[發明專利]一種促進黑木相思優樹腋芽增殖及生根的培養方法

無效

• 申請號: 201310754893.4
• 申請日: 2013-12-31
• 公開（公告）號: CN103749296A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 黃烈健;胡峰;施瓊
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院熱帶林業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 鄭瑩

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體涉及一種促進黑木相思優樹腋芽增殖及生根的培養基及培養方法。

背景技術

黑木相思屬含羞草科(Mimosaceae)金合歡屬(Acacia)，具有材質優良、速生豐產、適應性強等特點，且能與根瘤菌共生固氮，在改良土壤、提升地力、保持水土等方面作用顯著，是優良的短周期工業原木供應樹種和生態防護林樹種。

林木組織培養主要通過直接器官發生途徑和間接器官發生途徑來實現，其中直接器官發生途徑是通過腋芽增殖來實現以芽繁芽的快速繁殖過程，具有性狀遺傳穩定，繁殖速度快，植株粗壯等優點，是良種擴繁的有效途徑，而間接器官發生途徑包含愈傷組織的誘導和愈傷組織再分化兩個中間步驟，繁殖速度慢，植物突變率高，不適于保存優良性狀。黑木相思兩種組培快繁途徑均有報道，但存在如下問題：

1)以種子苗的莖段作為外植體，雖然可以實現直接器官發生途徑，但沒有注重優樹的選擇，種子苗存在性狀分化等特征，不能通過組培方式獲得無性系，因而會造成生產上林份分化大，林相參差不齊，無法實現規模利用。

2)通過間接器官發生途徑實現的組織培養技術，其過程包括愈傷組織的誘導和再分化，繁殖速度慢，植物突變率高，不適于保存優良性狀。

3)黑木相思極易在細胞分裂素的作用下實現間接器官發生途徑，細胞分裂素使黑木相思組培過程中的芽的基部形成大量的愈傷組織，不利于根莖葉的生長，一般會出現莖段極細、顏色泛黃、葉片脫落、根系粗大、無須根等不良現象，最終導致黑木相思組培苗質量差，移栽存活率低，從而增加組培苗生產成本。而目前報道的黑木相思直接器官發生途徑均有添加一定濃度的細胞分裂素。

4)最后，黑木相思組培快繁中容易出現增殖倍數、生根率低，增殖苗用于生根時，生根率低，生根苗移栽存活率低。難以維持組培工廠化生產中多次、穩定的繼代培養和較高的生根率、移栽存活率。

發明內容

為解決上述存在問題，實現黑木相思優樹的直接器官發生途徑，并防止該途徑中出現大量愈傷組織、芽長勢弱小、增殖倍數和生根率低等問題，本實驗通過調整培養基中的激素種類及其濃度，建立了適宜于保持黑木相思良種優良性狀的高效組織培養快繁途徑。

本發明的目的在于提供一種促進黑木相思優樹腋芽增殖及生根的培養基。

本發明的另一目的在于提供一種促進黑木相思優樹腋芽增殖及生根的培養方法。

本發明所采取的技術方案是：

一種促進黑木相思優樹腋芽增殖及生根的培養基，該培養基為在MS基本培養基中添加有0.25～0.5mg·L^-1IBA、0.25～0.5mg·L^-1IAA、25～40g·L^-1蔗糖、6.0～7.0g·L^-1瓊脂。

一種促進黑木相思優樹腋芽增殖及生根的培養方法，包括以下步聚：

1)以3年生黑木相思優株的帶腋芽枝條為材料，剪成長1～2cm的帶腋芽莖段，洗凈、消毒，接種至初代培養基中，培養使腋芽長成2～3cm長的新芽；

2)在無菌條件下，將1)中的新芽剪成只含一個腋芽的莖段，接種至權利要求1所述的培養基，培養15～20天使芽生根，培養40～45天使芽增殖。

進一步的，步驟1)所述的消毒過程具體為：將洗滌干凈的帶腋芽莖段在潔凈工作臺上用70～75％酒精和0.08～0.12％升汞分別消毒30～60s和8～12min，無菌水洗干凈，無菌濾紙吸干表面水分。

進一步的，步驟1)中所述的初代培養基為在MS基本培養基中添加有25～40g·L^-1蔗糖、6.0～7.0g·L^-1瓊脂。

進一步的，步驟1)所述的初代培養的培養條件為：溫度23～27℃，光周期為13～15h光照／9～11h黑暗，光強為2000～2500Lx。

進一步的，步驟3)所述的培養的條件為溫度23～27℃，光周期為13～15h光照／9～11h黑暗，光強為2000～2500Lx。

本發明的有益效果是：

1)本發明以優良無性系為起始材料，建立組培快繁體系，確保了組培苗的優良性狀。

2)在本發明中，聯合使用生長素IAA和IBA不僅可以有效誘導黑木相思的生根，還可以顯著促進黑木相思腋芽的增殖，實現了黑木相思的直接器官發生途徑。