[發明專利]一種應用于紅棗濃縮汁生產阿洛酮糖的雙酶偶聯與固定化技術

無效

• 申請號: 201310720309.3
• 申請日: 2013-12-24
• 公開（公告）號: CN103789378A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 張佳;張佩舜;李奠礎;鄭麗萍;張富剛;康振奎;王曉艷;馮俊敏;鞏晉龍;王小鵬
• 申請（專利權）人: 山西天驕食業有限公司
• 主分類號: C12P19/24
• 分類號: C12P19/24;C12P19/02
• 代理公司: 太原高欣科創專利代理事務所(普通合伙) 14109
• 代理人: 崔雪花

1.一種應用于紅棗濃縮汁生產阿洛酮糖的雙酶偶聯與固定化技術，其特征在于按照以下步驟進行：

第一步，固定化

將定點突變的葡萄糖異構酶和D-阿洛酮糖3-差向異構酶的混合酶液加入樹脂中，每1.0g樹脂加酶量：0.5~2ml混合酶液，吸附溫度為25℃~35℃，吸附pH=6.5~7.5，吸附時間100~140min，然后加入交聯劑，交聯25~35min得到固定化酶，所述交聯劑體積份數為0.03%~0.06%；所述定點突變的葡萄糖異構酶為將葡萄糖異構酶氨基酸序列的146位的精氨酸定點突變為脯氨酸得到的突變的葡萄糖異構酶；

第二步，催化紅棗汁生產阿洛酮糖

將紅棗汁加入所述固定化酶中，控制溫度：60~70℃；pH值：5.0~7.0；所述紅棗汁與固定化酶的重量份比為1-5:1；5-10小時候完成催化反應，得到D-阿洛酮糖混合液。

2.根據權利要求1所述的一種應用于紅棗濃縮汁生產阿洛酮糖的雙酶偶聯與固定化技術，其特征在于：所述第一步中，混合酶液中的定點突變的葡萄糖異構酶和D-阿洛酮糖3-差向異構酶的重量份比為4：1。

3.根據權利要求1所述的一種應用于紅棗濃縮汁生產阿洛酮糖的雙酶偶聯與固定化技術，其特征在于：所述樹脂為雙酚A環氧乙烯基酯。

4.根據權利要求1所述的一種應用于紅棗濃縮汁生產阿洛酮糖的雙酶偶聯與固定化技術，其特征在于：所述交聯劑為戊二醛、飽和硼酸與1wt%的CaCl₂溶液的混合溶液或50?wt?%的NaNO₃溶液和1?wt?%的CaCl₂?溶液的混合溶液。

5.根據權利要求2所述的一種應用于紅棗濃縮汁生產阿洛酮糖的雙酶偶聯與固定化技術，其特征在于：所述混合酶液中定點突變的葡萄糖異構酶的濃度為1-8mg/mL。