[發(fā)明專利]2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′ -二羥基二苯甲酮、其制備方法及其用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310747256.4
• 申請日: 2013-12-31
• 公開（公告）號: CN103739637A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杜晨暉;張劍;余伯陽
• 申請（專利權(quán)）人: 杜晨暉
• 主分類號: C07H15/203
• 分類號: C07H15/203;C12P19/44;A61K31/7034;A61P37/08
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• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物藥物領(lǐng)域，具體涉及2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′?-二羥基二苯甲酮及其制備方法，本發(fā)明還公開了其抗過敏的用途。

背景技術(shù)

過敏性鼻炎、哮喘、特發(fā)性皮炎、結(jié)腸炎、食物過敏、藥物過敏等過敏性疾病是一類常見病，隨著感染性疾病的控制和工業(yè)化程度的提高，過敏性疾病的發(fā)病率在全世界范圍內(nèi)呈逐年增高趨勢，已成為各國政府高度關(guān)注的全球健康問題。西醫(yī)目前尚未完全清楚本病病因，中醫(yī)藥在防治過敏性疾病方面有其優(yōu)勢特色，尤其在緩解病情、防止復(fù)發(fā)、維持病情長期、穩(wěn)定、提高患者的生存質(zhì)量等方面有良好效果，但對其有效性的科學(xué)闡釋尚不充分。因此，從資源豐富的中藥中尋找新型抗過敏藥物，對于過敏性疾病的防治具有現(xiàn)實意義和廣闊前景。中國藥科大學(xué)中藥復(fù)方實驗室前期研究中發(fā)現(xiàn)，2-O-α-L-鼠李糖-4,6,4′?-三羥基二苯甲酮具有明顯的抗過敏作用。但二苯甲酮糖苷的天然來源和種類有限，成本高，利用二苯甲酮類苷元的微生物糖基化修飾少見報道。

微生物轉(zhuǎn)化是利用微生物產(chǎn)生的特異酶對外源性化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾的特定生化反應(yīng)。微生物轉(zhuǎn)化具有高度的立體結(jié)構(gòu)選擇性，能專一地催化特定的反應(yīng)、無需繁瑣的保護(hù)與脫保護(hù)操作，具有高效、環(huán)保的優(yōu)點，是天然活性化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾的一種有效方法。若在含有多個羥基的二苯甲酮類化合物中引入糖基可以增加二苯甲酮類糖苷的種類，進(jìn)而篩選出更多有活性甚至活性更高的化合物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了結(jié)構(gòu)式I的化合物：

命名為2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′?-二羥基二苯甲酮。本發(fā)明同時也包括結(jié)構(gòu)式I的化合物的溶劑化物。

它的¹³C-NMR數(shù)據(jù)為C(1)?111.8，C(2)?158.4，C(3)?95.0，C(4)?164.3，C(5)?96.9，C(6)?159.1，C(7)?197.0，C(1’)?138.5，C(2’)?133.5，C(3’)?116.0，C(4’)?164.0，C(5’)?116.0，C(6’)?133.5，與2,6,4′-三羥基-4-甲氧基二苯甲酮¹³C-NMR數(shù)據(jù)相比較，可以確定其母核為2,6,4′-三羥基-4-甲氧基二苯甲酮，通過化學(xué)位移中的變化可確定糖是連在C₂位上。另外還有6個葡萄糖碳信號，分別為GLC(1)?102.6，GLC(2)?74.8，GLC(3)?77.9，GLC(4)?71.3，GLC(5)?78.3，GLC(6)?62.6。其單獨還有一個甲氧基碳信號為:?C_4-OMe?55.9。

藥理試驗證明，本發(fā)明的式I化合物具有優(yōu)異的抗過敏效果。

????本發(fā)明的式I化合物優(yōu)選用生物轉(zhuǎn)化方法以2,6,4′-三羥基-4-甲氧基二苯甲酮為底物進(jìn)行轉(zhuǎn)化制備，方法如下：

??????

為了尋找適宜轉(zhuǎn)化2,6,4′-三羥基-4-甲氧基二苯甲酮成2-O-β-D-葡萄糖-4-甲氧基-6,4′?-二羥基二苯甲酮的菌種，本發(fā)明共篩選了多個菌種，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，保藏號為NRRL1086菌種對2,6,4′-三羥基-4-甲氧基二苯甲酮具有較強(qiáng)的轉(zhuǎn)化能力（見表2）。

篩選所用液體培養(yǎng)基(PDA)：200克新鮮去皮馬鈴薯加沸水500ml煮15min后過濾，濾液加葡萄糖20g、KH₂PO₄?3.0g、MgSO₄?0.75g、Vb₁?10.0mg，加蒸餾水定容至1.0L，加NaOH或HCl調(diào)pH值至6.0，150ml三角燒瓶每瓶分裝30ml液體培養(yǎng)基，121℃、0.15MPa滅菌20min。

篩選菌種時，保存菌種所用斜面培養(yǎng)基是在上述液體培養(yǎng)基加入1.5%的瓊脂，15ml具塞試管每管5ml，121℃、0.15MPa滅菌20min冷卻后制成。

菌種的保存與活化：菌種活化采用兩步活化法，參見：Nair,M.S.R.,and?Basile,D.V.Bioconversion?of?artenium?B?to?artmisinn.天然產(chǎn)物雜志（Jounal?of?Natural?Products）1993,56(9):1559。先將菌種接種于液體培養(yǎng)基，28℃180r/min旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)24-48h后，轉(zhuǎn)接于另一液體培養(yǎng)基，接種量1-5%（V/V），同條件培養(yǎng)24h后加樣。