[發明專利]基于微流控芯片的細胞受創后細胞遷移生物學行為的監控方法

有效

• 申請號: 201310743953.2
• 申請日: 2013-12-30
• 公開（公告）號: CN103667057A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 聶富強;吳圓麗
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘇州納米技術與納米仿生研究所
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/34;C12Q1/02
• 代理公司: 南京利豐知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 王鋒

1.一種研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所述微流控芯片包括基材以及形成于所述基材內的溝道，所述溝道包括培養主通道，該培養主通道的一端設有至少兩個進樣口，另一端連通一出樣口。

2.根據權利要求1所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所述培養主通道于水平面內延伸，所述進樣口沿豎直方向延伸。

3.根據權利要求1或2所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所述出樣口沿豎直方向延伸。

4.根據權利要求1或2所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所述每個進樣口和培養主通道之間還連通有一緩沖通道，所述緩沖通道與所述培養主通道位于同一水平面內。

5.根據權利要求4所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所有的所述緩沖通道具有相同的口徑。

6.根據權利要求4所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所述基材包括上下層疊設置的第一基材和第二基材，所述培養主通道和緩沖通道開設于所述第二基材的上表面，所述進樣口和出樣口貫穿所述第一基材或第二基材的上下表面。

7.根據權利要求1所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片，其特征在于：所述培養主通道的一端設有三個進樣口。

8.權利要求7所述的研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片的制作方法，其特征在于，包括：

S1、通過微加工技術在第二基材的上表面制作培養主通道和緩沖通道；

S2、在第一基材或第二基材上制作進樣口和出樣口；

S3、將第一基材和第二基材上下對齊進行封合，獲得研究細胞受創后細胞遷移生物學行為的微流控芯片。

9.一種基于微流控芯片的細胞受創后細胞遷移生物學行為的監控方法，其特征在于，包括：

a）提供權利要求1所述的微流控芯片，從進樣口加入細胞溶液并控制細胞溶液的流速，將細胞緩慢地植入培養主通道中，然后進行細胞培養，在培養主通道的內壁上形成細胞層；

b）在其中一進樣口加入胰蛋白酶，同時在其相鄰的進樣口中加入細胞保護試劑，通過胰蛋白酶對細胞的消化作用，細胞層在胰蛋白酶和細胞保護試劑的接合處形成細胞傷口；

c）細胞傷口形成穩定后，在顯微鏡下觀察細胞遷移的生物學行為。

10.根據權利要求9所述的基于微流控芯片的細胞受創后細胞遷移生物學行為的監控方法，其特征在于：所述培養主通道于水平面內延伸，所述進樣口沿豎直方向延伸，所述出樣口沿豎直方向延伸，所述步驟a）中?，通過控制進樣口和出樣口細胞溶液的液差高度，進而控制細胞溶液的流速。

11.根據權利要求9所述的基于微流控芯片的細胞受創后細胞遷移生物學行為的監控方法，其特征在于：所述培養主通道于水平面內延伸，所述進樣口沿豎直方向延伸，所述出樣口沿豎直方向延伸，所述步驟b）中?，通過控制進樣口和出樣口的液差高度，進而控制胰蛋白酶和細胞保護試劑的流速。

12.根據權利要求9所述的基于微流控芯片的細胞受創后細胞遷移生物學行為的監控方法，其特征在于：所述細胞保護試劑為PBS緩沖液。

13.根據權利要求9所述的基于微流控芯片的細胞受創后細胞遷移生物學行為的監控方法，其特征在于：所述培養主通道的一端設有三個進樣口，所述步驟b）中，位于中間的進樣口加入細胞保護試劑，位于其兩側的進樣口均加入胰蛋白酶。