[發(fā)明專利]納洛酮的酶法制備及其藥物組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310711466.8
• 申請日: 2013-12-20
• 公開（公告）號: CN103695497A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉軍;楊春瑋
• 申請（專利權(quán)）人: 奇方（天津）醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C12P17/18
• 分類號: C12P17/18;A61K31/485;A61P39/02;A61P25/00;A61P9/10;A61P7/04;A61P11/16;A61P1/16;A61P25/18;C12N9/02;C12N15/53;C12N15/63
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務(wù)所(普通合伙) 11130
• 代理人: 孟旭;王為

1.酶法制備納洛酮的方法，其包括，

（A）任選將蒂巴因氧化氫化成14-羥基-7,8-二氫可待因酮；

（B）在脫甲基酶的作用下，將14-羥基-7,8-二氫可待因酮生成14-羥基-7,8-二氫降嗎啡酮純度高并含14-羥基-7,8-二氫可待因酮的組合物，其中所述脫甲基酶的氨基酸序列：

（1）如SEQ?ID?No:2所示，或

（2）是對SEQ?ID?No:2缺失、添加和/或取代一個或幾個氨基酸殘基而獲得的保留SEQ?ID?No:2活性的序列；

（C）將步驟（B）獲得的組合物中的14-羥基-7,8-二氫降嗎啡酮烷基化成納洛酮，獲得納洛酮純度高并含14-羥基-7,8-二氫可待因酮的組合物；和，

（D）任選（但并不優(yōu)選）進一步純化和/或鹽酸化步驟（C）獲得的組合物。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中，在步驟（C）獲得的組合物中，納洛酮的純度大于95%，優(yōu)選大于96%，更優(yōu)選大于97%，如大于97.5%；或，在步驟（C）獲得的組合物中，14-羥基-7,8-二氫可待因酮的含量小于5%，優(yōu)選小于4%，更優(yōu)選小于3%，如小于2.5%；或，在步驟（C）中，14-羥基-7,8-二氫降嗎啡酮被溴丙烯烷基化成納洛酮。

3.權(quán)利要求1所述的方法，其中，在步驟（A）中，蒂巴因在甲酸中被過氧化氫氧化成14-羥基可待因酮，然后14-羥基可待因酮被氫氣氫化成14-羥基-7,8-二氫可待因酮。

4.權(quán)利要求1所述的方法，其中，在步驟（B）獲得的組合物中，14-羥基-7,8-二氫降嗎啡酮的純度大于90%，優(yōu)選大于92%，更優(yōu)選大于93%，如大于93.5%；或，在步驟（B）獲得的組合物中，14-羥基-7,8-二氫可待因酮的含量小于10%，優(yōu)選小于8%，更優(yōu)選小于7%，如小于6%；或，步驟（B）不包括對步驟（B）獲得的組合物進一步提純的步驟。

5.含納洛酮的組合物，其包含納洛酮并含14-羥基-7,8-二氫可待因酮，其中納洛酮的純度大于95%，優(yōu)選大于96%，更優(yōu)選大于97%，如大于97.5%；或，其中14-羥基-7,8-二氫可待因酮的含量小于5%，優(yōu)選小于4%，更優(yōu)選小于3%，如小于2.5%。

6.權(quán)利要求5所述的組合物，優(yōu)選其是由權(quán)利要求1～4之任一所述的方法制備的。

7.權(quán)利要求5或6所述的組合物，其成藥效果與納洛酮無顯著區(qū)別。

8.權(quán)利要求5～7之任一所述的組合物在制備納洛酮能治療的疾病（選自：中毒性疾病，如急性海洛因中毒、急性酒精中毒、急性亞硝酸鹽中毒、有機磷農(nóng)藥中毒和/或急性一氧化碳中毒；中樞系統(tǒng)疾病，如腦梗死（腦中風）、急性重癥腦出血、外傷性彌漫性腦腫脹、急性重癥顱腦損傷和/或眩暈；兒科疾病，如新生兒缺氧缺血性腦病、新生兒窒息、早產(chǎn)兒原發(fā)性呼吸暫停和/或小兒驚厥持續(xù)；以及，肝臟病變、精神分裂癥和/或重度心肌缺血）的藥物中的應(yīng)用。

9.權(quán)利要求5～7之任一所述的組合物的鑒定方法，其包括檢測納洛酮和14-羥基-7,8-二氫可待因酮的存在性。

10.脫甲基酶、其編碼基因、載體、細胞或制備方法，所述脫甲基酶的氨基酸序列：

（1）如SEQ?ID?No:2所示，或

（2）是對SEQ?ID?No:2缺失、添加和/或取代一個或幾個氨基酸殘基而獲得的保留SEQ?ID?No:2活性的序列。