[實用新型]miR-15a作為主動脈夾層臨床篩查分子標記物的檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201320454302.7
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN203613173U
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 周建;景在平;陸清聲;董健;趙志青;包俊敏;馮睿;馮翔;袁良喜
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司 31204
• 代理人: 郁旦蓉

技術領域

本實用新型涉及生物檢測技術領域，特別涉及一種miR-15a作為主動脈夾層臨床篩查分子標記物的檢測試劑盒。

背景技術

主動脈夾層是指主動脈內高速高壓血流通過主動脈壁上的內膜撕裂口進入中膜層或中外膜交界處，從而形成主動脈真假兩腔，并沿主動脈長軸方向擴展，導致主動脈破裂致患者死亡或重要臟器（如：心臟、大腦、腎臟、腸道等）急性缺血引起嚴重并發癥，病情兇險，是累及主動脈最嚴重的疾病之一；按病程可分為急性主動脈夾層（acute?aortic?dissection，AAD）、亞急性主動脈夾層（subacute?aortic?dissection，SAD）和慢性主動脈夾層。我們在臨床實踐中發現，很多主動脈夾層患者在獲得手術治療前甚至是明確診斷前即因病變主動脈破裂而死亡。有調查研究顯示，未經治療的Stanford?A型急性主動脈夾層患者發病初期的死亡率高達1%～2%/h。經合理治療的患者生存率會大幅提高，尤其是經手術治療的患者，將會在短期內實現生存率從高死亡風險提高至大于70%。但是，在臨床工作中，針對劇烈胸痛的患者常規進行的檢查是心電圖和胸部X線透視，這些檢查對急性主動脈夾層的診斷都缺乏敏感度和特異性。從而主動脈夾層的患者往往不能得到及時有效的診治，加之有部分亞急性主動脈夾層患者并未表現出主動脈夾層的典型臨床表現，導致主動脈夾層這一被醫療工作者發現并研究200多年的疾病（于1761年由Morgagni第一次報道）的臨床誤診率仍高達39%，部分患者只有在尸檢時才發現罹患了主動脈夾層。尤其是在Stanford?A型急性主動脈夾層累及冠脈時，誤診為冠心病、急性心肌梗死（acute?myocardial?infarction,AMI）的可能性非常大；患者往往被施予抗凝、抗血小板、甚至是溶栓治療，導致病情惡性進展。因此，及時明確診斷并采取合理的治療是救治主動脈夾層患者的關鍵之一。

目前，主動脈夾層的診斷主要依賴于影像學檢查，例如：電子計算機X線斷層血管成像、經食道多普勒超聲或者核磁共振血管成像，這些檢查對急性主動脈夾層具有非常高的敏感度和特異性。但是，這些檢查是在首診醫生認為該患者有罹患主動脈夾層可能的情況下進行的，且需要接診醫生首先排除具有相似臨床表現的、發病率更高的急性冠脈綜合征、肺梗死等疾病；加之這些檢查的操作和等待過程需要大量時間，常會使患者喪失珍貴的早起診療時機。因此，尋找主動脈夾層臨床適用的早期診斷生物標記物是目前亟待解決的重要問題之一，同時對疾病病情發展轉歸的監測及預后具有重要意義。學術界為尋找主動脈夾層的生物標記物進行了大量研究，發現了諸如：C反應蛋白、D-二聚體、平滑肌肌球蛋白重鏈、鈣調理蛋白等可能與急性主動脈夾層的發生有關聯的一系列生物標記物，但由于缺乏特異性、半衰期短或受到假腔血栓化的局限等因素均未能在急性主動脈夾層的臨床診治中得到廣泛應用。對此，Ranasinghe等提出了理想的早期診斷指標應具備的一般特點：靈敏度高、特異性強、能夠反映疾病的病程轉歸、快捷、易用、價格低廉、具有良好的臨床應用前景和廣泛的商業供應商；為主動脈夾層生物標記物的研究提供了理論標準。

在臨床診療過程中，許多實驗室檢查項目以其迅速、能夠在床邊完成、并且對疾病具有較高的敏感度和特異性等特點，得到了廣泛應用。近年來科學的重大發現微小RNA（mircoRNA，miRNA）是一類在人類和動物廣泛存在并高度保守的小分子非編碼RNA；miRNA在心血管組織細胞發育與分化及結構形成異常過程中扮演了極為重要的角色，本課題組前期針對主動脈夾層組和健康組（遺體捐獻者）主動脈標本中miRNA進行檢測分析，得到夾層主動脈中膜顯著改變的miRNA表達譜，同時我們還發現了主動脈夾層中下調的miR-22與HSP27和EC-SOD相關(J?vasc?surg.2011;53:1341-9)。新近研究表明，miRNA因具有組織特異性及高度保守的特性，使其具有作為疾病生物標記物的可能。例如：Ai等通過急性心肌梗死患者與對照組比較，結合小鼠模型中miR-1的過表達，證實在急性心肌梗死患者循環血中miR-1水平顯著增高，發病兩周后恢復到基礎水平的變化趨勢；荊清教授等報道了急性心肌梗死患者相對健康人循環血中顯著增高的miR-208a，其血漿水平隨患者病情轉歸而變化，并且外周血中miR-208a早于心肌肌鈣蛋白出現的特點，提示miR-208a可能是急性心肌梗死一個更敏感的早期標志物。

實用新型內容