其中所述重組細菌能夠代謝蔗糖。
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