[發明專利]一種ε-聚賴氨酸水凝膠及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201310728964.3
• 申請日: 2013-12-25
• 公開（公告）號: CN103755965A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 徐虹;遲波;王瑞;馮小海;李莎;梁金豐;歐陽平凱
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: C08G81/00
• 分類號: C08G81/00;C08G69/48;C08J3/075;A61L15/26;A61L15/42
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

1.一種ε-聚賴氨酸水凝膠，其具有如下結構單元：

其中，n取值為20～30中的任意自然數，m取值為50～70中的任意自然數。

2.權利要求1所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，它包括如下步驟：

(1)將聚乙二醇溶解在二氯甲烷中，再加入4-二甲氨基吡啶和三乙胺室溫下反應20～150min，反應結束后在室溫、惰性氣體保護條件下將反應液滴加到對硝基苯基氯甲酸酯的二氯甲烷溶液中，滴加完畢后在室溫、惰性氣體保護條件下反應12～72h，反應結束后，先將反應液旋蒸再滴加到冷乙醚中，過濾后取沉淀再真空冷凍干燥得到對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-對硝基苯基氯甲酸酯共聚物；

(2)將步驟(1)得到的對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-對硝基苯基氯甲酸酯共聚物溶解在磷酸緩沖液中，然后加入溶有酪胺的磷酸緩沖液，室溫下反應5～15h得到對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-酪胺共聚物溶液；

(3)將ε-聚賴氨酸溶解在磷酸緩沖液中，再加入步驟(2)得到的對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-酪胺共聚物溶液，室溫下反應12～72h，反應結束后過濾除去對硝基苯基氯甲酸酯鹽沉淀，過濾后得到的濾液再在純水中透析4～8天，凍干得到接枝聚乙二醇和酪胺的ε-聚賴氨酸；

(4)將步驟(3)得到的接枝聚乙二醇和酪胺的ε-聚賴氨酸溶解在水或者磷酸緩沖液中，加入辣根過氧化物酶與過氧化氫的混合水溶液，室溫下攪拌5～60s形成聚賴氨酸水凝膠。

3.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，聚乙二醇溶解在二氯甲烷中，使得溶質聚乙二醇的濃度為50～200g/L；對硝基苯基氯甲酸酯的二氯甲烷溶液中，溶質對硝基苯基氯甲酸酯的濃度為20～40g/L。

4.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，聚乙二醇、4-二甲氨基吡啶、三乙胺、對硝基苯基氯甲酸酯的反應摩爾比為1:2～5:2～5:2～5。

5.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的冷乙醚溫度為-4℃～-20℃，冷乙醚用量為旋蒸后反應液體積的20～40倍。

6.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，真空冷凍干燥溫度為-40℃～-80℃，壓力為10～30Pa。

7.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所有操作都在室溫無水無氧條件下進行。

8.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(2)、(3)和(4)中，所述的磷酸緩沖液為pH7.4、0.01～0.2mol/L的磷酸緩沖液。

9.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-對硝基苯基氯甲酸酯共聚物溶解在磷酸緩沖液中，溶質硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-對硝基苯基氯甲酸酯共聚物的濃度為50～100g/L；溶有酪胺的磷酸緩沖液中，溶質酪胺的濃度為3～10g/L。

10.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-對硝基苯基氯甲酸酯共聚物與酪胺的摩爾比為2:0.5～1.5。

11.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所有操作都在室溫無氧條件下進行。

12.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，聚賴氨酸溶解在磷酸緩沖液中，溶質聚賴氨酸濃度為0.43～1.09g/L。

13.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，ε-聚賴氨酸與對硝基苯基氯甲酸酯-聚乙二醇-對硝基苯基氯甲酸酯共聚物的摩爾比為0.04～0.07：2。

14.根據權利要求2所述的ε-聚賴氨酸水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所有操作都在室溫無氧條件下進行。