[發明專利]多臂聚乙二醇修飾劑的新用途及其在修飾門冬酰胺酶中的應用

有效

• 申請號: 201310745273.4
• 申請日: 2013-12-30
• 公開（公告）號: CN104046600B
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 馬永;王俊;吳鼎龍;邱晶;徐春林;陳晨;王耀方
• 申請（專利權）人: 江蘇眾紅生物工程創藥研究院有限公司;江蘇京森生物醫藥新材料科技有限公司
• 主分類號: C12N9/16
• 分類號: C12N9/16;C12N9/82;C12N9/06;A61K38/50;A61K47/60;A61P35/00;A61P35/02
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1.多臂PEG在修飾多亞基蛋白中的應用，其特征在于：所述的多臂PEG選自以下任意一種結構所示的PEG：

其中n選自1到2000整數值，k為1或2，m選自2～16之間的整數，p選自1～4之間的整數，多臂PEG的分子量在1～100kDa之間。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于所述的n選自2～500之間的整數值；所述的k為1,m為4，p為2；多臂PEG的分子量在1～40kDa之間。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于所述的n選自25～100之間的整數值；所述多臂PEG的分子量在5～10kDa之間。

4.根據權利要求2或3所述的應用，其特征在于所述的多臂PEG為醛基活化的或酯活化的多臂聚乙二醇衍生物；其中酯活化的聚乙二醇衍生物選自4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺乙酸酯、4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺丙酸酯、4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺碳酸酯中的任意一種；醛基活化的聚乙二醇衍生物選自4臂聚乙二醇丙醛、4臂聚乙二醇丁醛、4臂聚乙二醇乙醛、4臂聚乙二醇戊醛中的任意一種。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于所述的多臂PEG為4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺乙酸酯或4臂聚乙二醇丙醛。

6.根據權利要求1所述的應用，其特征在于所述的多亞基蛋白選自堿性磷酸酶、門冬酰胺酶或尿素酶中的任意一種。

7.一種利用多臂PEG修飾多亞基蛋白的方法，其特征在于包含以下步驟；

(1)需要修飾的蛋白和PEG修飾劑按比例混合后在緩沖液中進行修飾反應；

(2)修飾反應結束后用離子交換層析去除掉修飾產物中未與蛋白發生反應的PEG修飾劑；

(3)用凝膠過濾層析對修飾產物進行純化，收集目的修飾產物；

其中所述的PEG修飾劑選自以下任意一種結構所示的PEG：

其中n選自1到2000整數值，k為1或2，m選自2～16之間的整數，p選自1～4之間的整數，多臂PEG的分子量在1～100kDa之間。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于所述的n選自2～500之間的整數值；所述的k為1,m為4，p為2；多臂PEG的分子量在1～40kDa之間。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于所述的n選自25～100之間的整數值；所述多臂PEG的分子量在5～10kDa之間。

10.根據權利要求8所述的方法，其特征在于所述的多臂PEG為醛基活化的或酯活化的多臂聚乙二醇衍生物；其中酯活化的聚乙二醇衍生物選自4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺乙酸酯、4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺丙酸酯、4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺碳酸酯中的任意一種；醛基活化的聚乙二醇衍生物選自4臂聚乙二醇丙醛、4臂聚乙二醇丁醛、4臂聚乙二醇乙醛、4臂聚乙二醇戊醛中的任意一種。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于所述的多臂PEG為4臂聚乙二醇琥珀酰亞胺乙酸酯或4臂聚乙二醇丙醛。

12.根據權利要求7所述的方法，其特征在于所述的多亞基蛋白選自堿性磷酸酶、門冬酰胺酶或尿素酶中的任意一種。

13.多臂PEG修飾的多亞基蛋白，其特征在于所述的多臂PEG修飾的多亞基蛋白按照權利要求7～12中任一項所述的方法獲得。

14.根據權利要求13所述的多臂PEG修飾的多亞基蛋白，其特征在于所述的多臂PEG修飾的多亞基蛋白為多臂PEG修飾的門冬酰胺酶。

15.一種藥物組合物，其特征在于所述藥物組合物含有如權利要求14所述的多臂PEG修飾的多亞基蛋白和藥學上可接受的輔料。