[發明專利]果糖氨基酸氧化酶、制備方法及含該酶的糖化白蛋白檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201310744635.8
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103695380A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 鄒炳德;鄒繼華;汪屹;賈江花
• 申請（專利權）人: 寧波美康生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N9/06
• 分類號: C12N9/06;C12N15/53;C12Q1/37;C12Q1/28;C12Q1/26;C12R1/685;C12R1/68;C12R1/66;C12R1/645
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專利代理事務所(普通合伙) 33228
• 代理人: 代忠炯

1.一種果糖氨基酸氧化酶，其特征在于，具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶中，其選自以下（a）至（f）中的氨基酸對應的位置上具有1個或更多的氨基酸殘基進行取代，所得的果糖氨基酸氧化酶；與取代前的具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶相比較，具有更高的熱穩定性：

（a）59位的谷氨酸，

（b）98位的谷氨酸，

（c）225位的甘氨酸，

（d）277位的賴氨酸，

（e）285位的谷氨酸，

（f）355位的天冬氨酸。

2.一種果糖氨基酸氧化酶，其特征在于，具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶中，其選自以下（g）至（l）中的氨基酸對應的位置被取代為以下（g）至（l）中記載的取代后的氨酸酸殘基，所得的果糖氨基酸氧化酶；與與取代前的具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶相比較，具有更高的熱穩定性：

（g）59位的谷氨酸被取代為L、I、V、F、M、W、T、C、N、Y、D或H；

（h）98位的谷氨酸酸被取代為A、L、I、V、P、F、S、T、C、N、Y、D或H；

（i）225位的甘氨酸被取代為A、L、F、M、W、S、N或D；

（j）277位的賴氨酸被取代為A、L、I、F、S、T、N、Y、R或H；

（k）285位的谷氨酸被取代為A、L、I、F、M、W、Q或N；

（l）355位的天冬氨酸被取代為L、I、V、F、M、W、T、C、Y、R或H。

3.一種果糖氨基酸氧化酶，其特征在于，具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶中，其選自以下（m）至（v）中的氨基酸被取代為以下（m）至（v）中記載的取代后的氨酸酸殘基，所得的果糖氨基酸氧化酶；與取代前的具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶相比較，具有更高的熱穩定性：

（m）59E→F，98E→C；

（n）59E→F，225G→D；

（o）59E→F，277K→N；

（p）59E→F，285E→F；

（q）98E→P，225G→N；

（r）98E→P，277K→S；

（s）225G→L，277K→A；

（t）225G→L，285E→I；

（u）277K→Y，355D→T；

（v）285E→I，355D→W。

4.一種果糖氨基酸氧化酶，其特征在于，具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶中，其選自以下（w）至（aa）中的氨基酸被取代為以下（w）至（aa）中記載的取代后的氨酸酸殘基，所得的果糖氨基酸氧化酶；與取代前的具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶相比較，具有更高的熱穩定性：

（w）59E→F，98E→C，225G→F

（x）59E→F，225G→D，277K→N

（y）59E→F，277K→N，285E→I

（z）98E→P，225G→N，285E→Q

（aa）225G→L，285E→I，355D→T。

5.一種果糖氨基酸氧化酶，其特征在于，具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶中，其選自以下（ab）至（ac）中的氨基酸被取代為以下（ab）至（ac）中記載的取代后的氨酸酸殘基，所得的果糖氨基酸氧化酶；與取代前的具有SEQID.No.1所示的氨基酸序列或與該氨基酸序列有80%以上同源性的果糖氨基酸氧化酶相比較，具有更高的熱穩定性：

（ab）59E→F，98E→C，225G→F，277K→N；

（ac）59E→F，225G→D，277K→N，285E→F。