[發明專利]多花型兜蘭試管苗培育方法

有效

• 申請號: 201310742625.0
• 申請日: 2013-12-30
• 公開（公告）號: CN103704139A
• 公開（公告）日: 2014-04-09
• 發明（設計）人: 鄭勇平;王春;陳任文展;張慕歡
• 申請（專利權）人: 浙江森禾種業股份有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

1.?多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于包括以下步驟：

1)????果莢獲?。洪_花時選取生長健壯的兜蘭母株進行人工雜交授粉，授粉后110-120天收取成熟果莢作為外植體，用于播種；

2)????無菌播種：果莢消毒后，切開果莢，將粉末狀的成熟種子均勻撒在播種培養基上；所述的播種培養基為由MS培養基+魚肉蛋白胨2-4g/L+活性炭0.5-1?g/L+蘋果粉碎物100-150ml/L組成，播種培養基的PH5.4—5.6，先進行暗培養30-35d，然后改為光照培養，待萌發的種子大多數轉綠后進行增殖繼代培養；

3)????增殖繼代培養：將正常萌發轉綠的原球莖轉接到繼代培養基上；所述的繼代培養基由MS培養基+魚肉蛋白胨3-4g/L+活性炭0.3-0.8?g/L+3-7g/L椰汁組成，所述繼代培養基PH5.5—5.7，約2-3個月后形成帶短根的叢生植株苗，及時將植株轉接，進入生根壯苗培養；

4)????生根壯苗培養：及時將繼代培養生成的帶短根的叢生植株苗分開，從根莖連接處切掉根，接種到壯苗生根培養基中培養；所述的壯苗生根培養基由花寶一號1.5g/L+花寶二號1.5g/L+活性炭1-2g/L+馬鈴薯粉碎物200-300ml/L+香蕉40-50g/L組成，壯苗生根培養基PH5.5-5.6；

?5)試管苗移栽：生根壯苗培養80-90天，植株3-5厘米高，根長2-3厘米，轉移到自然光煉苗15-18天，洗凈根部培養基，移栽至基質中。

2.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟1)??????中：所述的兜蘭母株為國王、麥克或淑女多花型兜蘭品種。

3.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟2)??????中：果莢外植體用75%酒精浸泡30-35秒后，用0.1%升汞消毒15-20分鐘，期間不斷搖動以使果莢外植體充分接觸升汞溶液，再用無菌水沖洗4-5次，在超凈工作臺上切開果莢，將粉末狀的成熟種子均勻撒在播種培養基上。

4.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟2)??????中：所述的播種培養基為由MS培養基+魚肉蛋白胨3g/L+活性炭0.6-0.8?g/L+蘋果粉碎物120-130ml/L組成。

5.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟2)??????中：光照強度150-250Lx，光照時間9-11h/d；一周后光照強度增加到400-600Lx，光照時間10-11h/d。

6.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟2)??????中：所述的蘋果粉碎物采用以下方法制備：將蘋果去皮去心后，切成小塊，稱取100g，加入1L水中，放入攪拌機攪拌2-3min，備用。

7.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟3)??????中：所述的繼代培養基由MS培養基+魚肉蛋白胨3.5g/L+活性炭0.4-0.5?g/L+4-6g/L椰汁組成；光照強度800Lx—1000Lx，光照時間12-13h/d。

8.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟4)??????中：所述的壯苗生根培養基由花寶一號1.5g/L?+花寶二號1.5g/L+活性炭1.5g/L+馬鈴薯粉碎物250ml/L+香蕉45g/L組成；光照強度1500Lx—2000Lx，光照時間11-12h/d。

9.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟4)??????中：所述的馬鈴薯粉碎物采用以下方法制備：將馬鈴薯去皮后，切成小塊，稱取100g，放入1L水中，煮沸后再繼續煮10-15min，然后放入攪拌機攪拌2-3min，備用。

10.?如權利要求1所述的多花型兜蘭試管苗培育方法，其特征在于步驟5)中：所述基質為為體積比1:1泥炭：樹皮混合物，基質采用1000-1200倍多菌靈消毒，將煉苗區與其他區域隔離，溫度控制在24-26℃，濕度為50%-70%，并保持適當通風。