[發明專利]一種含有β?葡聚糖酶的生長豬專用酶及其制備方法

有效

• 申請號: 201310738210.6
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103805582B
• 公開（公告）日: 2017-02-01
• 發明（設計）人: 李洪兵;張錦杰;李貴駿;朱永明;易繼云
• 申請（專利權）人: 湖南鴻鷹生物科技有限公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N9/88;C12N9/26;C12N9/50;A23K20/189;C12R1/10
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1.一種含有β-葡聚糖酶的生長豬專用酶，由以下重量份數的組分組成：中草藥粉劑0.5-2份，木聚糖酶80-10份，蛋白酶20-40份，果膠酶10-20份，纖維素酶10-15份，β-葡聚糖酶15-25份，中溫α-淀粉酶10-15份；

所述β-葡聚糖酶由地衣芽孢桿菌（Βacillus?licheniformis）β-10-25經生物發酵制得，所述菌株保藏編號為CCTCC?NO:M2013538。

2.如權利要求1所述一種含有β-葡聚糖酶的生長豬專用酶，其特征在于，所述中草藥粉劑的制備方法如下：

稱取黃芪20-30份；黨參10-18份；柴胡10-15份；麥冬10-15份；分別將上述中草藥粉碎至粒徑為2毫米以下，然后于容器中均勻混合并添加3-6倍重量的水，控制溫度70℃～90℃保持2～4h，然后降溫至45-60℃，加入混合酶制劑進行酶解，用乳酸調節pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最后添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，110W功率下超聲萃取0.5～1.5h，過濾；濾液真空濃縮后冷凍干燥獲得中草藥粉劑。

3.如權利要求2所述的一種含有β-葡聚糖酶的生長豬專用酶，其特征在于，所述混合酶制劑組成如下：β-葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，普魯蘭酶20-30份，β-淀粉酶10-15份，果膠酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，木瓜蛋白酶5-10份，葡萄糖氧化酶5-10份，酸性磷酸酶5-10份。

4.如權利要求1所述一種含有β-葡聚糖酶的生長豬專用酶，其特征在于，β-葡聚糖酶的制備方法，包括如下步驟：

地衣芽孢桿菌β-10-25經斜面菌種活化培養后進行一、二、三級液體種子和種子罐培養；將一級種子罐發酵液以3%接種量接入含有3L發酵培養基的發酵罐中，培養溫度35-45℃，攪拌速度200-300r/min，通風量（V/V）1:1-3,培養時間10-15h；然后將1L經過121℃滅菌20min，溫度為10℃的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35-45℃時恒溫培養15-20h；此時，將一級種子罐發酵液以2%接種量追加接入發酵罐，恒溫培養10-15h；繼續將1L經過121℃滅菌20min，溫度為10℃的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35-45℃時恒溫培養10-15h；

發酵液經過濾、濃縮、精濾、干燥得β-葡聚糖酶。

5.如權利要求4所述的一種含有β-葡聚糖酶的生長豬專用酶，其特征在于，所述種子培養的培養基為：酵母粉0.5％，蛋白胨1％，可溶性淀粉1％，NaCl1％，pH4.5-7.0；

所述發酵培養基組成為：麥麩75g，玉米粉55g，米糠25g，豆餅粉20g，β-葡聚糖2g，中草藥劑粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米漿3g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀2g，磷酸二氫鉀2g，檸檬酸鈉3g，消泡劑0.5g,純凈水l000mL，pH值4.5-7.0；

所述發酵培養基的調配方法為：按比例準確稱取原料，將原料中的純凈水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調節PH值3-7，加入中溫淀粉酶（3u/g玉米粉）與高溫淀粉酶（30u/g玉米粉），同時邊攪拌邊升溫至70℃保溫15-30min，然后緩慢升溫至90℃保溫15-30min進行液化，最后加入其它原料，攪拌均勻，pH3-7，121-123℃滅菌30-40min備用。