[發明專利]一種制備高純度丹參酮化合物的三柱循環分離系統及其方法

有效

• 申請號: 201310750853.2
• 申請日: 2013-12-30
• 公開（公告）號: CN103768826A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 吳世華;孟杰
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: B01D11/02
• 分類號: B01D11/02;B01D15/10;C07J73/00;C07J75/00;C07C50/34;C07C46/10
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 韓介梅

1.一種制備高純度丹參酮化合物的三柱循環分離系統，其特征在于包括三個逆流色譜柱（A1、B1、C1），三個泵（1、2、3），三個檢測器（4、5、6），三個收集器（7、8、9）和四個六通閥（10、11、12、13）；其中第一六通閥（10）做進樣閥，該進樣閥與第二六通閥（11）的第Ⅰ節點以及第一盛裝流動相容器（14）相連；第二六通閥（11）的第Ⅱ節點與第一泵（1）的輸入端相連，第一泵（1）的輸出端與第一逆流色譜柱（A）的首端相連，第一逆流色譜柱（A）的尾端與第一檢測器（4）的輸入端相連，第一檢測器（4）的輸出端與第三六通閥（12）的第Ⅰ節點相連，第三六通閥（12）的第Ⅱ節點與第一收集器（7）相連；第三六通閥（12）的第Ⅴ節點與第二盛裝流動相的容器（15）相連，第三六通閥（12）的第VI節點與第二泵（2）的輸入端相連，第二泵（2）的輸出端與第二逆流色譜柱（B）的首端相連，第二逆流色譜柱（B）的尾端與第二檢測器（5）的輸入端相連，第二檢測器（5）的輸出端與第四六通閥（13）的第Ⅰ節點相連，第四六通閥（13）的第Ⅱ節點與第二收集器（8）相連；第四六通閥（13）的第Ⅴ節點與第三盛裝流動相容器（16）相連，第四六通閥（13）的第VI節點與第三泵（3）的輸入端相連，第三泵（3）的輸出端與第三逆流色譜柱（C）的首端相連，第三逆流色譜柱（C）的尾端與第三檢測器（6）的輸入端相連，第三檢測器（6）的輸出端與第二六通閥（11）的第Ⅲ節點相連，第二六通閥（11）的第Ⅳ節點與第三收集器（9）相連。?

2.利用權利要求1所述的三柱循環分離系統制備高純度丹參酮化合物的方法，該丹參酮類化合物包括結構式(1)二氫丹參酮Ⅰ、結構式(2)隱丹參酮、結構式(3)丹參酮Ⅰ、結構式（4）1,2-二氫丹參醌、結構式（5）丹參酮ⅡA、結構式（6）三葉鼠尾酮B、結構式（7）甲基丹參酮酯和結構式（8）丹參新醌A，?

其制備包括以下步驟：?

（1）將丹參根莖粉碎后，用體積濃度95%的乙醇充分浸泡提?。?

（2）減壓濃縮乙醇提取液，得到富含二氫丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、1,2-二氫丹參醌、丹參酮ⅡA、三葉鼠尾酮B、甲基丹參酮酯和丹參新醌A的丹參酮提取物；?

（3）配制四元溶劑體系：將正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水按體積百分比分別為68.70%、24.91%、3.64%和2.75%配制的四元溶劑體系作為上相，按體積百分比分別為2.53%、24.77%、49.04%和23.66%配制的四元溶劑體系作為下相，將配制好的上下相分別加入到三個逆流色譜柱（A1、B1、C1）中，加入到每個逆流色譜柱中上相的量為其柱體積的60%，下相的量為其柱體積的40%，其中上相做固定相，下相做流動相；?

（4）將步驟（2）制得的丹參酮提取物首先經過第一逆流色譜柱（A1）分離，得到前后洗脫順序依次為丹參新醌A、二氫丹參酮Ⅰ、三葉鼠尾酮B、甲基丹參酮酯、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、1,2-二氫丹參醌、丹參酮ⅡA的洗脫液；?

（5）觀察第一檢測器（4），當含有丹參新醌A以及二氫丹參酮Ⅰ、三葉鼠尾酮B、甲基丹參酮酯、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、1,2-二氫丹參醌和丹參酮ⅡA的洗脫液從第一逆流色譜柱（A1）開始被洗出后，調節第三六通閥（12）將第一逆流色譜柱（A1）尾端與第二逆流色譜柱（B1）首端連接，調節第四六通閥（13）將第二逆流色譜柱（B1）尾端與第三逆流色譜柱（C1）首端連接，調節第二六通閥（11）將第三逆流色譜柱（C1）尾端與第一逆流色譜柱（A1）首端連接，使第一、第二和第三逆流色譜柱（A1、B1、C1）組成三柱循環分離體系，在線直接將洗脫液轉入第二逆流色譜柱B1；觀察第一檢測器（4），當含有1,2-二氫丹參醌、丹參酮ⅡA的洗脫液開始從第一逆流色譜柱（A1）被洗出后，調節第三六通閥（12）將第一逆流色譜柱（A1）與第二逆流色譜柱（B1）斷開，第一收集器（7）收集1,2-二氫丹參醌和丹參酮ⅡA洗脫液；?

（6）觀察第二檢測器（5），當含丹參新醌A以及二氫丹參酮Ⅰ、三葉鼠尾酮B、甲基丹參酮酯、隱丹參酮和丹參酮Ⅰ的洗脫液從第二逆流色譜柱（B1）洗出后，通過第四六通閥（13）進入第三逆流色譜柱（C1），當含有丹參酮Ⅰ洗脫液從第二逆流色譜柱（B1）開始被洗出后，調節第四六通閥（13）將第二逆流色譜柱（B1）與第三逆流色譜柱（C1）斷開，第二收集器（8）收集丹參酮Ⅰ洗脫液；?

（7）觀察第三檢測器（6），當含丹參新醌A以及二氫丹參酮Ⅰ、三葉鼠尾酮B、甲基丹參酮酯和隱丹參酮的洗脫液從第三逆流色譜柱（C1）洗出后，通過第二六通閥（11）進入第一逆流色譜柱（A1），當含有甲基丹參酮酯和隱丹參酮以及丹參酮Ⅰ洗脫液從第三逆流色譜?柱（C1）開始被洗出后，調節第二六通閥（11）將第三逆流色譜柱（C1）與第一逆流色譜柱（A1）斷開，第三收集器（9）收集甲基丹參酮酯和隱丹參酮以及丹參酮Ⅰ洗脫液；?

（8）觀察第一檢測器（4），當含丹參新醌A、二氫丹參酮Ⅰ的洗脫液從第一逆流色譜柱（A1）洗出后，通過第三六通閥（12）進入第二逆流色譜柱（B1），當含有三葉鼠尾酮B的洗脫液從第一逆流色譜（A1）開始洗出后，調節第三六通閥（12）將第一逆流色譜柱（A1）與第二逆流色譜柱（B1）斷開，第一收集器（7）收集三葉鼠尾酮B洗脫液；?

（9）觀察第二檢測器（5），當含丹參新醌A、二氫丹參酮Ⅰ的洗脫液從第二逆流色譜柱（B1）開始洗出后，調節第四六通閥（13）將第二逆流色譜柱（B1）與第三逆流色譜柱（C1）斷開，第二收集器（8）收集丹參新醌A、二氫丹參酮Ⅰ洗脫液。?