[實用新型]酶聯免疫斑點計生四項聯合試劑盒

有效

• 申請號: 201320512939.7
• 申請日: 2013-08-22
• 公開（公告）號: CN203385727U
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發明（設計）人: 蘇冬梅;張述智;夏偉
• 申請（專利權）人: 青島中仁藥業有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 青島高曉專利事務所 37104
• 代理人: 隋臻瑋

技術領域：

本實用新型涉及一種酶聯免疫斑點技術一次性檢測計生四種病毒（種）的試劑盒，屬于醫療診斷計生四項聯合試劑盒檢測技術領域。?

背景技術：

四項計生檢測是針對育齡婦女在懷孕早期開展的旨在預防新生兒出生缺陷的一項重要的檢測措施，它對于提高出生人口素質，減少新生兒出生風險具有重要的意義，已被醫療機構和孕產婦廣泛接受和應用。四項計生檢測包括風疹病毒，巨細胞病毒、弓形體和單純皰疹病毒。通過四項計生檢測可檢測出孕婦和胎兒是否存在感染的情況，并有針對性地治療或終止妊娠。?

目前應用免疫斑點法來檢測診斷這四項疾病時，每項疾病的檢測單獨操作完成，各種試劑均為分散放置，沒有特制的斑點反應板，所以檢測過程復雜、時間長、攜帶及操作不方便。如：化學反應法及Elisa法均一次一種地操作及分別使用各自的試劑盒。?

發明內容：

本實用新型的目的在于克服現有技術的缺點，把計生四項即四種不同的病種放到一個反應板上，一次性操作即可得出四種疾病的診斷結果，減少了頻繁的操作程序，節約人力、物力、節省時間，易于觀察并做出診斷。?

為了實現上述發明目的，本實用新型設有載體板、巨細胞病毒（CMV）抗體（抗原）檢測線（點）、弓形蟲（TO）抗體（抗原）檢測線（點）、風疹病毒（RV）抗體（抗原）檢測線（點）、單純皰疹病毒（HSV-1）抗體（抗原）檢測線（點）、對照線（點）、硝酸纖維素膜（NC膜）、溫育槽；硝酸纖維素膜粘貼在載體板的表面，巨細胞病毒抗體（抗原）檢測線（點）、弓形蟲抗體（抗原）檢測線（點）、風疹病毒抗體（抗原）檢測線（點）、單純皰疹病毒抗體（抗原）檢測線（點）、對照線（點）自上而下依次設在硝酸纖維素膜上，并在各檢測線（點）和對照線（點）四周制有溫育槽；在巨細胞病毒抗體（抗原）檢測線（點）、弓形蟲抗體（抗原）檢測線（點）、風疹病毒抗體（抗原）檢測線（點）、單純皰疹病毒抗體（抗原）檢測線（點）處分別包被對應的抗原（抗體）；在對照線或對照點處自左至右分別包被巨細胞病毒抗原、弓形蟲抗原、風疹病毒抗原、單純皰疹病毒抗原或分別包被含巨細胞病毒抗體、弓形蟲抗體、風疹病毒抗體、單純皰疹病毒抗體的病人陽性血清。?

本實用新型的制備方法如下：?

1、抗巨細胞病毒抗體、抗弓形蟲抗體、抗風疹病毒抗體、抗單純皰疹病毒抗體或巨細胞病毒抗體（抗原）、弓形蟲抗體（抗原）、風疹病毒抗體（抗原）、單純皰疹病毒抗體（抗原）?市售購買；?

2、標準陽性血清的獲得：?

收集風疹病毒、巨細胞病毒、弓形體和單純皰疹病毒病人的陽性血清，得到陽性參照血清，定為標準陽性血清，-30℃凍存；?

陽性病人的血清必須經過Elisa實驗，結果為陽性(顯色明顯，陽性OD值/陰性OD值≥2.1)；經過熒光免疫實驗（IFA），結果為陽性結果。?

3、硝酸纖維素膜的點樣：巨細胞病毒抗體（抗原）檢測線（點）、弓形蟲抗體（抗原）檢測線（點）、風疹病毒抗體（抗原）檢測線（點）、單純皰疹病毒抗體（抗原）檢測線（點）和對照線（點）自上而下依次設在硝酸纖維素膜上，并在各檢測線（點）和對照線（點）四周制有溫育槽；在硝酸纖維素膜的各病毒（種）檢測線(點)上分別包被巨細胞病毒抗原（抗體）、弓形蟲抗原（抗體）、風疹病毒抗原（抗體）、單純皰疹病毒抗原（抗體）；在各對照線（點）上自左至右分別包被巨細胞病毒抗原、弓形蟲抗原、風疹病毒抗原、單純皰疹病毒抗原或自左至右分別包被含巨細胞病毒抗體、弓形蟲抗體、風疹病毒抗體、單純皰疹病毒抗體的病人陽性血清；晾干；?

4、抗巨細胞病毒抗體、抗弓形蟲抗體、抗風疹病毒抗體、抗單純皰疹病毒抗體或巨細胞病毒抗體、弓形蟲抗體、風疹病毒抗體、單純皰疹病毒抗體的堿性磷酸酶標記或辣根過氧化物酶標記；?

5、制備免疫斑點試劑盒?

用切條機將載體板切成條狀，將硝酸纖維素膜粘貼在載體板表面；和用酶標記的抗巨細胞病毒抗體、抗弓形蟲抗體、抗風疹病毒抗體、抗單純皰疹病毒抗體或巨細胞病毒抗體、弓形蟲抗體、風疹病毒抗體、單純皰疹病毒抗體及堿性磷酸酶底物或辣根過氧化物酶底物四甲基聯苯胺TMB共同組成計生四項免疫斑點試劑盒；所述堿性磷酸酶底物是硝基藍四唑和5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸鹽BCIP比例為1：49的混合物。?

本實用新型一次性快速檢測計生四項、操作簡單，成本低、設計新穎，易被使用者喜愛，更便于普及使用。?

附圖說明：

1、圖1為點狀酶聯免疫斑點計生四項聯合試劑盒結構示意圖；?

2、圖2為線狀酶聯免疫斑點計生四項聯合試劑盒結構示意圖。?