[發(fā)明專利]抗上皮細(xì)胞黏著分子(EpCAM)抗體及其使用方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380012187.0
• 申請(qǐng)日: 2013-03-01
• 公開（公告）號(hào): CN104168916B
• 公開（公告）日: 2017-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳漢忠;廖美英;林政緯
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中央研究院
• 主分類號(hào): A61K39/00
• 分類號(hào): A61K39/00;A61K39/395
• 代理公司: 北京連和連知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11278
• 代理人: 王淑麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明大體上是涉及抗癌劑，更特定而言是涉及用在癌癥治療、診斷及照影成像的抗體。

背景技術(shù)

頭及頸部鱗狀細(xì)胞癌(head and neck squamous cell carcinoma；HNSCC)是全球已發(fā)展國家中第六位最常見的惡性腫瘤。口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squamous cell carcinoma；OSCC)則是頭及頸部位最常見的腫瘤。雖然頭及頸部癌癥在診斷、局部處理及化療法上有明顯的改進(jìn)，但在過去30年間，長期存活率并沒有明顯的增加。即使具有現(xiàn)代的醫(yī)療服務(wù)，針對(duì)口腔內(nèi)癌癥方面的整體死亡率仍維持在約50％的高水平。因此，高風(fēng)險(xiǎn)性癌前病灶的預(yù)防及早期診斷與治療在降低HNSCC相關(guān)死亡上是有相當(dāng)幫助的。

發(fā)明內(nèi)容

在一方面，本發(fā)明是涉及一種經(jīng)純化或經(jīng)分離的單株抗體或其抗原結(jié)合片段，其對(duì)于位處上皮細(xì)胞黏著分子(EpCAM)的EGF樣區(qū)域II(SEQ ID NO:1)內(nèi)的KPEGALQNNDGLYDPDCDE(SEQ ID NO:63)序列內(nèi)的抗原決定部位具有特異性結(jié)合親和力。

在本發(fā)明一具體實(shí)施例中，該抗體或抗原結(jié)合片段會(huì)展現(xiàn)出下列的特征：當(dāng)EpCAM的EGF樣區(qū)域II內(nèi)的氨基酸95位置處的酪氨酸(Y)或氨基酸96位置處的天門冬氨酸(D)或該Y及D發(fā)生突變(或具有取代性突變作用)，則前述的結(jié)合親和力會(huì)消失。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該抗體或抗原結(jié)合片段包括：

(a)一重鏈可變域，其包括(i)包含SEQ ID NO:4的互補(bǔ)決定域1(CDR1)；(ii)包含SEQ ID NO:5的互補(bǔ)決定域2(CDR2)；及(iii)包含SEQ ID NO:6的互補(bǔ)決定域3(CDR3)；及

(b)一輕鏈可變域，其包括(i)包含SEQ ID NO:7的CDR1；(ii)包含SEQ ID NO:8的CDR2；及(iii)包含SEQ ID NO:9的CDR3。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該結(jié)合片段包括該抗體的Fv片段。另一選擇地，該結(jié)合片段包括該抗體的Fab片段。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該抗體是經(jīng)擬人化單株抗體。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該重鏈可變域包括SEQ ID NO:24的氨基酸序列，而該輕鏈可變域包括SEQ ID NO:25的氨基酸序列。

在另一方面，本發(fā)明涉及一種經(jīng)純化或經(jīng)分離的單鏈可變片段，其包括：

(a)包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列的輕鏈可變域，或包含SEQ ID NO:24的氨基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO:25的氨基酸序列的輕鏈可變域；及

(b)鏈接該重鏈可變域及該輕鏈可變域的鏈接肽。

除此之外，在另一方面，本發(fā)明涉及一種經(jīng)分離的單株抗體或其抗原結(jié)合片段，其具有下列的特征：

(a)對(duì)于包括SEQ ID NO:1氨基酸序列的上皮細(xì)胞黏著分子(EpCAM)具有特異性結(jié)合親和力；

(b)對(duì)于可表現(xiàn)EpCAM的癌細(xì)胞具有特異性結(jié)合親和力，該癌細(xì)胞是選自由口腔癌細(xì)胞、鼻咽癌細(xì)胞、結(jié)腸直腸癌細(xì)胞及卵巢癌細(xì)胞所組成的群；及

(c)對(duì)于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞及正常鼻黏膜上皮細(xì)胞則不具結(jié)合親和力。

在本發(fā)明一具體實(shí)施例中，該抗體或抗原結(jié)合片段在活體內(nèi)可展現(xiàn)出誘導(dǎo)該癌細(xì)胞凋亡及/或抑制該癌細(xì)胞生長的特征。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該抗體或抗原結(jié)合片段對(duì)于位處EpCAM的EGF樣區(qū)域II內(nèi)的KPEGALQNNDGLYDPDCDE(SEQ ID NO:63)序列內(nèi)的抗原決定部位具有特異性結(jié)合親和力。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該抗體或抗原結(jié)合片段是經(jīng)一可偵測化合物或酵素加以標(biāo)記，或是經(jīng)囊封在脂質(zhì)體內(nèi)。

在本發(fā)明另一具體實(shí)施例中，該抗體或抗原結(jié)合片段包括：

(a)包含SEQ ID NO:2氨基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO:3氨基酸序列的輕鏈可變域；或

(b)包含SEQ ID NO:24氨基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO:25氨基酸序列的輕鏈可變域。