[發(fā)明專利]一種劍麻皂素的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310705807.0
• 申請日: 2013-12-19
• 公開（公告）號: CN103834713A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發(fā)明（設計）人: 謝慶武;鄧天發(fā);王京博;劉泰東
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;C07J71/00
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 彭曉玲

技術領域

本發(fā)明涉及劍麻皂素，尤其涉及一種劍麻皂素的提取方法。

背景技術

劍麻皂素（tigogenin）具有抗炎、鎮(zhèn)痛、增強免疫、降低血糖、抗腫瘤、抗癌、抗菌、降血脂、降血壓等作用，應用廣泛，可用于合成120多種激素類藥物，還可應用于食品、化妝品及畜牧業(yè)等行業(yè)。劍麻皂素在劍麻中以甾體皂苷配基的形式存在，在其C3位和C26位等通過糖苷鍵與糖鏈（由葡萄糖、木糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖等組成）相連，形成劍麻皂苷。生產劍麻皂素的關鍵工序是水解劍麻皂苷中與其直接相連的糖苷鍵。目前，國內生產劍麻皂素的工藝都是強酸水解法，用強酸來水解劍麻皂苷，其反應條件劇烈，設備要求高，污染嚴重，而且常伴有脫水、構型改變等副反應發(fā)生，影響產品質量。

發(fā)明內容

為了解決上述強酸水解法生產劍麻皂素技術的不足之處，本發(fā)明的目的在于提供一種劍麻皂素的提取方法，先用劍麻皂苷水解酶降解劍麻皂苷，然后再從含有劍麻皂素的水解液提取劍麻皂素的方法。

本發(fā)明的目的通過如下技術方案實現(xiàn)：

1、一種劍麻皂素的提取方法，包括以下步驟：

(1)發(fā)酵產酶：將絲狀真菌接種至培養(yǎng)基上，發(fā)酵結束后，將發(fā)酵液過濾，得到劍麻皂苷水解酶粗酶液；

(2)降解劍麻皂苷：將劍麻皂苷加入劍麻皂苷水解酶粗酶液，調節(jié)pH，攪拌反應后靜置24～48小時，使劍麻皂素自然沉淀；

(3)離心收集劍麻皂素：將步驟(2)酶促反應液的上清液排出，5000～8000轉/分鐘離心分離沉淀液，收集沉淀，烘干、粉碎后得到劍麻皂素粗品；

(4)劍麻皂素的純化：往劍麻皂素粗品中加入氯仿或正丁醇，過濾，濃縮濾液，冷卻、結晶、離心收集沉淀；

(5)烘干沉淀：將步驟(4)離心收集的劍麻皂素沉淀烘干，得到劍麻皂素。

優(yōu)選的是：步驟(1)所述的絲狀真菌包括黑曲霉、鏈孢霉菌、青霉；所述的培養(yǎng)基為：每100ml水含有0.5～2g可溶性淀粉、0.1～2g胰蛋白胨、0.1～1gK₂HPO₄、0.01～0.8g?MgSO₄、0.001～0.20g?KCl、0.001～0.018g?FeSO₄、0.5～3g劍麻渣粉末，培養(yǎng)基pH為7.0，接種量0.5～2％，發(fā)酵溫度為30℃，發(fā)酵時間為42～54小時。

優(yōu)選的是：步驟(2)中按1︰50～1︰100質量體積比將劍麻皂苷加入粗酶液。

優(yōu)選的是：步驟(2)中調節(jié)pH4～6，攪拌反應溫度為38～45℃，攪拌反應時間為15～22小時。

優(yōu)選的是：步驟(4)中劍麻皂素粗品和氯仿按1︰8質量體積比加入，劍麻皂素粗品和正丁醇按1︰10質量體積比加入；濃縮濾液為原體積的10％，冷卻溫度為0～10℃。

優(yōu)選的是：步驟(5)中烘干溫度為100～110℃。

本發(fā)明用劍麻皂苷水解酶來水解劍麻皂苷，釋放出劍麻皂素，然后將劍麻皂素提取出來。與強酸法制備劍麻皂素的工藝相比，酶法制備劍麻皂素具有環(huán)保、專一性高等特點，本發(fā)明提取出的劍麻皂素，不用強酸，沒有酸污染，工藝簡單，易于擴大生產規(guī)模。

具體實施方式

下面結合具體實施例，對本發(fā)明作進一步詳細的闡述，但本發(fā)明的實施方式并不局限于實施例表示的范圍。這些實施例僅用于說明本發(fā)明，而非用于限制本發(fā)明的范圍。此外，在閱讀本發(fā)明的內容后，本領域的技術人員可以對本發(fā)明作各種修改，這些等價變化同樣落于本發(fā)明所附權利要求書所限定的范圍。

實施例1