[實用新型]細胞缺氧前處理裝置

有效

• 申請號: 201320615593.3
• 申請日: 2013-10-08
• 公開（公告）號: CN203513664U
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 王磊;萬珊珊;陳暉;陳志遠;翁小東;邱濤;劉修恒;劉林
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/24
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 汪俊鋒

技術領域

本實用新型涉及一種細胞缺氧前處理裝置，屬于醫療器械領域。

背景技術

目前細胞水平的缺氧復氧損傷已經成為一個研究熱點，在國內外已經大量文獻報道細胞缺氧復氧的損傷機制，Webster于1992年研究了心肌細胞缺氧復氧損傷的分子機制，他用N₂飽和的D-Hanks液作為緩沖液，加入細胞后置于無菌密閉容器中，在恒溫水浴箱內保持37℃，進氣口通人N2，經出氣口流出，使容器內保持無氧狀態2?h。1998年，Yonemochi，將培養3～4?d的心肌細胞更換經缺氧處理(預先用氬氣飽和)、無糖無血清的緩沖液，并在培養孔中灌注高純度氬氣飽和2?h模擬缺氧；2?h后更換含糖和血清的培養基，開放培養板在二氧化碳培養箱中飽和4?h模擬復氧（氬氣灌注方法：培養板外周用膠封住，兩側鉆小孔。然后從一側充人氬氣120?s，以驅除培養板中的氧氣而充滿氬氣。迅速封閉出入充氣口，置于37℃恒溫培養箱中）。

實用新型內容

本實用新型所要解決的技術問題在于提供一種簡單易操作的細胞缺氧前處理裝置。

本實用新型的技術方案是：

一種細胞缺氧前處理裝置，包括三通管及其連接的氮氣源連接管、培養箱連接管和氮氣進氣管，所述的氮氣進氣管連接裝有缺氧緩沖液的封閉圓形瓶，并且伸入缺氧緩沖液面下方；所述圓形瓶上還有氮氣排氣管，在缺氧緩沖液面上與大氣聯通，所述圓形瓶上還有液體軟管，插入到缺氧緩沖液面以下。

使用中，利用三通管的開關位置改變氮氣氣流方向。

進一步地優選，

所述的氮氣源采用濃度為99.999%的高純氮氣。

所述氮氣進氣管伸入到缺氧緩沖液的管壁上有小孔，孔徑為1.0～2.0mm。

所述的氮氣源連接管、培養箱連接管、氮氣進氣管和氮氣排氣管采用具有較好強度的塑膠管。

所述的氮氣源連接管、培養箱連接管、氮氣進氣管的管徑分別為10.0～14.0mm，7.0～9.0mm，3.0～5.0mm。

本實用新型的細胞缺氧前處理裝置適用于各種細胞的缺氧前處理技術,是在封閉的裝置內，將五根導管與圓形瓶連接起來，并利用三通開關改變氮氣氣流的方向，形成一個高效的引流系統，使氮氣充入降低培養箱的氧濃度和緩沖液中的溶解氧，達到理想的缺氧效果。該裝置能夠在降低缺氧緩沖液中溶解氧的同時，迅速降低缺氧培養箱中的氧濃度使之達到缺氧狀態（小于1%?O₂）。

本實用新型裝置操作簡單，易于推廣。其減少了緩沖液的溶解氧濃度，使得缺氧的效果更佳；縮短了加入緩沖液的細胞在非缺氧環境中的時間；減少了科研人員的工作量，無需經常接換高純氮氣導管，只需檢查確認三通開關的位置；總體上降低了實驗費用，可應用于心肌細胞、腎小管上皮細胞、肝細胞、腦星形膠質細胞等。

附圖說明

圖1?細胞缺氧前處理裝置的結構示意圖，

其中1-氮氣進氣管，2-氮氣排氣管，3-液體軟管，4-氮氣源連接管，5-培養箱連接管，6-三通管，7-圓形瓶。

具體實施方式

本實用新型公開了一種細胞缺氧前處理裝置，包括三通管6及其連接的氮氣源連接管4、培養箱連接管5和氮氣進氣管1，所述的氮氣進氣管1連接裝有缺氧緩沖液的封閉圓形瓶7，并且伸入缺氧緩沖液面下方；所述圓形瓶7上還有氮氣排氣管2，在缺血緩沖液面上與大氣聯通，所述圓形瓶上還有液體軟管3，插入到缺氧緩沖液面以下。

實驗使用時，將缺氧緩沖液通過圓形瓶液體入口注入圓形瓶內，然后密閉。氮氣進氣管1和氮氣排氣管2的末端分別處于緩沖液面下方和上方3～5cm處，起到進氣、出氣的作用。液體軟管3的末端伸入緩沖液面以下4～5cm處。三通管的另兩端分別用氮氣源連接管連接于高純氮氣，培養箱連接管連接培養箱。

首先，旋轉三通管6開關，使得氮氣進氣管1處于開放狀態，然后打開氮氣開關，氣體沿著導流管壁的方向，會一邊流向缺氧培養箱，使里面的氧氣壓力不斷降低，達到理想狀態（小于1%?O₂）；同時，高純氮氣通過氮氣進氣管1，吹入密封的含有缺氧緩沖液的圓形瓶7，圓形瓶7中的氣體壓力會不斷增大，并通過氮氣排氣管2排出。20～25分鐘過后，培養箱中的氧氣分壓已基本降到理想狀態（小于1%?O₂），且圓形瓶中的緩沖液經過氮氣的飽和，溶解氧已基本消失。此時，用一次性注射器經過液體軟管3，吸入經過處理的緩沖液，加到培養細胞中，并立即將其置入缺氧培養箱中，進行3-4個小時的缺氧處理。旋轉三通管6開關，關閉流向氮氣進氣管1的方向，高純氮氣經過三通管后僅流向培養箱。