[發(fā)明專利]一種用陶瓷膜去除粗品肝素鈉中雜質(zhì)的方法

有效

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• 申請日: 2013-12-20
• 公開（公告）號: CN103724457A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 姬勝利;高樹華;趙利濤;王志華
• 申請（專利權(quán)）人: 河北常山生化藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 石家莊新世紀(jì)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 13100
• 代理人: 齊蘭君

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用陶瓷膜去除粗品肝素鈉中雜質(zhì)的方法。

背景技術(shù)

肝素是廣泛存在于動物器官和小腸粘膜、肺等組織中的一種葡萄糖胺聚糖。在常規(guī)提取過程中，大量的蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、核酸等雜質(zhì)影響肝素鈉的提純過程，這些雜質(zhì)在粗品肝素鈉中含量的多少直接影響肝素鈉產(chǎn)品活性和產(chǎn)品質(zhì)量。

傳統(tǒng)工藝去除酶解液中的大分子蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、核酸等雜質(zhì)目前國內(nèi)大多數(shù)采用的方法有兩種：一種是采用板框過濾、轉(zhuǎn)鼓、離心分離等傳統(tǒng)過濾方式或分離設(shè)備，這種過濾方式僅能濾除可視雜質(zhì)及少量大顆粒雜質(zhì)，而酶解液中還存在大量的難以濾除的水溶性蛋白雜質(zhì)；另一種是采用添加絡(luò)合劑絮凝沉降（如通過加絡(luò)合劑、明礬、碳酸鈣、聚合氯化鋁等方法）或等電點沉淀的方法，這類方法能使絡(luò)合劑與蛋白絡(luò)合成較大顆粒，然后再通過板框過濾、離心過濾等傳統(tǒng)“死端過濾”“濾餅過濾”等過濾方式去除，這種方法缺點是絡(luò)合物加入量、配比濃度以及加入絡(luò)合劑的速度、周期有嚴(yán)格要求，而且需要一定的靜止時間，同時這種絡(luò)合劑由于與肝素鈉有一定的絡(luò)合作用易造成肝素活性的損失，現(xiàn)一般基本不再采用這種絡(luò)合方式。上述傳統(tǒng)工藝沿用已久，使用普遍，但這些傳統(tǒng)工藝只能將酶解液中大的懸浮物等固體物予以粗分離，無法將酶解液中大量存在的可溶性蛋白、雜糖、色素等予以分離。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種利用陶瓷膜去除粗品肝素鈉提取過程中雜質(zhì)的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的弊端。

為實現(xiàn)本發(fā)明目的，這種用陶瓷膜去除粗品肝素鈉中雜質(zhì)的方法，其特征在于包括以下工藝步驟：

將豬小腸粘膜與水按1:6～8的質(zhì)量比混合后依次加入NaCl和蛋白酶，然后升溫50～60℃后在攪拌下酶解3～5小時，所述NaCl的加入量為豬小腸粘膜質(zhì)量的1/8～1/6,所述蛋白酶的加入量為豬小腸粘膜質(zhì)量的0.2～0.4%；

將上述所得酶解液過濾后在50℃～60℃、0.2～0.3MPa下經(jīng)5nm陶瓷膜過濾；

在上述過濾后的澄清液中加入離子交換樹脂后攪拌吸附6～8小時；

將上述吸附肝素鈉的離子交換樹脂用4～7%NaCl水溶液洗滌后，再用20～24%NaCl水溶液洗脫離子交換樹脂后得到含肝素鈉的洗脫液；

向上述所得洗脫液中加入85～95%乙醇，當(dāng)溶液中乙醇濃度達(dá)40～50%（w/v）時，靜置沉淀2小時后脫水、干燥，得粗品肝素鈉，所述乙醇的加入量為洗脫液質(zhì)量的2～4倍。

本發(fā)明取得的技術(shù)進(jìn)步：

常溫密閉操作，保證產(chǎn)品活性，符合現(xiàn)在GMP認(rèn)證要求

本發(fā)明酶解液是在密閉的管道和膜腔內(nèi)循環(huán)過程中完成物料的分離過程，溶液不直接與大氣接觸，符合GMP生產(chǎn)要求。

分離精度高，過濾效率高

無機(jī)陶瓷膜膜層的孔徑分布很窄，5nm孔徑陶瓷膜絕對精度高，可保證酶解液中大量雜質(zhì)無法輕易透過膜層，對雜質(zhì)的截留率達(dá)99％以上，對酶解液中的大分子蛋白截留率遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的過濾、絡(luò)合劑沉降等去除方式。

可大幅度提高產(chǎn)品收率

本發(fā)明可最大限度收集酶解液雜質(zhì)中的有效成分，提高產(chǎn)品的收率，與現(xiàn)有傳統(tǒng)濾袋、濾布、板框過濾式方法比較，收率可達(dá)99.5%。

可保證粗品肝素鈉質(zhì)量

由于濾出液中少量小分子蛋白等雜質(zhì)相對于傳統(tǒng)方法含量明顯減小,且透過液澄清透明，保證了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

廢水排放量大大減小

陶瓷膜過濾去除溶液中的雜質(zhì)，與傳統(tǒng)工藝中廢水排放污染比較，可最大限度減小排污,廢水中COD顯著降低，有效降低了污水處理費用，減輕了環(huán)保壓力。

濾液澄清透明，減輕后續(xù)吸附處理難度

陶瓷膜濾液大大簡化了后續(xù)離子交換除雜步驟和降低了后續(xù)離子交換樹脂污染程度，從而延長了離子交換樹脂使用壽命，離子交換樹脂使用壽命可延長40～50%，節(jié)省了樹脂輔料消耗費用。

無需添加助劑

由于膜過濾過程為簡單物理過濾過程，僅靠高精度的膜孔徑對物料組分進(jìn)行分離，無需額外助劑進(jìn)行絮凝，過濾結(jié)束后的濾渣由于無污染并含有高蛋白，可作為加工飼料或有機(jī)肥料回收。