[發明專利]一種丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR檢測試劑盒在審
| 申請號: | 201310737128.1 | 申請日: | 2013-12-27 |
| 公開(公告)號: | CN104745721A | 公開(公告)日: | 2015-07-01 |
| 發明(設計)人: | 遲大利;吳大治;夏懿 | 申請(專利權)人: | 上海星耀醫學科技發展有限公司;上海復星醫藥(集團)股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 無 | 代理人: | 無 |
| 地址: | 201315 上海*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 肝炎 病毒 一步法 核酸 定量 基因 rt pcr 檢測 試劑盒 | ||
1.一種丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR檢測試劑盒,其特征在于:本發明通過考察丙型肝炎病毒基因組全序列,并對檢索所得HCV各個基因型一致性保守序列及不同基因型間差異性保守序列,根據該保守序列設計出一對HCV特異性定量引物、一條HCV特異性熒光探針、一對HCV特異性分型引物、一條HCV1型特異性熒光探針、一條HCV2型特異性熒光探針和一條內參探針,采用實時熒光定量PCR方法擴增目的基因。?
2.權利要求1所述的丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR檢測試劑盒,其特征在于:丙型肝炎病毒HCV?RNA特異性定量序列及1型、2型HCV?RNA特異性PCR擴增的基因序列和內參基因序列分別為:?
〈SEO?ID?No.1〉?
5’-GACGTCTACATTGGCCATGGCGTTCAGTATGAGTGTCTCCAGGGACGGGAGAGTCCTTCCATTGATGTGCAAGCCGGCTTAAAGGCCCTCACCACAATAATATCCTCAGTACACAGTGGTCTGTCGGAGCAACACCG-3’,?
〈SEQ?ID?No.2〉?
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACAATAATATCAGTAGCAACCCTCTATTGAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’,?
〈SEQ?ID?No.3〉?
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACATTAATATCARTAGCAACCCTCTGGTGAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’,?
〈SEQ?ID?No.4〉?
5’-CATTGCTTCCATTGATGGCTTAAAGGACACCACCAATTGGTTCCTCTCTGTGCACAGGCTAATTTTTTAGGGAAAATCTGGCCTTCCCACAAGGGGAGGCCAGGGAATTTTCTTCACGTGCGCTGCYGAAGATCAAA-3’,?
丙型肝炎病毒一步法核酸定量/基因分型RT-PCR檢測試劑盒中核酸定量擴增基因序列全長137bp,屬HCV5’-UTR非轉錄區;基因分型擴增基因序列全長137bp,屬HCVNS5A結構基因區,均為單拷貝序列。內參基因序列全長137bp,僅與基因分型擴增基因中的探針序列有所不同。?
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