[發明專利]酶法合成辛伐他汀的制備方法

有效

• 申請號: 201310721674.6
• 申請日: 2013-12-24
• 公開（公告）號: CN103725726A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發明（設計）人: 葛祥斌;李賢坤;楊俊發;馬金鳳;張健
• 申請（專利權）人: 煙臺只楚藥業有限公司
• 主分類號: C12P17/06
• 分類號: C12P17/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及降血脂類藥物辛伐他汀的合成方法，具體地說，提供一種酶法合成辛伐他汀的制備方法。屬于藥物領域。

背景技術

辛伐他汀為羥甲基戊二酰輔酶A(HMG—CoA)還原酶抑制劑，臨床主要用于治療高膽固醇和高甘油三酯血癥。1988年該藥首先在瑞典上市，1995年已在70多個國家廣泛應用。近年來發現除調血脂作用外，它還具有其他方面的作用，如抗氧化、抗炎、抑制細胞增殖、促進骨合成代謝、治療心衰等作用。現有的辛伐他汀生產工藝，如CN1290261A、CN1612872A、CN1493570A等，主要是化學合成法，不僅反應步驟多、復雜，而且產品雜質很高，工藝對環境污染嚴重。CN102703539A公開了由洛伐他汀經包含酶促水解反應和酶促酰化反應步驟的工藝制得辛伐他汀的方法以及該方法中所用到的酶，然而，該方法得到的產物中副產物較多，制得的辛伐他汀產品中雜質個數和含量難于滿足藥用級辛伐他汀原料質量要求，而且方法中所用的酶以及一些試劑或原料在國內不易獲得，工藝成本比較高，難于產業化。

發明內容

本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了一種減少反應步驟、減少對環境的污染、提高產品質量的制備方法。

為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為用酶法合成辛伐他汀的制備方法，具體如下：

本發明提供了一種用酶法合成辛伐他汀的方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）將洛伐他汀進行堿水解；

（2）將步驟（1）制得的堿水解產物在固定化水解酶存在下進行酶水解，其中所述的固定化水解酶是將洛伐他汀水解酶固定到多孔樹脂上后的復合體；

（3）將步驟（2）制得的酶水解產物與2,2-二甲基丁酰基-S-丙酸甲酯在固定化酰化酶存在下進行酰化反應，其中所述的固定化酰化酶是將洛伐他汀酰化酶固定到多孔樹脂上后的復合體；

（4）將步驟（3）制得的酰化產物進行環合，得到辛伐他汀。

上述所述的方法，其中步驟（1）中水解反應至洛伐他汀殘留＜0.5%時，反應產物不經分離進行下一步的酶水解反應。

上述所述的方法，其中步驟（2）或（3）中的反應溫度為室溫至40℃，pH為8.5～9.5；優選所述的反應溫度為35℃，pH為8.9～9.1。

上述所述的方法，其中步驟（2）酶水解反應結束后，反應產物過濾分離出所述的固定化水解酶，濾液不經分離進行下一步的酰化反應。

上述所述的方法，其中步驟（3）酰化反應結束后，反應產物過濾分離出所述的固定化酰化酶，濾液冷卻后，得到酰化產物辛伐他汀酸或其鹽。

上述所述的方法，其中步驟（4）中辛伐他汀酸或其鹽在有機溶劑中進行加熱回流，得到辛伐他汀。

上述所述的方法，其中步驟（2）或（3）中用濃氨水或NH₄/NH₄Cl溶液調節pH。

上述所述的方法，其中步驟（2）或（3）中，所用的固定化水解酶或固定化酰化酶的用量與洛伐他汀重量相同。

作為本發明一個最優選實施方式，所述的方法中：

所述步驟（1）為：將洛伐他汀加入不銹鋼反應罐中，同時加入純化水和氫氧化鈉，加入純化水的量與洛伐他汀的重量相等，加入氫氧化鈉的量是洛伐他汀重量的1/15，攪拌,反應至洛伐他汀殘留＜0.5%，得到的反應混合溶液進入下一步驟；

所述步驟（2）為：將步驟（1）得到的反應混合液降溫至30℃，加入NH₄/NH₄Cl,調pH8.9-9.1,升溫至35℃，加入所述的固定化水解酶，固定化水解酶的用量與洛伐他汀重量相等，待水解反應結束后過濾分離出固定化水解酶，濾液進入下一步驟；

所述步驟（3）為：將步驟（2）得到的濾液加入不銹鋼反應罐中，降溫至25℃，加入所述的固定化酰化酶，固定化酰化酶用量與洛伐他汀重量相等，攪拌后得到的混合物中加入2,2-二甲基丁酰基-S-丙酸甲酯，2,2-二甲基丁酰基-S-丙酸甲酯用量與洛伐他汀重量相等，得到的混合物保持25℃恒溫，用濃氨水調整并保持PH8.9-9.1，直到酰化反應結束后，得到的反應混合物進行過濾，分離出固定化酰化酶，濾液進入下一步驟；