[實用新型]一種快速檢測全血中豬附紅細胞體的膠體金試紙條

有效

• 申請號: 201320378082.4
• 申請日: 2013-06-27
• 公開（公告）號: CN203299202U
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 劉建柱;孟凱;劉永夏;張紅超;陳甜甜
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型提供了一種膠體金試紙條，屬于預防獸醫學檢驗領域，具體涉及了一種快速檢測全血中豬附紅細胞體的膠體金試紙條。

背景技術

豬附紅細胞體（Mycoplasma?suis,M.suis）是一種寄生于豬的紅細胞表面、血漿、組織液及腦脊髓液中的微生物，引起豬的貧血、黃疸、發熱、母豬流產等癥狀。附紅細胞體是1928年被Schilling和Dinger同時在嚙齒類動物中發現；1932年Doyle等（1932）在印度報道了豬的附紅細胞體病；1950年Splitter(1950)正式命名引起豬黃疸型貧血病的附紅細胞體為豬附紅細胞體；據報道發現附紅細胞體對豬的感染率可達到90%（張守發等，2003）。迄今為止，該病遍布美、歐、亞、非等世界各地。上世紀八十年代在中國首次發現M.suis,近幾年引起大規模的爆發流行，給養豬業造成了巨大的經濟損失。長期以來，由于M.suis無法在體外進行長期連續培養（Nonaka?N等，1996）以及M.suis本身的一些特殊性，在很大程度上限制了對M.suis的研究。國外學者在對感染M.suis的病豬進行M.suis抗原蛋白的分析中發現了8種抗原蛋白（Hoelzle?L?E等，2006），其中被命名為p40、p45、p70的3種確定為M.suis蛋白，而p40即為MSG1蛋白。Hoelzle對MSG1的研究表明，M.suis的致病機制是通過其表面的黏附蛋白（MSG1）黏附于紅細胞表面來實現的；Hoelzle等將MSG1蛋白作為疫苗注入豬體內，結果引起了嚴重的免疫反應，但不能對機體產生有效地保護作用（Hoelzle?K等，2009），因此，MSG1蛋白可以作為檢測M.suis的首選抗原蛋白。

目前，對M.suis的檢測方法主要采用血液鏡檢、血清學、分子生物學的方法，而這些診斷方法在用于臨床檢測時均存在明顯的缺點。血液鏡檢技術主要以觀察紅細胞的形狀作為診斷依據，具有很大的片面性；血清學中，均因M.suis缺乏可行的體外培養方式而受到限制，其中補體結合實驗不適用于個體的檢測（王國永等，2006），熒光抗體技術敏感性較差，分子生物學方法價格昂貴且檢測所需時間較長。而由于血液中含有較多的細胞，無法直接用于檢測，需要提取出血清后才能進行上述的檢測，無形中增加了檢測的成本和時間，因此，使這些方法在使用中受到很大的限制，也未見有可用的裝置或者其他的檢測工具。

發明內容

針對現有技術存在的諸多不足之處，本實用新型提供了一種膠體金試紙條，具體涉及了一種快速檢測全血中豬附紅細胞體的膠體金試紙條，該試條包括檢測層，在檢測層上設置有包被豬附紅細胞體MSG1抗原抗體的檢測線和一條包被抗鼠抗體的控制線，采用這種結構的試紙條具有特異性強、靈敏度高、檢測速度快、性能穩定、不需儀器檢測，直接可以采用末梢全血標本，改變以往采用抽靜脈血，取血清進行檢測，可即采即測等優點；該試紙條成本低廉，操作簡便，能廣泛應用于基層對于豬附紅細胞體的檢測。

本實用新型所采用的具體技術方案是：

一種快速檢測全血中豬附紅細胞體的膠體金試紙條，包括底襯，底襯上自左向右分別設置有樣品墊，紅細胞濾過膜，釋放墊，檢測層和吸收墊，其中檢測層中部自左向右分別設置有一條包被豬附紅細胞體MSG1抗原抗體的檢測線和一條包被抗鼠抗體的控制線，檢測層左側上表面粘貼有涂覆金標抗體的釋放墊，右側表面粘貼有吸收墊；釋放墊左側上表面粘貼有紅細胞濾過膜，紅細胞濾過膜左側上表面粘貼有樣品墊。

其中，底襯選用聚乙烯纖維板；樣品墊選用玻璃纖維；釋放墊和吸收墊均選用玻璃纖維；檢測層選用硝酸纖維素膜，紅細胞濾過膜以及上述的各種材料均為市購。

而檢測線中所采用的豬附紅細胞體MSG1抗原抗體為高純度的抗豬附紅細胞體的多克隆抗體，也可采用現有的其他多克隆抗體；所采用的涂覆金標抗體的釋放墊中有由膠體金顆粒標記的抗豬附紅細胞體MSG1抗原的單克隆抗體，也可采用現有的其他單克隆抗體，這樣如果檢測的全血樣品中含有豬附紅細胞體的話，金標抗體便會與豬附紅細胞體結合，當抗體與抗原結合復合物流經檢測線后，該抗原抗體結合復合物便會被高純度的抗豬附紅細胞體的多克隆抗體所捕獲。同時由于本發明中在樣品墊與釋放墊中間設置了紅細胞濾過膜，過濾掉了諸如紅細胞等雜細胞，使得直接可以采用末梢全血標本，改變以往采用抽靜脈血，取血清進行檢測，可即采即測等優點。

本實用新型中檢測層上的檢測線和控制線可通過如下具體步驟設置：