[發(fā)明專利]一種肝素鈉的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310745559.2
• 申請日: 2013-12-30
• 公開（公告）號: CN103755838A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設計）人: 曲濤;高福凱;苗偉;呂惠忠;仰振球;由守誼
• 申請（專利權）人: 煙臺東誠生化股份有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 曹津燕;李渤

1.一種肝素鈉的制備方法，其特征在于，該制備方法包括以下步驟：

（1）將粗品肝素鈉水溶液升溫至45～50℃，調(diào)節(jié)pH至8.0～9.0，加入胰酶反應，再加入氯化鈣，溶解后升溫至80～85℃，再降溫至40℃以下，加入碳酸鈉，離心取上清液；

（2）將步驟（1）得到的上清液升溫至45～50℃，調(diào)節(jié)pH至4.5～5.5，加入纖維素酶反應，再加入氯化鈣，溶解后升溫至80～85℃，再降溫至40℃以下，加入碳酸鈉，離心取上清液；

（3）向步驟（2）得到的上清液加入乙醇或乙醇水溶液，降溫至0～5℃，調(diào)節(jié)pH至1.0～2.0，離心取上清液并調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0；

（4）向步驟（3）得到的上清液加入乙醇或乙醇水溶液，至20℃下的乙醇濃度為40-45°，靜置得到濕沉淀；

（5）將步驟（4）得到的濕沉淀溶解在水中，加入次氯酸水溶液，調(diào)節(jié)pH至4.5～5.0，20～30℃下靜置，調(diào)節(jié)pH至6.0～7.0，加入氯化鈉，加入乙醇或乙醇水溶液至20℃下的乙醇濃度為40～45°，靜置得到濕沉淀；

（6）將步驟（5）得到的濕沉淀溶解在水中，調(diào)節(jié)pH至10.0～10.5，加入過氧化氫水溶液，25～30℃下靜置，調(diào)節(jié)pH至6～7，過濾。

2.根據(jù)權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（1）中，所述粗品肝素鈉水溶液為除去雜質(zhì)的粗品肝素鈉的水溶液；

優(yōu)選地，所述除去雜質(zhì)包括以下步驟：在25～35℃下，將粗品肝素鈉溶解于水中，加入氯化鈉，調(diào)節(jié)pH至10.0～10.5，攪拌3.5-4.0小時，然后升溫至80～85℃，調(diào)節(jié)pH至9.5～10.0，靜置10分鐘，迅速降溫至20℃以下，靜置4～5小時后過濾，取濾液；

優(yōu)選地，所述粗品肝素鈉的效價≥50IU/mg，其0.01%（g/mL）的溶液在波長為260nm時，光吸收值≤1.0；

優(yōu)選地，所述粗品肝素鈉的濃度為20%（g/mL）；

優(yōu)選地，所述氯化鈉的濃度為4-5%（g/mL）。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（1）中，所述胰酶與粗品肝素鈉的重量比為0.4-0.8%；

優(yōu)選地，所述氯化鈣的濃度為2%（g/mL）；

優(yōu)選地，所述碳酸鈉的濃度為2%（g/mL）。

4.根據(jù)權利要求1至3中任一項所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（2）中，所述纖維素酶與粗品肝素鈉的重量比為0.2-0.6%；

優(yōu)選地，所述氯化鈣的濃度為2%（g/mL）；

優(yōu)選地，所述碳酸鈉的濃度為2%（g/mL）。

5.根據(jù)權利要求1至4中任一項所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（3）中，向步驟（2）得到的上清液加入95%（體積比）的乙醇水溶液；

優(yōu)選地，所述步驟（2）得到的上清液與95%（體積比）的乙醇水溶液的體積比為10%。

6.根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（4）中，向步驟（3）得到的上清液加入95%（體積比）的乙醇水溶液。

7.根據(jù)權利要求1至6中任一項所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（5）中，所述濕沉淀的濃度為30～35%（g/mL）；

優(yōu)選地，所述次氯酸水溶液與濕沉淀水溶液的體積比為0.5-1.5%；

優(yōu)選地，所述氯化鈉的濃度為1.5%（g/mL）。

8.根據(jù)權利要求1至7中任一項所述的制備方法，其特征在于，在所述步驟（6）中，所述濕沉淀的濃度為30～35%（g/mL）；

優(yōu)選地，所述過氧化氫水溶液與濕沉淀水溶液的體積比為0.5-1.5%。