[發明專利]采用UPLC-MS檢測保健品中孔雀石綠殘留的方法

在審

• 申請號: 201310733708.3
• 申請日: 2013-12-23
• 公開（公告）號: CN104730157A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發明（設計）人: 李星芝;王俊全;陳緒卓
• 申請（專利權）人: 天津優標技術檢測服務有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

技術領域

本發明涉及一種采用UPLC-MS檢測保健品中孔雀石綠殘留的方法

背景技術

孔雀石綠作為染料，原來被用作治理魚類或魚卵的寄生蟲、真菌或細菌感染；孔雀石綠中的化學功能團三苯甲烷可致癌，很多國家已經禁用，但仍有漁民在防治魚類感染真菌時使用；2002年5月中國農業部已將孔雀石綠列入《食品動物禁用的獸藥及其化合物清單》，是重要的食品安全質量項目。

開發孔雀石綠及其代謝物的檢測能夠節約經費、提升效益,目前尚無超高效液相質譜聯用儀檢測孔雀石綠殘留方法的報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種重現性好，準確率高，試劑消耗量小分析周期短的，采用UPLC-MS檢測保健品中孔雀石綠殘留的方法。

本發明的技術方案概述如下：

采用UPLC-MS檢測保健品中孔雀石綠殘留的方法，包括如下步驟：

（1）提取:精密稱取5.00g保健品樣品于50mL第一離心管中，加入200μL濃度為1ug/ml的氘代孔雀石綠-D5乙腈溶液為內標標準溶液，加入9-11mL乙腈，超聲波振蕩提取1.5-3min，7500-8500r/min勻漿提取20-40s，3500-4500r/min離心4-6min，上清液轉移至25mL比色管中；另取50mL第二離心管加入9-11mL乙腈，洗滌勻漿刀頭10s，洗滌液移入第一離心管中，用玻棒搗碎第一離心管中的沉淀，漩渦混勻器上振蕩20-40s，超聲波振蕩4-6min，3500-4500r/min離心4-6min，上清液合并至25mL比色管中，用乙腈定容至25mL，搖勻備用；

（2）凈化:移取5.00mL步驟（1）獲得的溶液加至已活化的中性氧化鋁柱上，用濃縮瓶接收流出液，用4mL乙腈洗滌中性氧化鋁柱，收集全部流出液，40-50℃旋轉蒸發至小于1mL的殘液，殘液用乙腈定容至1mL，超聲振蕩4-6min,加入1.0mL5mmol/L乙酸銨水溶液，超聲振蕩1min，經0.2μm濾膜過濾；

（3）測定：取步驟（2）獲得的濾液進行UPLC-MS測定，

分別吸取1μL濃度為1ug/ml的孔雀石綠乙腈標準溶液、1μL濃度為1ug/ml的氘代孔雀石綠-D5的乙腈標準溶液，在以下色譜條件下進行分析，獲得色譜圖；

UPLC條件為：

a）色譜柱：AcquityBEHC18柱，50mm×2.1mm，粒度1.8μm；

b）流動相：A-乙腈；B-5mmol/L乙酸銨水溶液；