[發(fā)明專(zhuān)利]一種miRNA及在制備后發(fā)性白內(nèi)障診療制品中的應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310730782.X
• 申請(qǐng)日: 2013-12-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103773764A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃鈺森;王曄;趙曉雯
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東省眼科研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/113
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/113;A61K48/00;A61P27/12
• 代理公司: 青島海昊知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國(guó)

本發(fā)明要求申請(qǐng)日為2012年12月27日，申請(qǐng)?zhí)枮?01210579895x，發(fā)明名稱(chēng)為：用于白內(nèi)障相關(guān)miRNA的篩選的發(fā)明申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因診斷與治療的相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及miR-204-5p在制備檢測(cè)后發(fā)性白內(nèi)障診療制品中的應(yīng)用。

發(fā)明背景

后發(fā)性白內(nèi)障（PCO）又稱(chēng)后囊膜混濁，是指白內(nèi)障囊外摘除術(shù)后，或外傷性白內(nèi)障部分皮質(zhì)吸收后所形成的晶狀體后囊膜混濁。它是白內(nèi)障摘除術(shù)后最常見(jiàn)的并發(fā)癥，在成人，術(shù)后發(fā)生率為30％～50％，在兒童則為100％。隨著白內(nèi)障超聲乳化術(shù)的開(kāi)展，后發(fā)性白內(nèi)障已成為影響白內(nèi)障術(shù)后視力恢復(fù)的主要因素。白內(nèi)障術(shù)后的創(chuàng)傷修復(fù)、殘留的晶狀體上皮細(xì)胞(1ens?epithelial?cells，LECs)增生、遷移、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal?transition，EMT)、膠原沉積、殘留LECs的晶狀體纖維再生是白內(nèi)障術(shù)后形成后發(fā)障的主要原因。目前針對(duì)后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)病機(jī)理的研究較多，但在臨床和藥物干預(yù)方面仍缺乏安全、有效的手段減少PCO的發(fā)生。PCO一旦發(fā)生，通常采用Nd：YAG激光后囊膜切開(kāi)術(shù)治療，不僅費(fèi)用昂貴，而且有視網(wǎng)膜脫離、黃斑水腫、虹膜出血等并發(fā)癥的發(fā)生。藥物治療方面，目前眼內(nèi)植入藥物緩釋裝置是防治后發(fā)性白內(nèi)障較為理想的給藥方式，但是藥物緩釋裝置中，藥物濃度效應(yīng)控制、作用范圍、靶向性依然有待提高。已有研究表明，TGF-B可誘導(dǎo)a-平滑肌肌動(dòng)蛋白(a-smooth?muscle?actin，a-SMA)、波形蛋白（Vimentin）、上皮型E-鈣粘蛋白(E-Cadherin)等與EMT相關(guān)目的基因的表達(dá)，誘導(dǎo)LECs發(fā)生EMT。而TGFβ／Smads信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)在角膜的形成發(fā)育、角膜和晶狀體創(chuàng)傷后的修復(fù)、后發(fā)性白內(nèi)障中均起著至關(guān)重要的作用。通過(guò)調(diào)節(jié)Smad蛋白可以影響眼部組織的創(chuàng)傷愈合和纖維化程度。因此阻斷TGF-β／Smads信號(hào)通路可能成為PCO新的治療方法。這就需要獲得能夠調(diào)節(jié)Smad蛋白的有效的miRNAs。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種miRNA及在制備后發(fā)性白內(nèi)障診療制品中的應(yīng)用，所述的miRNA為miR-204-5p，從而彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。

申請(qǐng)人通過(guò)對(duì)后發(fā)性白內(nèi)障的囊膜芯片進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)miR-204-5p的表達(dá)量顯著下調(diào)，且miR-204-5p參與后發(fā)性白內(nèi)障PCO病程中靶基因SMAD4的調(diào)節(jié)，從而促成了本發(fā)明。

本發(fā)明的miRNA，為has-miR-204-5p，其核酸序列為SEQ?ID?NO:1；

本發(fā)明的miRNA，能夠調(diào)節(jié)Smad基因的表達(dá)；

本發(fā)明還提供miR-204-5p或其模擬物（miR-204-5p?mimic）的新的用途，是用于制備后發(fā)性白內(nèi)障PCO的診療制品；

所述的制品為藥物，該藥物包含有藥理有效含量的has-miR-204-5p或其模擬物。

本發(fā)明提供了一種能用于治療后發(fā)性白內(nèi)障的miRNA。has-miR-204-5p能夠調(diào)節(jié)Smad的表達(dá)，通過(guò)阻斷TGF-β／Smads信號(hào)通路，影響白內(nèi)障術(shù)后的創(chuàng)傷修復(fù)、抑制上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal?transition，EMT)和殘留LECs的晶狀體纖維再生等，可能成為治療PCO的新方法，具有制備用于后發(fā)性白內(nèi)障PCO診療制品的潛力。

附圖說(shuō)明

圖1：qRT-PCR分析正常人和后發(fā)性白內(nèi)障患者LECs?miR-31，miR-182，miR-204-5p的相對(duì)表達(dá)量的變化圖；顯示后發(fā)性白內(nèi)障患者(PCO)LECs中miR-31，miR-182，miR-204-5p的表達(dá)顯著下調(diào)(P<0.05)；