[發明專利]從泥炭中制備靶向性前藥的方法、靶向性前藥及應用

有效

• 申請號: 201310738174.3
• 申請日: 2013-12-27
• 公開（公告）號: CN103690970A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發明（設計）人: 呂偉東;楊俊佳;劉強;周霞萍
• 申請（專利權）人: 云南聯合藥業有限責任公司;華東理工大學
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61P35/00;A61P35/02;A61P19/02;A61P31/12;A61P31/22;C12P1/04;C12P1/00;C12P1/02
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 余化鵬

1.一種從泥炭中制備靶向性前藥的方法，其特征在于，其包括下述步驟：

（1）制備生物活性組分和印跡分子；制備生物活性組分的方法包括：在有氧條件下，將泥炭與橘青霉菌及其β-內酰胺酶混合，和/或與放線菌及其乙酰膽堿酶混合，所述泥炭在所述β-內酰胺酶和/或所述乙酰膽堿酶的作用下，于5-75℃發生酶解反應和發酵反應，得含有生物活性組分的反應液a，所述酶解反應和發酵反應的時間為5-70小時；所述的放線菌為灰色鏈絲菌（Streptomyces?griseus）、金色鏈絲菌（Streptomyces?auraofaciens）和刺孢小單孢菌（Micromonospora?echinospora）中的一種或多種；

制備印跡分子的方法包括：在無氧條件下，將泥炭和枝鏈霉菌及其聚磷酸酯酶和木聚糖酶，和/或酵母菌及其淀粉酶混合，所述泥炭在所述枝鏈霉菌和/或所述酵母菌的作用下，于5-50℃發生酶解反應和發酵反應，得含有印跡分子的反應液b，所述酶解反應和發酵反應的時間為5-50小時；

制備生物活性組分和制備印跡分子時所使用的泥炭的質量比為（1-5）：（2-10）；

（2）將反應液a與反應液b混合，使反應液a中的生物活性組分和反應液b中的印跡分子進行偶聯反應，偶聯反應結束后對產物進行提純，即得靶向性前藥。

2.如權利要求1所述的從泥炭中制備靶向性前藥的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述的泥炭包含纖維素2.1-7.5%、木質素7.5-10.5%、腐植酸35.0-45.5%、灰分20.10-23.81%和水分11.39-15.89%，所述的百分比為各成分相對于干燥無灰基的質量百分比；所述的泥炭為礦物源泥炭，較佳地為石屏泥炭；所述的酶解反應的酶解模型為：式中的E代表酶，S代表底物，ES代表中間產物，P代表最終產物。

3.如權利要求1所述的從泥炭中制備靶向性前藥的方法，其特征在于，步驟（1）中，在制備生物活性組分時，所述橘青霉菌和/或所述放線菌以含有所述橘青霉菌和/或所述放線菌的培養基的形式加入；所述的培養基較佳地包括紅糖水和胡蘿卜汁；所述的紅糖水與胡蘿卜汁的質量比較佳地為（5-30）：（1-5），所述的紅糖水的質量百分濃度為5%；所述的胡蘿卜汁的質量百分濃度為5%；所述的培養基中，所述橘青霉菌和/或所述放線菌的活菌數較佳地為（1-9）×10⁷cfu/mL；

當所述的培養基中同時含有橘青霉菌和放線菌時，所述的橘青霉菌和所述的放線菌的活菌數的比例較佳地為（1-6.5）：（0.1-3.5）；所述的β-內酰胺酶和所述的乙酰膽堿酶的質量比較佳地為（6-15）：（1-3）。

4.如權利要求2或3所述的從泥炭中制備靶向性前藥的方法，其特征在于，在制備生物活性組分和印跡分子時，所述的泥炭以泥炭懸浮液的形式加入；所述的泥炭懸浮液中泥炭與水的質量比較佳地為（0.05-20）：（0.5-5）；所述的泥炭懸浮液中的培養基較佳地包括紅糖水、硫酸鉀和胡蘿卜汁；所述的紅糖水的質量百分濃度較佳地為5%；所述的胡蘿卜汁的質量百分濃度較佳地為5%；紅糖水、硫酸鉀和胡蘿卜汁的質量比較佳地為（0.05-1.5）：0.01：3；

含有所述橘青霉菌和/或所述放線菌的培養基與所述泥炭懸浮液的質量比為（0.1：15）-（0.7：1），較佳地為（0.1：10）-（0.5：1）；

在制備生物活性組分時，所述酶解反應和所述發酵反應的溫度為25-70℃；所述酶解反應和發酵反應的時間為10-50小時；所述的有氧條件為通空氣實現有氧條件；所述生物活性組分的濃度為1-100g/L反應液a。