[發明專利]一種鼠李糖乳桿菌的胞外多糖及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201310743058.0
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103724446A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 吳正鈞;韓瑨;郭本恒;邵麗;杭鋒;劉振民
• 申請（專利權）人: 光明乳業股份有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12P19/04;C12R1/225
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;沈利

技術領域

本發明涉及一種鼠李糖乳桿菌（Lactobacillus?rhamnosus）的胞外多糖及其制備方法和應用。

背景技術

乳酸菌（Lactic?acid?bacteria）是一類能利用可發酵性糖產生大量乳酸的細菌總稱，目前在自然界已發現的這類細菌在分類學上至少有23個屬。在食品、醫藥等領域應用較多的乳酸菌主要有乳桿菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬、乳球菌屬、片球菌屬和明串珠菌屬等。乳酸菌是益生菌最主要的來源，許多乳酸菌是人體腸道固有的益生菌，具有改善人體腸道菌群，調節機體免疫力，抑腫瘤，降低血清膽固醇，調節血壓等重要的生理活性。

乳酸菌發揮主要功能特性的作用機理，除了定殖、通過主要代謝產物（乳酸等）改善腸道內環境等以外，一些次生代謝產物如細菌素、胞外多糖等也發揮著非常重要的作用。其中，具有理論和實際應用價值的乳酸菌胞外多糖引起了國內外許多學者的研究興趣。

乳酸菌胞外多糖是乳酸菌產生并分泌到細胞外的一種多糖。乳酸菌胞外多糖具有重要的工藝學功能，對酸乳、干酪及絕大多數發酵乳制品的流變性質、質構、口感以及風味具有重要的影響。乳酸菌胞外多糖可以改善乳制品的流變學特性和質構特性。由于天然增稠作用，由產粘乳桿菌與非產粘球菌混合發酵形成的酸乳與非產粘菌株形成的酸乳相比口感滑潤、粘度增加；產胞外多糖乳酸菌能夠賦予酸乳更強的持水力，從而避免乳清析出；此外，由胞外多糖而產生的持水性增強有助于提高干酪等產品的得率。乳酸菌胞外多糖還具有良好的生理功能，如增強黏膜吸附作用、抗腫瘤、抗潰瘍、免疫調節、降膽固醇、降血壓，還可以作為益生元促進腸道內其他益生菌的生長，優化腸道微生態環境等。因此，開展產胞外多糖乳酸菌的研究，對于改善乳制品生產加工、開發具有特定功能性質的乳酸菌發酵乳制品，具有十分重要的研究意義和經濟價值。開發具有益生功能的乳酸菌胞外多糖成為目前研究的熱點。

20世紀60年代以來，多糖被認為是一種廣譜的非特異性的免疫促進劑，可增強宿主細胞的細胞免疫和體液免疫功能，如激活巨噬細胞、T細胞、B細胞和NK細胞等，激活補體及誘導產生干擾素等，其作用將是激活人體的非特異性防御機能，在抗病毒、抗腫瘤、抗輻射等方面有很好的療效。

然而，目前在本領域內，研究成熟的并且能夠在實踐中推廣應用的乳酸菌胞外多糖的種類并不多，生產和科研上都存在對新的胞外多糖進行研究的需要，以豐富性能優良、用途廣泛的乳酸菌胞外多糖的種類。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對目前乳酸菌胞外多糖種類和產品功能不夠豐富的現狀，而提供一種新的乳酸菌胞外多糖，具體為一種鼠李糖乳桿菌的胞外多糖，本發明還提供所述胞外多糖的制備方法和應用。本發明的胞外多糖被證明具有良好的有絲分裂原活性和免疫調節活性。

本發明所述的鼠李糖乳桿菌的胞外多糖最初發現由保藏編號為CGMCC?No.6430的鼠李糖乳桿菌所產生。所述的保藏編號為CGMCC?No.6430的鼠李糖乳桿菌篩選自健康成年人的糞便，在發酵乳中能夠產生胞外多糖。本發明人在研究中發現該菌株具有良好的耐酸耐膽鹽性能，推測其具有潛在的益生功能，并且體外細胞實驗發現其粗多糖可以提高小鼠T/B淋巴細胞的活性，推測其具有潛在的提高機體免疫力的功能。為了更好地了解其結構和功能，對其粗多糖進行分離純化及其功能研究。該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC）保藏，其保藏編號為CGMCC?No.6430。在此基礎上，本發明提供下述技術方案。

本發明提供的技術方案之一是：一種鼠李糖乳桿菌的胞外多糖，所述胞外多糖由質量分數比為45.13～47.80%的葡萄糖、35.26～36.17%的鼠李糖和16.94～18.70%的半乳糖組成，該胞外多糖的平均重量分子量為980,543～1,470,237道爾頓。

本發明中，所述的胞外多糖可以由保藏號為CGMCC?NO.6430的鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)菌株產生，但不限于此，也可以由其它的可以產胞外多糖的菌株產生。較佳地，所述的胞外多糖由前述保藏號為CGMCC?NO.6430的鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)菌株所產生。

本發明提供的技術方案之二是：前述鼠李糖乳桿菌的胞外多糖的制備方法。

本發明中，所述的制備方法可以是將所述的鼠李糖乳桿菌按照現有技術內常規的培養方法培養得到發酵液，然后將發酵液采用常規的多糖分離方法分離得到胞外多糖。

較佳地，所述的制備方法包括如下步驟：