[發(fā)明專利]一種香菇多糖的提取及分級方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310753452.2
• 申請日: 2013-12-31
• 公開（公告）號: CN103724447A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 丁建勛;許維國;莊秀麗;陳學(xué)思
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院長春應(yīng)用化學(xué)研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P37/04;A61P31/20;A61P31/06;A61P11/00
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及有效成分提取分級技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種香菇多糖的提取及分級方法。

背景技術(shù)

香菇屬于擔(dān)子菌綱傘形真菌，是世界上十分流行的食用菌。香菇中的主要成分是香菇多糖，多以混合多糖的形式存在，包括4種雜多糖和2種葡聚糖，其中，具有生物活性的是葡聚糖，其結(jié)構(gòu)以β-（1→3）吡喃葡萄糖苷鍵為主鏈，以β-（1→6）吡喃葡萄糖苷鍵為分支。

現(xiàn)代研究表明香菇多糖具有調(diào)節(jié)免疫力，抗腫瘤，降血糖，抗病毒及抗氧化等功能。香菇多糖對機(jī)體具有免疫調(diào)節(jié)作用，主要是由于其屬于典型的T細(xì)胞激活劑，在體內(nèi)能促進(jìn)遲發(fā)超敏反應(yīng)，提高抗體依賴性細(xì)胞毒細(xì)胞活性，同時還能誘導(dǎo)產(chǎn)生急性蛋白誘導(dǎo)因子等因子，從而產(chǎn)生相關(guān)免疫應(yīng)答。有報道表明香菇多糖能夠抑制小鼠S-180實(shí)體瘤的生長，同時對于治療結(jié)腸癌、乳腺癌、肺癌、胃癌等都有良好的療效，且能延長腫瘤患者的存活時間，也能夠極大的減輕化療帶來的副作用；臨床應(yīng)用也發(fā)現(xiàn)，香菇多糖可改善乙肝患者的乏力、惡心、腹脹等常見癥狀，促進(jìn)轉(zhuǎn)氨酶和膽紅素恢復(fù)正常；香菇多糖還對Abelson病毒、A2（H2N2）病毒、12型腺病毒及流感病毒等均有抑制作用。

雖然近年來香菇多糖在臨床應(yīng)用上越來越受到人們的重視，但是其作用機(jī)制還不十分明確，特別是抗腫瘤活性的機(jī)理，其中很重要的一個原因就是香菇多糖本身的復(fù)雜性。

因此，對香菇多糖進(jìn)行提取分級，對于研究香菇多糖的作用機(jī)制有非常重要的意義。目前對于香菇多糖的提取方法主要包括：稀堿提取法，多以氫氧化鈉為提取劑，提取可以得到較多的堿溶性多糖，不能但是這種方法得到的多糖雜質(zhì)較多，多糖也易被破壞；還有稀酸提取法，多以三氯乙酸為提取劑，可以得到較多的酸溶性多糖，但是多糖也易被破壞；還有稀鹽提取法，多以氯化鋅為提取劑，但是這種方法提取率較低，對原料造成較大的浪費(fèi)；此外，還有微波、超聲波法，以去離子水為提取劑，但是熱敏性多糖易被破壞。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種香菇多糖的提取及分級方法，不會對多糖造成破壞，并且對多糖的提取率較高，同時能夠?qū)Χ嗵沁M(jìn)行較好的分級。

本發(fā)明提供了一種香菇多糖的提取方法，包括：

A）將香菇依次進(jìn)行干燥、粉碎、浸泡、水提得到香菇多糖粗提物；

B）將步驟A）得到的香菇多糖粗提物依次用氯苯、氯化鈣、草酸銨、胰蛋白酶、Sevage試劑進(jìn)行除蛋白，最后采用醇沉的方法得到香菇多糖。

優(yōu)選的，所述粉碎的粒度為50目～300目。

優(yōu)選的，所述浸泡的時間為12h～72h；所述水提的溫度為60℃～98℃。

優(yōu)選的，所述氯化鈣的用量為所述香菇的10wt%～40wt%；所述草酸銨的用量為所述香菇的1wt%～5wt%。

優(yōu)選的，所述醇沉的方法采用的醇為乙醇。

優(yōu)選的，所述步驟B）中，在依次用草酸銨、胰蛋白酶對香菇多糖粗提物進(jìn)行除蛋白的步驟中間，還包括：加入氯化鈉。

優(yōu)選的，所述步驟B）中，在用Sevage試劑對香菇多糖粗提物進(jìn)行除蛋白后，還包括：加入活性炭。

本發(fā)明還提供了一種上述提取方法得到的香菇多糖分級的方法，包括：

用丙酮對香菇多糖進(jìn)行分級沉淀，得到分級后的香菇多糖。

優(yōu)選的，所述方法具體為：

a）將通過權(quán)利要求1所述的提取方法得到的香菇多糖溶解于蒸餾水中，加入丙酮至出現(xiàn)沉淀，離心得到上清液和沉淀，所述沉淀為第一級香菇多糖；

b）取步驟a）中得到的上清液，加入丙酮至出現(xiàn)沉淀，離心得到上清液和沉淀，所述沉淀為第二級香菇多糖；

c）重復(fù)上述過程，至丙酮濃度達(dá)到90wt%。

本發(fā)明還提供了一種香菇多糖在制備增強(qiáng)免疫力的藥物或食品中的應(yīng)用，所述香菇多糖的重均分子量為16200。