[發明專利]一種黑僵菌的培養方法

有效

• 申請號: 201310705759.5
• 申請日: 2013-12-19
• 公開（公告）號: CN104726341B
• 公開（公告）日: 2018-11-27
• 發明（設計）人: 陳麗萍
• 申請（專利權）人: 漳州市英格爾農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 李雁翔

本發明公開了一種黑僵菌的培養方法，其包括如下步驟：（1）培養容器滅菌，待用；香蕉去皮,高壓滅菌后冷卻，加到培養容器上待用；（2）接種：將黑僵菌孢子或菌體接種到滅菌后的香蕉上；（3）培養：培養溫度控制在20～30℃，培養室相對濕度控制在95%以上,培養至菌絲體滿布培養基表面；（4）獲取：待培養基表面菌絲全面復蓋變黑，培養室的相對濕度緩慢降低,至培養基里外都長滿了乳黃色的孢子時進行干燥處理。采用本發明的方法，培養周期可以縮短至5天，而產品的含孢子量可達到1000億/g，比現有技術提高10倍以上。本發明可采用次品香蕉，其價格低廉，成本低。

技術領域

本發明涉及微生物培養領域，具體的，涉及一種黑僵菌的培養方法。

背景技術

黑僵菌(Metarhizium anisopliae)為一種可以殺死昆蟲的真菌，其應用范圍有鱗翅目昆蟲：斜紋夜蛾(黑肚蟲)、甜菜夜蛾(管仔蟲)、小菜蛾(吊絲蟲)、玉米穗蟲(青蟲)等。鞘翅目昆蟲：金龜子(雞母蟲)、叩頭蟲(金針蟲)等。直翅目昆蟲：蝗蟲等。黑僵菌分生孢子被害蟲攝食后，沿腸道進入中腸，在中腸中釋放出毒素，使中腸細胞內的線粒體和內質網結構改變，細胞核萎縮而死亡。受黑僵菌感染死亡的幼蟲之后體表滿布分生孢子，借由分生孢子的傳播于田間行成重復有效的感染源。

現有的黑僵菌培養方法為谷殼、麥麩等固體培養基進行培養，孢子液接種，7天后開始收孢子，其孢子量一般在100億/克。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新的黑僵菌的培養方法。

本發明提供的技術方案如下：

一種黑僵菌的培養方法，其特征在于：采用香蕉去皮之后作為培養基，將黑僵菌孢子或菌體接種到培養基上進行培養。

較佳地，前述的一種黑僵菌的培養方法，包括如下步驟：

（1）培養容器滅菌，待用；香蕉去皮,高壓滅菌后冷卻，加到培養容器上待用；

（2）接種：將黑僵菌孢子或菌體接種到滅菌后的香蕉上；

（3）培養：培養溫度控制在20～30℃，培養室相對濕度控制在95%以上,培養至菌絲體滿布培養基表面；

（4）獲取：待培養基表面菌絲全面復蓋變黑，培養室的相對濕度緩慢降低,至培養基里外都長滿了乳黃色的孢子時進行干燥處理。

較佳地，步驟（1）的所述的培養容器為開放式的培養容器，例如可以采用敞口容器，如盤狀、碗狀、長方體等各種形狀。

較佳地，步驟（1）的香蕉培養基在培養容器上的厚度為1-5cm。更佳地為3-4cm。

較佳地，步驟（2）的接種比例為，按重量比，接種的孢子液體與培養基之間的液固比為0.5-5：10。

較佳地，步驟（3）培養室溫度控制在20～24℃；培養室相對濕度在24h內控制在95%以上,24～48h內控制在100%,可通過每天噴無菌水來調節培養室的相對濕度，2d后停止噴水。

較佳地，步驟（4）中，培養室的溫度提高到25℃-26℃,培養室的相對濕度緩慢降低,培養至第5d,培養基里外都長滿了乳黃色的孢子這時可進行干燥處理。

采用本發明的方法，培養周期可以縮短至5天，而產品的含孢子量可達到1000億/g，比現有技術提高10倍以上。本發明可采用次品香蕉，其價格低廉，成本低。

具體實施方式

實施例1

香蕉去皮作為固體培養基。固體培養基的滅菌高壓滅菌壓力為1.2kg/cm²,保壓60min,冷卻后待用常壓滅菌，利用蒸氣消毒柜消毒，100℃保溫2h,冷卻待用。